国家高技术研究发展计划(2006AA10Z1A3)
- 作品数:3 被引量:18H指数:2
- 相关作者:邵彦春陈福生李利丁月娣谢笔钧更多>>
- 相关机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- TAIL-PCR法快速分离红曲霉色素突变株T-DNA插入位点侧翼序列被引量:12
- 2007年
- 采用热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)法分离红曲霉色素突变株T-DNA插入位点的侧翼序列,扩增到了长度介于500bp~1300bp之间的7个DNA片段,对这些DNA片段测序,并采用生物信息学方法对测序结果进行了分析,表明其中有1个片段与烟曲霉Af293发育调控子flbA的相似性较高。TAIL-PCR法成功应用于分离红曲霉突变株T-DNA插入位点的侧翼序列,为大规模获取插入位点侧翼序列建立了可行的方法,也为进一步研究红曲霉功能基因奠定了基础。
- 邵彦春丁月娣陈福生谢笔钧
- 关键词:红曲霉T-DNA插入TAIL-PCR
- 根癌农杆菌介导的定点敲除技术在红色红曲菌中的应用被引量:6
- 2009年
- 红曲菌(Monascus spp.)是一种重要的丝状真菌,广泛应用于食品和医药领域中。目前,由于对红曲菌遗传背景了解的很少,因而对其重要功能基因的研究报道很少。本研究采用根癌农杆菌介导的转化技术对红色红曲菌(Monascus ruber)中推断的G-蛋白信号调节子mrfA基因的RGS功能域进行定点缺失研究,探讨基于同源重组为基础的基因定点缺失技术在红曲菌基因功能鉴定中的可行性。构建的敲除载体pC805S左右同源臂长度分别为958bp和824bp,将其转入受体菌M.ruber中,得到的138株转化子中,有26株转化子发生了同源重组,重组率达到18.8%。实验结果表明该技术作为红曲菌基因功能鉴定的方法是可行的。
- 邵彦春李利杨莎赵颖王小红陈福生
- 关键词:同源重组
- 红曲菌T-DNA插入突变库转化子的特征及代谢产物分析被引量:1
- 2009年
- 以农杆菌介导的红曲菌T-DNA插入突变库中8 000多株转化子为材料,通过菌落形态观察,获得230株形态变化显著的突变子,并将其分为7类。在此基础上,分析了14株代表菌株产色素、莫纳可啉K(Mo-nacolin K)、桔霉素和淀粉酶的情况。结果表明:所有供试菌株的产色素能力均低于出发菌株M-7,其中806#和2553#的色价均不到M-7的1/10;10株突变菌株产Monacolin K的能力高于M-7,其中3245#产Monacolin K的能力较M-7提高了近10倍,达到679.25μg/g;1822#产桔霉素(干红曲)能力最高,达60.01 ng/g,是M-7的近30倍,而806#和178#产桔霉素能力较低,在试验条件下未检测到;13株突菌株的淀粉酶活高于M-7,1067#最高约为M-7的20倍,达3 227.10 U/g。
- 徐驰邵彦春吴佳佳叶阳李利李琦陈福生
- 关键词:红曲菌代谢产物