山东省科技攻关计划(2010GNC10918)
- 作品数：12 被引量：166H指数：9
- 相关作者：李保华王彩霞李桂舫董向丽张清明更多>>
- 相关机构：青岛农业大学云南农业大学青岛中达农业科技有限公司更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农杆菌介导的苹果树腐烂病菌遗传转化体系的建立
- 苹果树腐烂病(Valsa ceratosperma)可造成果树主干及整树死亡，甚至毁园。自1916年腐烂病在辽宁省南部地区发现以来，该病在我国已有过几次大流行，造成了严重的经济损失。由于对于苹果树腐烂病菌的侵染、致病过程...
- 王海艳李保华李桂舫董向丽王彩霞
- 关键词：农杆菌苹果腐烂病
- 温度对梨树腐烂病菌生长、病斑扩展及产毒素水平的影响被引量：3
- 2015年
- 为探明温度对梨树腐烂病菌生长、病斑扩展及产毒素水平的影响,采用常规生物学方法和高效液相色谱法,测定了该病菌强致病力菌株LXS240101在不同温度下的菌丝生长、病斑扩展及产毒素水平。结果表明：菌株LXS240101最适宜的生长温度为25~30℃;在5~35℃范围内,梨树离体枝条接种梨树腐烂病菌后均能发病并导致病斑扩展,25℃时病斑扩展速度最快,面积达4.45cm2,5℃和35℃时病斑扩展速度缓慢,面积不足0.3 cm2。该菌株在梨树树皮培养基中最适宜的产毒素温度为20℃,10~25℃条件下可产生5种毒素,而在其它温度下仅产生3~4种;接种该菌株的梨树离体枝条5℃条件下未检测到间苯三酚和对羟基苯甲酸,且毒素总量最低,其余温度下均可检测到5种毒素,最适宜的产毒素温度为10℃,毒素总量可达224.14μg/g干组织。
- 史祥鹏徐柳刘涛李保华梁文星王彩霞
- 关键词：温度菌丝生长病斑扩展毒素
- 细胞壁降解酶在苹果树腐烂病菌致病过程中的作用
- ＜正＞苹果树腐烂病（Valsa ceratosperma）在我国主要苹果产区均有发生,一些地区发病率高达85%以上,成为制约我国苹果产业发展的主要限制因子,造成了严重的经济损失。为了全面深入了解该病害的致病因子及其致病机...
- 陈晓林李保华李桂舫王彩霞
- 文献传递
- 苹果树腐烂病拮抗细菌菌株BJ1的鉴定及其抑菌作用被引量：46
- 2012年
- 为开发对苹果树腐烂病有效的生防措施,对从山东栖霞苹果果园根际土壤中分离的63株细菌进行了筛选,获得有显著拮抗作用的菌株BJ1。采用玻片法和对峙培养法测定BJ1对苹果树腐烂病菌孢子萌发和菌丝生长的抑制作用及其抑菌谱,根据菌株BJ1的形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列对其进行鉴定,并用离体枝条烫伤接种法对腐烂病的防效进行测定。菌株BJ1对腐烂病菌的抑制率为78.38%,其发酵滤液的抑菌率达到70.54%;BJ1可显著降低腐烂病菌分生孢子的萌发率,致使菌丝畸形、分支增多及细胞质外渗;该菌株对常见的8株果树病原真菌具有显著的拮抗作用。经鉴定,菌株BJ1属于微嗜酸寡氧单胞菌Stenotrophomonas acidaminiphila。BJ1不同稀释倍数的发酵滤液均对苹果树腐烂病有明显的抑制作用,其稀释50倍发酵滤液的防效仍可达81.06%,表明该菌株具有良好的生防潜力。
- 王彩霞张清明李桂舫董向丽李保华
- 关键词：苹果树腐烂病菌拮抗细菌
- 内生放线菌A-1对苹果果实轮纹病的防效及防御性酶活性的影响被引量：23
- 2014年
- 为揭示内生放线菌A-1对苹果果实轮纹病的防效及防病机制,采用平板法和喷雾处理刺伤接种法,测定了其对苹果轮纹病菌的抑制作用及果实内防御性酶活性的影响。结果表明:菌株A-1能显著抑制轮纹病菌菌丝生长,104CFU/mL菌悬液的抑制率达90%以上;喷施107CFU/mL A-1菌悬液后,间隔12h以上接种的各处理,3 d和7 d时防效分别为91.79%~95.67%和77.41%~94.00%,均与对照农药苯醚甲环唑相当。喷施107CFU/mL A-1菌悬液后接种或不接种轮纹病菌的处理,果实内过氧化物酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性显著升高,且均高于只接种轮纹病菌的处理;喷施A-1菌悬液后接种病原菌的处理酶活性增加最显著,其峰值是对照的2.30~11.00倍。表明内生放线菌A-1可通过产生拮抗物质、提高寄主防御性酶活性等机制实现对苹果轮纹病的有效防治。
- 雍道敬王彩霞李桂舫李保华
- 关键词：苹果轮纹病菌防效生防机制
- 农杆菌介导苹果炭疽病菌的遗传转化及转化子鉴定被引量：9
