您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30670052)

作品数:26 被引量:104H指数:6
相关作者:夏立秋丁学知孙运军单世平张友明更多>>
相关机构:湖南师范大学湖南城市学院华中农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:生物学农业科学医药卫生理学更多>>

文献类型

  • 26篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 13篇生物学
  • 12篇农业科学
  • 2篇医药卫生
  • 2篇理学

主题

  • 8篇杀虫
  • 7篇芽孢
  • 7篇芽孢杆菌
  • 7篇苏云金芽孢
  • 7篇苏云金芽孢杆...
  • 5篇芽胞
  • 5篇芽胞杆菌
  • 5篇苏云金杆菌
  • 5篇苏云金芽胞杆...
  • 4篇晶体蛋白
  • 4篇基因
  • 4篇BACILL...
  • 3篇点突变
  • 3篇定点突变
  • 3篇毒素
  • 3篇菌株
  • 3篇CRY1AC
  • 2篇蛋白
  • 2篇电泳
  • 2篇色氨酸

机构

  • 23篇湖南师范大学
  • 2篇华中农业大学
  • 2篇湖南城市学院
  • 1篇长沙理工大学
  • 1篇湖南农业大学
  • 1篇中南林业科技...

作者

  • 22篇夏立秋
  • 20篇丁学知
  • 7篇胡胜标
  • 7篇孙运军
  • 6篇张友明
  • 6篇单世平
  • 5篇王发祥
  • 4篇王海龙
  • 4篇莫湘涛
  • 4篇李文萍
  • 4篇付祖姣
  • 4篇赵新民
  • 4篇曾智
  • 3篇罗玉双
  • 2篇刘石泉
  • 2篇尹佳
  • 2篇喻子牛
  • 2篇黄璠
  • 2篇刘飞
  • 2篇袁灿

传媒

  • 6篇湖南师范大学...
  • 4篇微生物学报
  • 2篇生命科学研究
  • 2篇生物技术通报
  • 2篇微生物学通报
  • 2篇Biomed...
  • 1篇高等学校化学...
  • 1篇昆虫知识
  • 1篇食品科学
  • 1篇化学学报
  • 1篇农业现代化研...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇Agricu...
  • 1篇Scienc...
  • 1篇中国植物保护...

