国家自然科学基金(30670163)
- 作品数：15 被引量：68H指数：6
- 相关作者：陈丽梅李昆志宋中邦马莉年洪娟更多>>
- 相关机构：昆明理工大学广西农业科学院西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学轻工技术与工程更多>>
- 洋桔梗的转基因研究被引量：2
- 2010年
- 以叶盘为外植体,通过农杆菌菌株C58Cl(pPMP90)介导,开展了用植物表达载体pK2-35S-GFP(含GFP基因)转化洋桔梗(Eustoma russellianum)的研究。洋桔梗叶盘用农杆菌浸染15-20min,在共培养基上与农杆菌共培养2d后,转移到分化培养基上诱导愈伤组织。10d后选取部分叶盘在紫外灯下观察GFP的荧光亮点,结果80%以上的叶盘都有GFP的荧光亮点,说明农杆菌对叶盘的感染效率很高。在分化培养基上红花洋桔梗叶盘不定芽分化频率约为30%,把分化培养基上形成的小苗转移到含有Km(20mg/L)的生根培养基上,进行生根诱导筛选具有Km抗性的转基因植株,统计结果说明红花洋桔梗的转化效率为2.4%。随机选取4株具有Km抗性的洋桔梗植株进行PCR检测,结果均为阳性,证明GFP基因已整合到洋桔梗基因组中,选取经PCR检测为阳性的植株叶片,用激光共聚焦显微镜观察,结果发现有GFP的绿色荧光出现在叶片细胞质中,说明叶片中有GFP蛋白的表达,转化试验成功。
- 陈奇王阁奇马莉陈丽梅
- 关键词：洋桔梗农杆菌介导转基因GFP基因
- 细菌的核酮糖单磷酸途径与甲醛同化作用被引量：5
- 2007年
- 核酮糖单磷酸途径最初在甲基营养菌中发现,现在被认为是在细菌中广泛存在的和甲醛同化作用及脱毒相关的一条途径,该途径的关键酶是6-磷酸己酮糖合成酶和6-磷酸己酮糖异构酶。文章将介绍来源于各种细菌的核酮糖单磷酸途径的生理作用及其两个关键酶基因的组织结构、表达调控机制与应用前景。
- 宋中邦陈丽梅李昆志潘正波
- 关键词：甲基营养菌
- 高等植物中一碳化合物代谢研究进展被引量：11
- 2009年
- 高等植物中一碳(C1)化合物的代谢主要包括甲醇代谢、甲醛代谢和甲酸代谢等,它们是高等植物一碳单位代谢的重要组成部分.由于C1化合物的代谢机制复杂、代谢规模非常小、参与代谢反应的酶和中间产物的含量低且不稳定等特点,相关研究报道很有限.现代生化和分子遗传学方法的综合使用使得人们对参与植物中C1化合物代谢的酶和基因有了一定程度的了解,该文主要综述了近年来有关高等植物中内源和外源C1化合物甲醇、甲醛和甲酸的来源和代谢途径方面的研究进展,并提出了该研究领域目前存在的问题和今后的研究方向.
- 徐迪陈丽梅年洪娟梅岩
- 关键词：高等植物
- 用于通路(Gateway)克隆技术的植物表达载体研究进展被引量：6
- 2012年
- 通路(Gateway)克隆技术是根据λ噬菌体基因组和大肠杆菌基因组之间的位点专一性重组分子机制开发的一套分子克隆新技术。利用该技术LR反应构建目的基因的表达载体时不需要经过酶切和连接等繁琐而又费时的过程,因此,可以节省很多时间。为了扩大Gateway技术在植物基因工程领域的应用,最近有很多研究机构和研究小组开发了能用于组成型或诱导型表达目的基因、基因沉默、启动子分析、蛋白质亚细胞定位、蛋白质/蛋白质相互作用、多个DNA片段的模块化组装和DNA组片段功能验证等研究用的植物表达载体。该文对这些技术的研究进展进行了综述。
- 肖素勤孙振轩秀霞陈丽梅
- 关键词：植物表达载体
- 甲基营养微生物的甲醛代谢途径及其在环境生物技术中的应用被引量：12
- 2012年
- 甲醛是一种毒性很高的一碳化合物,甲基营养菌是一类能在有高浓度甲醛的环境中生存的微生物,它们体内有多种降解甲醛的氧化途径和将甲醛转化为细胞组分的同化途径。丝氨酸途径和酮糖单磷酸途径是同时存在于甲基营养型细菌中的两种甲醛同化途径,木酮糖单磷酸途径是甲基营养型酵母菌中独有的甲醛同化途径。为了充分挖掘甲基营养型微生物在环境生物技术中的潜在应用价值,最近有很多研究尝试利用甲基营养微生物的细胞及其甲醛代谢途径关键酶开发甲醛污染检测方法和生物治理技术,对这方面的研究进展进行综述。