- 2013年
- 【目的】优化农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化苹果炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)的技术体系,并对转化子进行筛选鉴定,比较其生物学特性和致病性差异。【方法】以苹果炭疽病菌LXS010101分生孢子为转化受体,利用携带重组双元载体的农杆菌进行转化;对获得的转化子进行遗传稳定性测定、PCR检测及Southern blot分析;选取一定数量的转化子,比较其菌落形态、生长速率及分生孢子发育等主要生物学性状及致病性的差异。【结果】苹果炭疽病菌的最优转化体系为:病菌分生孢子悬浮液浓度1×105个/mL,共培养温度和时间分别为22℃和24 h,共培养基中添加200μmol.mL-1乙酰丁香酮,其转化效率达到1×105个孢子可获得439个转化子。随机选取30个转化子进行鉴定,发现T-DNA已整合进炭疽病菌基因组中,在所检测的转化子中都是以单拷贝的形式整合,且能够稳定遗传。与野生型菌株相比,转化子的菌落形态没有发生明显变化,但23.33%的菌株生长速率显著减低;转化子ATJ-3和ATJ-15不能产生分生孢子,在28个产孢菌株中,分生孢子萌发率显著减低的菌株占39.29%,附着胞形成比例显著减低和形态异常的菌株占25.00%。致病性测定结果显示,11个转化子的致病力显著降低,其中菌株ATJ-19完全丧失致病能力。【结论】优化的苹果炭疽病菌遗传转化技术体系,可用于炭疽病菌致病相关基因的克隆及致病分子机理的研究。
- 王海艳李保华张清明李桂舫董向丽王彩霞
- 关键词：苹果炭疽病菌
- 苹果树腐烂病菌木聚糖酶基因Xylanase Ⅰ的克隆及原核表达
- 由Valsa mali var.mali引起的苹果树腐烂病是苹果生产上的三大病害之一,该病可造成果树主干及整树死亡,甚至毁园。目前,对于苹果树腐烂病菌的致病机理尚不明确,导致该病至今无法得到有效控制。前期研究表明,木聚糖...
- 史翔鹏李保华李桂舫董向丽王彩霞
- 关键词：苹果树腐烂病菌木聚糖酶基因原核表达抗体制备
- 文献传递
- 苹果树腐烂病菌不同致病力菌株对苹果的诱导效应被引量：8
- 2014年
- 以‘富士’苹果叶片为材料, 采用刺伤接种法, 比较了苹果树腐烂病菌强致病菌LXS080601和弱致病菌LXS081501侵染对寄主体内丙二醛（MDA）含量、渗透调节物质及防御酶活性的影响。结果表明, 两菌株侵染后, 叶片MDA、蛋白质和可溶性糖含量均增加, 接种LXS080601叶片MDA含量快速上升, 最大增幅为141.15%, 而接种LXS081501叶片的MDA含量变化较小, 增幅仅为1.16%-16.24%, 但后者可溶性糖和蛋白质含量增幅分别高达158.12%和113.57%, 显著高于接种LXS080601的处理。同时, 两菌株均能诱导叶片内4种防御酶活性的升高, 但LXS081501诱导的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）活性均显著高于LXS080601, 说明不同致病力腐烂病菌对寄主防御酶活性的影响存在显著差异。
- 雍道敬李保华王彩霞
- 关键词：苹果树腐烂病菌丙二醛渗透调节物质防御酶
- 内生放线菌A-1对苹果果实轮纹病防效及其生防机制研究
- 苹果果实轮纹病是苹果生产中的重要病害之一,果实幼果期轮纹病菌即可侵入,近成熟期大量发病导致果实腐烂,苹果储藏期还可继续发病,严重限制了苹果产业的健康持续发展,造成了巨大的经济损失。目前,施用化学杀菌剂仍然是控制该病害的主...
- 雍道敬史祥鹏李保华王彩霞
- 文献传递
- 苹果树腐烂病菌致病因子及其与菌株致病性的关系被引量：13
- 2014年
- 以苹果树腐烂病菌强致病菌LXS080601和弱致病菌LXS081501为试材,采用二硝基水杨酸（DNS）法和高效液相色谱法（HPLC）测定酶活性和毒素的差异,以期探寻苹果树腐烂病菌不同致病力菌株产生酶和毒素的差异及其与菌株致病性的关系。结果表明：LXS080601在树皮培养基和离体枝条中均产生5种毒素,而LXS081501接种后仅检测到3～4种毒素,且除培养基中产生的间苯三酚外,其余毒素量均显著低于LXS080601;2株菌株均可分泌5种细胞壁降解酶,但酶活性存在显著差异,LXS080601产生的酶活性显著高于LXS081501,且酶活性达到高峰时间较短;说明腐烂病菌产生的酶活性、毒素种类和数量与菌株的致病性强弱呈正相关。
- 李超李保华李桂舫王彩霞
- 关键词：苹果树腐烂病菌毒素细胞壁降解酶