年份

  • 1篇2015
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 6篇2009
  • 11篇2008
  • 6篇2007
26 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
喂食Cry1Ac毒素对棉铃虫中肠类胰蛋白酶的影响被引量:1
2009年
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在芽胞形成过程中产生的原毒素被敏感昆虫吞食进入消化道后,在中肠蛋白酶的作用下经历一系列酶的剪切活化过程,形成具有杀虫活性的毒性肽.类胰蛋白酶因其在昆虫中肠内蛋白质水解和Bt毒素活化中起着重要作用而受到广泛研究.本研究提取了棉铃虫4龄幼虫的中肠BBMV蛋白,利用SDS-PAGE分析鉴定到喂食Cry1Ac毒素24h后,棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶的表达量呈明显下降趋势.该下降趋势很有可能是作为一种昆虫对Bt毒素作用的早期反应,通过影响Bt毒素在中肠中的酶解活化过程,从而为昆虫提供即时保护.
袁灿夏立秋丁学知田野尹佳
关键词:苏云金芽胞杆菌棉铃虫CRY1AC类胰蛋白酶
Polyhedrosis Virus in Bacillus thuringiensis
2011年
This study was conducted to build a recombinant strain with highly insecticidal activity and a wide host range by using the crylAc and p74 gene. Firstly, the p74 gene was amplified from the genosome ofAutographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus. The crylAc gene and the terminator gene of crylAc, named crylAct, were amplified from the plasmid of Bt 4.0718 strain. Three T vectors, named pTp74, pT1Ac, and pT1Act which held the aimed gene p74, cry1Ac, and crylAct, respectively, and two middle vectors, named pTp74Act and pTIAcp74 which held the aimed fusion gene p74-crylAct and cry lAc-p74, respectively, were built by using pMDI 8-T. Then pTiAcp74 and the shuttle plasmid were digested and linked and an expressing-vector pH1Acp74 was built. Finally, pH1Acp74 was transformed into the acrystalliferous strain XBU001 and the aimed recombinant strain XBU-H1Acp74 was obtained. The expression of Bt transformant XBU-H1Acp74 was analyzed by SDS-PAGE which showed XBU-H1Acp74 could produce 130 kDa CrylAc protein and 50 kDa P74 protein. The insecticidal activity of transformant against Spodoptera exigua was evaluated compared with the contrast strains HTX-42 (only crylAc gene was transformed into XBU001) after autolysis. The LCs0 of HTX-42 was higher than that of the XBU-H IAcp74's, which implied that P74 could increase the efficacy and range of Bt Cry toxins in insect control. The fusion gene of crylAc and p74 were constructed successfully which will be served as the foundation lbr constructing the fusion genes of Bt cry gene and other foreign genes.
YE Xiang-liXIA Li-qiu
新型蛋白酶抑制剂基因hwtx-11在大肠杆菌中的克隆表达及杀虫功能研究被引量:2
2007年
将化学合成的蜘蛛毒素蛋白酶抑制剂基因hwtx-11克隆至载体pGEX4T-1上,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.重组菌株在IPTG诱导下,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的GST-HWTX-11融合蛋白的相对分子量约为33 kD.对重组菌株诱导表达后的产物进行生物活性测定,GST-HWTX-11融合蛋白对甜菜夜蛾(Spodoptera exiguaHubner)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)在3d时的LC50分别为86.6μg/mL、119.4μg/mL;其与Cry1Ac对甜菜夜蛾和棉铃虫幼虫毒力也有明显的协同作用.
夏立秋曾智贺小红付祖姣单世平丁学知孙运军李文萍王海龙罗玉双
关键词:WESTERNBLOT生物活性测定
杀蚊苏云金芽孢杆菌及其晶体蛋白研究进展被引量:5
2007年
自从发现苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis(Bt)具有杀蚊活性以来,目前已发现多种Bt亚种或血清型对蚊虫具有杀虫活性,同时也发现了一些新的杀蚊晶体蛋白。在对杀蚊晶体蛋白的分子结构进行研究的基础上,对其的作用机理有了一定的了解。近年来利用DNA重组技术显著提高杀蚊晶体蛋白的合成和将不同菌种的杀蚊晶体蛋白进行联合表达,为有效控制蚊虫危害展示广阔前景。
赵新民夏立秋王发祥丁学知
关键词:苏云金芽孢杆菌蚊虫晶体蛋白
Bt毒素蛋白与昆虫受体结合的研究方法比较
2009年
Bt毒素蛋白与昆虫受体的结合是决定其杀虫活性的一个关键步骤,研究这种结合关系的方法也不断丰富和发展。综述了这些研究方法的操作和特点,并简单比较了它们的优缺点和适用范围,为从事相关研究时选择合适的方法提供参考。
王青云王发祥夏立秋
关键词:毒素蛋白BBMV受体研究方法
W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性被引量:2
2008年
W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个'螺旋桨状'的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高;经原子力显微镜观察,发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6μm,且晶体表面不及野生型光滑;此外,W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似,但经过紫外光照射9 h后,其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上.W544F突变较好地解决了Cry1Ac毒素蛋白田间应用不持久的问题,具有重要的应用价值.
王发祥夏立秋丁学知赵新民单世平莫湘涛张友明喻子牛
关键词:定点突变色氨酸苯丙氨酸稳定性
利用钙离子通道阻断剂基因构建高效广谱杀虫工程菌
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)能产生具有由特异杀虫蛋白组成的伴胞晶体,该种环境友好杀虫剂占据了生物杀虫剂90%的市场。但Bt在应用中存在杀虫毒力较化学杀虫剂弱、杀虫谱较窄和易导致...
李文萍张祥丽夏立秋丁学知孙运军胡胜标罗玉双吕媛黄璠唐滢
关键词:钙离子基因构建
定点突变技术研究苏云金杆菌Cry1类晶体蛋白结构与功能的进展被引量:1
2007年
近年来利用定点突变技术研究苏云金杆菌(Bacillus thuringiesis,Bt)杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal proteins,ICP)作用机制已取得良好进展.杀虫晶体蛋白不同结构域上氨基酸残基的突变将影响其稳定性,与受体的结合,不可逆的昆虫中肠膜插入及离子通道活性的强弱等.突变研究表明,结构域Ⅰ参与不可逆结合及插入昆虫中肠膜过程;结构域Ⅱ参与受体结合,包括初始结合与不可逆结合;结构域Ⅲ在杀虫特异性和维持三维结构的稳定性方面起重要作用,同时,可能参与离子通道的形成,受体结合和插入昆虫中肠膜过程.利用各种定点突变技术对各位点进行突变可以研究单一位点的功能,到目前为止,已有很多关于这方面的研究,并且筛选到了毒力提高的工程菌株.
张春艳胡胜标单世平夏立秋
关键词:苏云金杆菌杀虫晶体蛋白定点突变
Homology Modeling of Mosquitocidal Cry30Ca2 of Bacillus thuringiensis and Its Molecular Docking with N-acetylgalactosamine被引量:2
2012年
Abstract Objective To investigate the theoretical model of the three-dimensional structure of mosquitocida Cry3OCa2 and its molecular docking with N-acetylgalactosamine. Methods The theoretical model of Cry30Ca2 was the Cry4Ba. Docking studies were performed N-acetylgalactosamine on the putative receptor. predicted by homology modeling on the structure of to investigate the interaction of Cry3OCa2 with Results Cry3OCa2 toxin is a rather compact molecule composed of three distinct domains and has approximate overall dimensions of 95 by 75 by 60A. Domain I is a helix bundle, Domain Ⅱ consists of three antiparallel β-sheets, Domain Ⅲ is composed of two β-sheets that adopt a 13-sandwich fold. Residue 32111e in loop1, residues 342Gin 343Thr and 345Gin in loop2, residue 393Tyr in loop3 of Cry3OCa2 are responsible for the interactions with GalNAc via 7 hydrogen bonds, 6 of them were related to the oxygen atoms of hydroxyls of the ligand, and one to the nitrogen of the ligand. Conclusion The 3D structure of Cry3OCa2 resembles the previously reported Cry toxin structures but shows still some distinctions. Several residues in the loops of the apex of domain Ⅱ are responsible for the interactions with N-acetylgalactosamine.
ZHAO Xin MinZHOU Pan DengXIA Li Qui
关键词:MOSQUITOES
苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白提取方法比较研究被引量:3
2007年
采用液体双相分层法和等电点沉淀法提取苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白.原子力显微镜观测,发现液体双相分层提取的晶体蛋白具有完整典型的晶体结构;等电点法提取的得率高,不能检测到完整的晶体结构.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,等电点法提取的蛋白质含量是液体双相法提取的蛋白含量的1~2倍.将2种方法提取的晶体蛋白对初孵棉铃虫幼虫生物测定均表现杀虫生物活性,经统计分析,液体双相法提取的蛋白质生测毒力比等电点法的高1.5~3倍.
罗朝辉夏立秋丁学知王海龙曾智
关键词:苏云金芽孢杆菌等电点原子力显微镜聚丙烯酰胺凝胶电泳
共3页<123>
聚类工具0