湖北省自然科学基金(2009CDB292)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 缺氧应激对HepG2细胞中甲硫氨酸腺苷转移酶2A基因表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察体外缺氧条件下肝癌细胞株HepG2中缺氧诱导因子-α（HIF-α）和甲硫氨酸腺苷转移酶2A（MAT2A）的表达，探讨HIF-α在低氧条件下对MAT2A基因表达的调控作用。方法构建人MAT2A启动子真核表达载体质粒，CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境，检测缺氧条件下MAT2A启动子活性，HIF-α和MAT2A在HepG细胞中的共定位、mRNA和蛋白水平的表达。以及小干扰RNA（siRNA）沉默HIF-α后对MAT2A基因表达的影响。结果缺氧24h能使HepG2细胞活性增加到高峰（41．26±2．34），同时MAT2A基因的表达也较常氧时显著升高（P〈0．01），siRNA转染HepG2细胞后能显著下调HIF-α蛋白表达（抑制率90％），并导致MAT2A基因的表达也受到明显抑制。结论缺氧促使HepG2细胞中HIF-α在蛋白水平表达升高，缺氧时HIF-α能上调MAT2A基因的表达水平。
- 刘立刘志苏刘权焰王栋锋张进
- 关键词：肝细胞缺氧诱导因子-ΑSIRNA
- 细胞内稳态S-腺苷甲硫氨酸浓度对人肝细胞生长因子促肝癌细胞增殖效应中的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 观察细胞内稳态S-腺苷甲硫氨酸（SAM）水平的变化对人肝细胞生长因子（HGF）促肝癌细胞增殖效应的影响.方法 采用pGCSIL-GFP-MAT2AsiRNA重组质粒转染HepG2细胞升高细胞内SAM浓度,SAM竞争抑制剂C3-Ado降低SAM浓度,用RP-HPLC验证不同SAM浓度的细胞体系,并用噻唑蓝（MTT）比色法、流式细胞术（FCM）检测各细胞体系中的HGF促增殖效应.结果 HGF处理的HepG2细胞转染重组质粒后细胞内SAM浓度升高至（1.35±0.06）nmol/mg蛋白质,细胞增殖活性降低,G0/G1期细胞增加23.42%,G2/M期细胞减少40.61%,细胞凋亡率34.58%;当加入C3-Ado,细胞内SAM浓度下降至（0.37±0.03）nmol/mg蛋白质,细胞增殖活性升高,G0/G1期细胞减少7.73%,G2/M期细胞增加18.18%,细胞凋亡率5.17%.结论 HGF在肝癌细胞中发挥促有丝分裂效应的必要条件是肝癌细胞内稳态SAM浓度处于较低水平.
- 王刚何跃明刘权焰刘志苏
- 关键词：RNA干扰S-腺苷甲硫氨酸
