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国家自然科学基金(30840069)

作品数:5 被引量:7H指数:2
相关作者:林旭林万松郭如意苏智军李志军更多>>
相关机构:福建医科大学福州市第一医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金福建省高等学校科技创新团队培育计划泉州市科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 5篇乙型
  • 5篇乙型肝炎
  • 5篇乙型肝炎病毒
  • 5篇肝炎
  • 5篇肝炎病毒
  • 5篇病毒
  • 3篇基因
  • 3篇干扰素
  • 2篇蛋白
  • 2篇全基因
  • 2篇全基因组
  • 2篇全基因组分析
  • 2篇基因组
  • 2篇基因组分析
  • 1篇阳性
  • 1篇乙型肝炎患者
  • 1篇异性蛋白
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇特异性蛋白

机构

  • 5篇福建医科大学
  • 1篇福州市第一医...

作者

  • 4篇林旭
  • 3篇林万松
  • 2篇林成祖
  • 2篇黄连真
  • 2篇李志军
  • 2篇王林
  • 2篇林建银
  • 2篇苏智军
  • 2篇郭如意
  • 1篇陈婉南
  • 1篇梁菲菲
  • 1篇陈金烟
  • 1篇焦伯延
  • 1篇郭丹华

传媒

  • 2篇中国病原生物...
  • 1篇中华传染病杂...
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇微生物与感染

年份

  • 3篇2011
  • 2篇2009
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
全基因组分析乙型肝炎病毒缺失变异及其与干扰素疗效的关系
2011年
干扰素是治疗慢性乙型肝炎(CHB)的主要药物之一,但其有效率仅为20%~40%.研究显示,HBV一些特定位点的变异具有抵抗干扰素的作用,这些位点的变异虽然可以抵抗干扰素的作用,但不足以说明干扰素抵抗的机制.目前大多数研究是以HBV的部分片段或特定位点作为研究对象,并不能反映患者体内病毒的真实状态,具有一定的局限性.为进一步了解HBV的生物学特性对干扰素疗效的影响,本研究采用全基因克隆的方法从CHB患者血清中扩增HBV全基因组DNA,分离检测HBV基因组缺失突变体,分析HBV变异与干扰素疗效之间的关系.
苏智军李志军林成祖郭如意林旭
关键词:基因组DNA乙型肝炎病毒抗干扰素HBV变异
23株HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者病毒的全基因组分析被引量:4
2011年
目的研究HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBV变异特点。方法 PCR扩增并克隆HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清中HBV全基因组DNA,测序并进行基因结构分析。结果获得23株HBV全基因组DNA,它们均属于C或B基因型。与中国HBV B、C基因型参照序列相比,HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者来源的HBV在表面抗原、P蛋白、X蛋白的反式激活区及增强子II/核心启动子区发生了一些有意义的共有变异。结论 HBV变异可能与HBeAg阳性慢性乙型肝炎的发生、发展有关。
李志军苏智军林成祖郭如意林万松
关键词:乙型肝炎病毒基因变异全基因组
458nt~1308nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白对Huh7细胞基因表达的影响被引量:3
2009年
目的研究458nt^1 308nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白TSR′r′对Huh7细胞基因表达的影响,探讨其可能的致病机制。方法PCR扩增TSR′r′编码序列并克隆入pcDNA3.1/HisC。以FuGENE6将重组表达载体及相应空载体分别瞬时转染Huh7细胞,Trizol抽提细胞总蛋白与总RNA;以融合表达多肽表位抗体为一抗,Western blot检测目的蛋白的表达;用Affymetrix Genechip U133 plus 2.0人类基因表达谱芯片检测Huh7肝细胞基因转录的变化,并以半定量RT-PCR进一步验证。结果成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1/HisC-TSR′r′,转染48 h后在Huh7细胞中表达TSR′r′蛋白。TSR′r′导致Huh7细胞载脂蛋白H等27个基因转录上调,其中包括5种代谢相关基因,7种免疫相关基因,7种胶原及胞外基质基因,5种干扰素诱导蛋白基因;TSR′r′还导致Huh7细胞核受体共激活物1基因在内的7种基因转录下降。结论458nt^1 308nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白可能多方面影响肝细胞功能,具有重要的致病意义。
黄连真王林陈金烟林万松林建银林旭
关键词:RNA剪接
乙型肝炎病毒DNA聚合酶TP257抗α-干扰素机制初步探讨
2011年
目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293A细胞包装重组腺病毒。用重组腺病毒感染Huh7细胞并以IFN-α诱导,收获细胞蛋白,Western blot验证TP257蛋白在细胞中的表达。细胞蛋白进行免疫沉淀,SDS-PAGE分离后通过质谱鉴定差异蛋白。结果构建的重组腺病毒AD-TP257能有效感染Huh7细胞并大量表达TP257蛋白。Huh7细胞感染AD-TP257后以IFN-α处理,并通过免疫沉淀筛选到4种差异蛋白,其中3种经肽质量指纹图谱鉴定分别为热休克蛋白60、组蛋白HIST1H2BC和肌凝蛋白调节轻链12A。结论 TP257抗IFN-α效应可能与它和特定肝细胞蛋白结合并相互作用有关。
梁菲菲黄连真陈婉南林旭
关键词:乙型肝炎病毒DNA聚合酶Α-干扰素免疫沉淀
乙型肝炎病毒3022~1787核苷酸缺失突变体编码蛋白具有抗α干扰素作用
2009年
为证实乙型肝炎病毒(HBV)3022~1787核苷酸缺失突变体编码蛋白TS′X′(源于DNA聚合酶读码框架,T为TP区,S′为部分缺失的spacer区,X′为截短的X蛋白)具有抗α干扰素(IFN-α)作用并确定其功能区域,用聚合酶链反应(PCR)扩增获得TS′X′全长及片段TS′(含TP区及部分缺失的spacer区),并克隆于pcDNA3.1/HisC载体。重组质粒以FuGENE6转染Huh7肝细胞,48h后裂解细胞,以蛋白质印迹法(Western blot)证实目的蛋白可在Huh7肝细胞中表达。重组质粒及空载体pcDNA3.1/HisC分别与IFN-α反应报告质粒p6-16CAT按分子数5∶1、10∶1、15∶1、30∶1共转染Huh7肝细胞,转染后48h给予终浓度为100IU/ml的IFN-α2a刺激,作用24h后裂解细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胞内氯霉素乙酰基转移酶(CAT)含量。结果显示,与空白载体相比,随着TS′X′及TS′重组表达质粒转染量的递增,Huh7胞内CAT值逐渐降低(n=6,P<0.05),但TS′X′与TS′之间无显著差异(n=6,P>0.05)。本研究证实,HBV3022~1787核苷酸缺失突变体编码的TS′X′蛋白可抑制Huh7细胞对IFN-α的反应性,其活性与其N端TP及部分缺失的spacer区有关。
王林郭丹华焦伯延林万松林建银林旭
关键词:乙型肝炎病毒缺失突变Α干扰素
共1页<1>
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