山东省自然科学基金(ZR2011CQ018) 作品数:4 被引量:3 H指数:1 相关作者: 袁佐清 宫晓宁 白芸 赵博生 更多>> 相关机构: 山东理工大学 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 国家自然科学基金 山东省高等学校科技计划项目 更多>> 相关领域: 环境科学与工程 生物学 更多>>
单细胞凝胶电泳检测PFOS和PFOA对三角涡虫核DNA的损伤作用 被引量:1 2014年 全氟辛烷磺酸盐(PFOS)和全氟辛烷磺酸(PFOA)被使用50多年,污染已十分广泛,但它们的毒性机制仍不明确,尤其是基因毒性方面。本实验以三角涡虫为研究对象,采用单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE,彗星实验)技术,探究PFOS和PFOA对细胞核DNA的损伤作用。结果显示PFOA能破坏核DNA,使其断裂,但PFOS不能破坏核DNA。另外,我们进一步提取纯化的大肠杆菌DNA与PFOS和PFOA共同孵育,以验证我们的实验结果,结果显示体外DNA实验与单细胞凝胶电泳检验结果一致。 袁佐清 宫晓宁关键词:PFOS PFOA 单细胞凝胶电泳 PFOS对东亚三角涡虫HSP70蛋白及基因表达的影响 被引量:2 2014年 全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane sulfonate,PFOS)是一种持续的有机污染物,是全氟化合物(Perfluorinated chemicals,PFCs)在环境中的代表性物质。以低等三胚层动物涡虫作为试验材料,使用Western blot及RT-PCR技术探究PFOS对涡虫HSP70蛋白及基因表达的影响。结果表明,PFOS短时间处理能诱导涡虫hsp70 mRNA表达量升高,涡虫再生10 d mRNA表达受到抑制,HSP70蛋白表达量在涡虫再生4 d和7 d时随PFOS浓度显著上升,其它组变化不明显,PFOS对mRNA和蛋白表达量趋势影响不一致,可能少量PFOS能抑制HSP70蛋白翻译,药物在涡虫体内积累量增加,蛋白高表达抵御毒性伤害。 宫晓宁 袁佐清 白芸关键词:PFOS 三角涡虫 HSP70 BLOT 东亚三角涡虫DjStag基因干扰载体的构建及干扰效果鉴定 2012年 构建DjStag基因的RNA干扰表达载体,诱导表达产生dsRNA后喂食涡虫,观察DjStag表达变化及对涡虫再生的影响。本文以含有东亚三角涡虫DjStag基因的pcDNA3-DjStag重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒L4440-DjStag后转化入大肠杆菌HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后喂食涡虫。显微观察涡虫再生过程中的表型变化,Real-time PCR检测干扰后涡虫DjStag基因表达的变化。结果表明,成功构建了DjStag基因的RNA干扰表达载体;DjStag基因RNA干扰后,涡虫不能正常再生,再生片段显示出明显的再生缺陷;涡虫体内DjStag基因的表达受到抑制,DjStag mRNA的表达水平显著下降。 袁佐清 赵博生关键词:涡虫 RNA干扰 PFOS对再生东亚三角涡虫抗氧化酶活性的影响 2015年 为了探究全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane sulfonate,PFOS)对再生涡虫抗氧化酶活性的影响,以再生中的涡虫作为实验材料,采用酶活性的测定的方法来探究PFOS对再生中东亚三角涡虫中抗氧化酶活性的影响。结果表明,PFOS刺激涡虫产生应激反应。在再生早期,PFOS胁迫会造成涡虫的氧化损伤和脂质的过氧化,并表现出随着PFOS浓度的升高,涡虫氧化损伤程度加剧的趋势;再生5 d时,机体产生抗氧化的反应来消除体内的氧自由基;在再生的后期,由于涡虫对药物的耐受作用,涡虫的抗氧化反应不显著。 苗自利 袁佐清关键词:PFOS 东亚三角涡虫 抗氧化酶活性