国家自然科学基金(30670091)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- GST-P58^(IPK)融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定被引量：1
- 2009年
- 以RT-PCR方法扩增目的基因P58IPK,将其克隆至原核表达质粒pGEX-6p-1。将所构建的pGEX-6p-1-P58IPK重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并诱导表达,利用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和柱进行纯化,所得产物进行SDS-PAGE、Western-blot及体外活性鉴定。结果显示,大肠杆菌细胞经诱导表达出相对分子质量约为85 000的蛋白,与GST-P58IPK融合蛋白大小相符;Western-blot显示该融合蛋白能够被抗GST的抗体特异性识别,磷酸化试验表明GST-P58IPK融合蛋白能够抑制PKR的体外磷酸化。结果表明,在大肠杆菌表达系统中表达了有活性的GST-P58IPK融合蛋白,为PKR信号通路的研究奠定了基础。
- 丛彦龙丁壮关振宏张茂林段铭
- 关键词：融合蛋白纯化
- 猪结合珠蛋白的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备
- 本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白（Haptoglobin,Hp）制备特异性单克隆抗体。方法是以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-KG和pET-32a上,转化...
- 喻翠翠孟宪荣栗绍文梅仕林张望周蕾蕾陈辉毕丁仁
- 关键词：结合珠蛋白基因克隆原核表达单克隆抗体
- 文献传递
- GST-P58IPK融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定
- 目的:获得谷胱甘肽S转移酶（GST）-P58IPK融合蛋白,以用于阐明流感病毒相关因子P58IPK参与的信号通路调控机制。方法:以RT-PCR方法扩增目的基因P58IPK,将其克隆至原核表达质粒pGEX-6p-1。将所构...
- 丛彦龙丁壮关振宏张茂林段铭
- 关键词：融合蛋白表达纯化
- 文献传递