- 张韦宋中邦陈丽梅
- 关键词：微生物甲醛污染甲基营养菌环境生物技术
- 在天竺葵叶绿体中过量表达人工构建的HPS/PHI融合蛋白安装甲醛的光合作用固定途径
- ＜正＞甲醛是一种强致癌物质,目前已成为一种主要的室内污染气体。植物修复是清除室内甲醛污染的一种非常环保的方式,但植物自身甲醛代谢能力较弱影响了修复效果。核酮糖单磷酸途径（RuMP）是广泛存在于甲基
- 宋中邦殷飞马莉陈红梅李昆志陈丽梅
- 关键词：天竺葵叶绿体光合作用
- 文献传递
- 应用FTIR分析过量表达HPS/PHI转基因与野生型天竺葵叶片在甲醛胁迫下的生理特性差异被引量：1
- 2012年
- 6-磷酸己酮糖合成酶(HPS)和6-磷酸果糖异构酶(PHI)是细菌同化甲醛的关键酶。13 C-NMR分析结果说明在天竺葵叶绿体中过量表达HPS/PHI融合蛋白可把RuMP途径整合成卡尔文循环的一个支路,在转基因天竺葵叶绿体中创造一个甲醛光合同化途径。运用FTIR技术分析过量表达HPS/PHI转基因与野生型天竺葵在甲醛胁迫下体内各物质含量的变化规律及光谱表征,考察FTIR能否成为一种鉴定有甲醛光合同化途径的转基因植物与野生型植物表型差异的新方法。分别用4mmol.L-1甲醛处理野生型和转基因植物0,1,2,3,4d,通过对两种植物经甲醛处理不同时间后各光谱特征的比较分析发现,用4mmol.L-1甲醛处理4d后转基因植物中的碳水化合物、蛋白质、脂肪族化合物等的含量明显高于野生型植物。这可能是由于安装HPS/PHI甲醛光合同化途径后使转基因植物同化代谢甲醛的能力更强,能将更多的甲醛固定为6-磷酸果糖,然后进入各种同化途径用于合成细胞内的各种组份所致,说明FTIR可作为一种鉴定有甲醛光合同化途径的转基因天竺葵与野生型天竺葵表型差异的新方法。
- 唐丽娟张亚楠宋中邦张韦黄庶识李昆志陈丽梅
- 关键词：红外光谱
- 植物丝氨酸羟甲基转移酶基因研究进展被引量：13
- 2008年
- 丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)是一个含有磷酸吡哆醛(PLP)的四聚体的蛋白质,在亚甲基四氢叶酸(CH2-THF)存在时催化丝氨酸和四氢叶酸生成甘氨酸和N5,N10-亚甲基四氢叶酸的可逆反应。SHMT在高等植物的一碳代谢和光呼吸中起着非常重要的作用,最近随着植物SHMT纯化技术的进步和重要模式植物基因组测序的完工,使很多植物SHMT基因被克隆出来,并对它们的结构和功能及表达调控进行研究。
- 马莉陈丽梅
- 关键词：丝氨酸羟甲基转移酶基因克隆光呼吸基因表达调控
- 耐受甲醛并能利用甲醇细菌的分离及其基因组文库的构建被引量：1
- 2008年
- 从污水样品筛选出能利用甲醇的菌株A和B，经16S rDNA测序分析，鉴定为芽孢杆菌（Bacillus sp．KM01）和肺炎克氏杆菌（Kleb-siella pneumoniae）。甲醛耐受能力的测试表明，这两种分离菌对甲醛具有较强的耐受能力，能在含8～15mmol／L甲醛的LB培养基上生长。Southern杂交分析结果说明，这两株菌的基因组中有兼性甲基营养菌每磷酸己酮糖合成酶（HPS）和6-磷酸果糖异构酶（PHI）基因的同源序列。以pUC118为载体构建了这两种分离菌的基因组文库，进一步的检测结果说明所构建的基因组文库质量符合要求。
- 陈丽梅殷飞李昆志魏云林林连兵
- 关键词：甲醇甲基营养菌RDNA基因组文库
- 在叶绿体中过量表达酵母菌的二羟基丙酮合成酶和二羟基丙酮激酶构建植物的光合作用甲醛同化途径
- ＜正＞甲醛（HCHO）是工业生产中应用最广泛的化学原材料。随着经济的发展和人民生活水平的提高,各种含有甲醛的原料制成的建筑装饰材料已走入千家万户,使甲醛成为一种无处不在的空气污染气体。
- 肖素勤潘正波宋中邦李昆志陈丽梅
- 文献传递
