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国家高技术研究发展计划(H40803)
作品数:
3
被引量:1
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相关作者:
李兰娟
喻成波
曹红翠
章益民
潘小平
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相关机构:
浙江大学医学院附属第一医院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家高技术研究发展计划
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2009
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永生化人肝细胞系的建立及其鉴定
被引量:1
2009年
目的建立永生化的人肝细胞系,为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢等提供细胞模型。方法应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代人肝细胞,以含有SV40大T抗原(SV40LT)的重组反转录病毒对原代人肝细胞进行永生化,并对永生化人肝细胞进行生物学特性鉴定。结果原代人肝细胞经含有SV40LT的重组反转录病毒感染3~4周后,获得2株永生化人肝细胞系,分别命名为HepLi2和HepLi3,永生化人肝细胞在相差显微镜下具有典型的肝细胞形态。Western印迹显示有SV40LT基因的蛋白表达;RT-PCR显示永生化人肝细胞有Alb、谷胱甘肽S转移酶(GSTp)、人凝血因子X(HBCF-X)和β-actinmRNA表达,有细胞色素(CY)P450亚型(CYP3A5、CYP2E1、CYP2C8—19、CYP3A4)mRNA的表达;在HepLi2和HepLi3永生化人肝细胞的培养上清液中可检测到ALT、乳酸脱氢酶(LDH)和Alb。结论新建立的永生化人肝细胞系具有正常人肝细胞的生物学特性以及完善的肝细胞CYP450酶功能,可进一步用于肝细胞药物代谢研究。
潘小平
杜维波
盛国平
虞晓鹏
喻成波
吕国良
曹红翠
李君
章益民
陈瑜
李兰娟
关键词:
细胞系
猴病毒40
抗原
肝细胞
细胞色素P450酶系统
代谢组学在肝脏疾病研究中的应用进展
2009年
代谢组学是通过考察生物体受到来自体内外的各种刺激或扰动时内源性小分子代谢物所发生的变化。来阐明生物体系的代谢途径的一种较新的组学技术。肝脏作为生物体最大、最复杂的代谢器官,参与了体内绝大部分的代谢过程。肝脏病变时,其相关的代谢网络必然会发生相应的变化。近几年,代谢组学技术在肝脏疾病研究中的应用日益增多,此文对代谢组学的概念、研究现状、研究方法及在肝脏疾病的基础和临床研究中的应用进行综述。
郭永征
李兰娟
关键词:
肝疾病
代谢组学
冻存保护剂在肝细胞冻存中的研究进展
2009年
生物人工肝和肝细胞移植技术需要建立肝细胞库以提供大量具有高度活性和良好功能的肝细胞。肝细胞冻存技术的研究成为实现这一目标的关键,而对冻存保护剂的研究则是肝细胞冻存技术取得突破的主要方向,此文就近些年来国内外肝细胞冻存领域中冻存保护剂的研究进展进行了综述。
张安业
李兰娟
关键词:
肝细胞
冻存保护剂
生物人工肝
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