广东省医学科学技术研究基金(A2010002)
- 作品数:3 被引量:18H指数:2
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- 相关机构:广东省医学科学院广东省人民医院南方医科大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金更多>>
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- 原发性肝癌术后早期复发密切相关microRNA的筛选及应用被引量:6
- 2012年
- 【目的】利用microRNA芯片技术分析比较两组不同复发倾向肝癌患者的miRNA表达谱,并在更大样品的基础上进行实验验证。【方法】收集10例原发性肝癌组织标本根据术后复发情况分2组:早期复发组与非早期复发组,运用microRNA芯片技术筛选出差异表达显著的microRNAs。结合文献报道,选择mir-144、mir-502-3p作为其他82例肝癌组织标本qReal-time PCR验证的检测指标。并利用生物信息学方法预测其靶基因。【结果】本研究共筛选获得7个差异表达的microRNAs。与非早期复发组相比,在早期复发组中有4个表达上调,3个表达下调。qReal-time PCR验证与microRNA芯片筛选的结果一致。生物信息学方法预测miR-144靶基因可能为Rb1,miR-502-3p靶基因可能为SET。【结论】microRNA芯片筛选的mir-144、mir-451、mir-486-5p、mir-602、mir-551b、mir-96、mir-502-3p与原发性肝癌术后早期复发密切相关。
- 邓治亮孙建区应亮侯宝华简志祥区金锐
- 关键词:原发性肝癌早期复发
- 靶向血管内皮生长因子基因的微小RNA真核表达载体的构建被引量:2
- 2012年
- 背景:有研究表明微小RNA及潜在靶基因在肝癌中起重要作用,但具体机制仍不清楚。目的:构建靶向血管内皮生长因子基因微小RNA真核表达载体,评估其转染人肝癌细胞株HepG2后血管内皮生长因子基因的干扰效果。方法:根据血管内皮生长因子序列设计合成4对微小RNA不同干扰片段,克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-微小RNA真核表达载体上,测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至HepG-2细胞株中。采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析血管内皮生长因子微小RNA干扰效果,蛋白印迹技术测定重组体对血管内皮生长因子基因蛋白表达情况。结果与结论:构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确,重组体能干扰肝癌细胞HepG2细胞血管内皮因子基因的表达,4组重组体基因的mRNA的表达水平和蛋白表达水平与阴性对照组相比明显降低(P<0.05),其中血管内皮生长因子微小RNA-3表达水平最低,抑制率87%。结果证实,实验成功构建血管内皮生长因子微小RNA表达载体,在体外能有效抑制HepG2细胞血管内皮生长因子基因表达。
- 熊建宁孙建区应亮简志祥
- 关键词:血管内皮生长因子微小RNA肝癌肝细胞
- 利用芯片技术筛选肝癌早期复发密切相关的microRNA被引量:10
- 2011年
- 目的:应用miRNA芯片技术筛选肝癌早期复发密切相关的miRNA,为进一步深入探讨miRNA在介导肝癌高侵袭性及术后早期复发中的作用打下基础。方法:从本院肝癌标本库中选取10例肝癌患者进入本研究,其中早期复发组(术后第1年出现肝内复发病灶)和非早期复发组(术后2年以上未出现肝癌复发或转移)各5例,抽提总RNA并分离出小分子RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小分子RNA与miRNA芯片进行杂交反应,分析差异表达的miRNA。结果:相对于非早期复发组,早期复发组肿瘤标本中有miR-602、miR-451、miR-144和miR-486-5p等4个miRNAs表达显著上调(上调倍数>2.0);有miR-551b、miR-96和miR-502-3p等3个miRNAs表达显著下调(下调倍数<0.5)。结论:筛选得到肝癌早期复发的miRNA差异表达谱,其可能与肝癌的早期复发发生发展有关。
- 黄冠群孙建简志祥区应亮侯宝华区鑫锐
- 关键词:肝癌MIRNA芯片MIRNAS