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吉林省科技厅科技发展计划项目(20030546)
吉林省科技厅科技发展计划项目(20030546)
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谭岩
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人sFlt-1基因转染骨髓基质细胞对K562细胞生长的影响
2008年
目的:通过转基因的方法获得人可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)蛋白的稳定表达,并检测其对K562细胞生长的影响。方法:构建真核表达载体pcDNA3-sFlt-1D4,用脂质体介导的方法将其转染骨髓基质细胞,采用RT-PCR、ELISA和MTT法检测转基因产物的表达及对K562细胞生长的影响。结果:流式细胞仪检测骨髓基质细胞的转染率为9.27%。ELISA法检测转染后24h、48h及4周转基因骨髓基质细胞培养上清中sFlt-1D4蛋白的表达浓度分别为(0.104±0.078)、(0.158±0.022)和(0.171±0.069)μg.L-1。ELISA法证实转基因组培养上清中VEGF含量降低。MTT法检测转染24h、48h及4周的转基因产物对K562细胞的抑瘤率分别为9.41%±4.71%、23.63%±7.50%和33.13%±6.93%。结论:转基因方法可以获得sFlt-1D4蛋白的表达,转基因蛋白具有抑制K562细胞生长的作用。
王倩
宋艳秋
谭岩
段秀梅
刘力华
关键词:
内皮
转染
骨髓基质细胞
K562细胞
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