浙江省自然科学基金(SZJ02003)
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
- 相关作者：陶志华陈晓东陈占国李澄棣温秀姝更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 前列腺癌患者外周血中DD3mRNA的检测及临床意义被引量：3
- 2005年
- 目的应用巢氏RT-PCR方法检测外周血中前列腺癌特异性基因mRNA(DD3mRNA),并探讨其临床意义。方法取44 例不同分期前列腺癌和30例良性前列腺增生患者以及18侧健康男性志愿者(对照组)外周静脉血各5ml,经密度梯度离心分离单个核细胞,用经典总RNA提取试剂提取总RNA,以Oligo(dT)18为引物将总RNA逆转录为cDNA,用巢氏RT-PCR检测 DD3mRNA,以出现263bp的条带为DD3mRNA阳性,并以LNCaP细胞株为阳性对照。结果 30例前列腺增生患者和18例健康男性志愿者其外周血中DD3mRNA均为阴性(0%),而11例前列腺癌未治疗者外周血中DD3mRNA均阳性(100%),33例行内分泌治疗者有10例DD3mRNA阳性(30.3%),未治疗组和治疗组间有显著性差异(X2=16.06,P<0.01)。结论外周血中DD3mRNA为前列腺癌特异性肿瘤标记物,可辅助前列腺癌诊断及作为前列腺癌内分泌治疗监测的良好指标。
- 陶志华陈占国陈晓东李澄棣李湘斌杨建荣温秀姝林晓梅朱燕英
- 关键词：前列腺肿瘤逆转录聚合酶链反应
- 前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达的意义被引量：5
- 2005年
- 目的探讨前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达及临床意义。方法采集44例中晚期前列腺癌(PCa)患者、20例良性前列腺增生(BPH)患者及18例健康男子外周血,分离单个核细胞,提取总RNA。RT-PCR琼脂糖电泳法检测DD3 mRNA,以β-actin为内参照,以出现311 bp和184 bp片段为DD3 mRNA阳性,仅出现184 bp片段为DD3 mRNA阴性。结果20例BPH患者和18例健康青年男子外周血标本中均无DD3 mRNA表达,44例PCa血标本中DD3mRNA表达13例(29.5%)。B期、C期及D期患者DD3 mRNA阳性率分别为0%(0/3)、18%(2/11)及37%(11/30),各期之间差异无统计学意义(P>0.05)。PCa伴骨转移患者外周血中DD3 mRNA阳性率为44%(10/22),而无骨转移者其阳性率为14%(3/22),组间差异有统计学意义(P<0.05)。PCa未治疗组、去势治疗组的DD3 mRNA阳性率分别为64%(7/11)、18%(6/33),组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论PCa患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达,DD3 mRNA可望作为诊断PCa血行转移和治疗监测的良好标志物。
- 陈占国陶志华陈晓东李澄棣余志贤李湘斌杨建荣
- 关键词：前列腺肿瘤基因
- 前列腺癌患者外周血DD3 mRNA的检测及临床意义被引量：14
- 2005年
- 目的 探讨检测前列腺癌(PC)患者外周血DD3mRNA在诊断和治疗监测中的意义。方法 用巢式逆转录聚合酶链反应(nRT PCR)检测44例不同分期PC患者和30例良性前列腺增生(BPH)患者及18名健康男性志愿者外周血中DD3mRNA,并进行对比分析。结果 BPH患者和健康男性志愿者外周血中DD3mRNA均阴性;未治疗PC组外周血DD3mRNA100%阳性(11 /11),而经内分泌治疗PC组阳性率30. 3% ( 10 /33 ),两组差异有统计学意义(P<0. 01 )。结论 外周血DD3mRNA是PC诊断和内分泌治疗监测的良好指标,有望成为PC特异性肿瘤标志物。
- 陈占国陶志华陈晓东李澄棣李湘斌杨建荣温秀姝林晓梅朱燕英
- 关键词：MRNA外周血前列腺癌患者巢式逆转录聚合酶链反应BPH患者
- DD3基因不同外显子在前列腺癌组织中的特异性表达被引量：4
- 2006年
- 目的探讨DD3基因不同外显子在前列腺癌组织中的特异性表达。方法根据基因库所收录的DD3 mRNA序列,设计跨越不同外显子的3对DD3 mRNA序列特异的引物,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对61例前列腺组织和70例前列腺外的其他肿瘤组织及癌旁组织进行DD3 mRNA检测,并对前列腺癌组织DD3 mRNA进行全序列分析。结果跨越DD3 mRNA外显子1与3、外显子1与4及外显子3与4之间设计的引物所检测DD3 mRNA结果完全一致,21例前列腺癌组织与1例前列腺上皮内肿瘤组织中DD3 mRNA均为阳性,39例良性前列腺增生组织和70例其他肿瘤组织及癌旁组织中D133 mRNA均为阴性。21例前列腺癌组织DD3 mRNA序列之间完全一致(GenBank登陆号为AY894120),与国外报道序列(AF103907)之间有99．8%同源。结论DD3 mRNA仅在前列腺癌中特异性表达,外显子3和外显子4均可作为DD3 mRNA特异的外显子。
- 陈占国陶志华陈晓东吴秀玲张筱骅胡元平李澄棣谢辉王瓯晨毛晓露翁志梁
- 关键词：前列腺癌基因表达外显子
- 荧光定量逆转录聚合酶链反应在前列腺特异性抗原基因检测中的应用价值被引量：13
- 2004年
- 目的 利用Taqman技术 ,建立荧光定量逆转录聚合酶链反应 (FQ RT PCR)技术 ,对前列腺癌病人外周血中前列腺特异性抗原基因 (PSAmRNA)进行定量检测。方法 在PSA基因的外显子 2和 3之间设计一对引物和一条Taqman探针 ;优化反应体系的条件 ,以不同LNCaP细胞含量为标准品和其循环阈值 (Ct值 )制作标准曲线 ,检测外周血中PSAmRNA含量 ;对本方法进行方法学评价及初步临床应用评价。结果 成功建立了FQ RT PCR检测PSAmRNA技术 ,本方法最低检测限为每毫升全血 5个LNCap细胞 ,线性范围为 5～ 1 0 8细胞 /ml,批内和批间变异系数分别为 9 5 %～1 4 3%和 1 5 2 %～ 2 0 1 % ,扩增产物克隆和测序分析显示本扩增片段为PSAmRNA序列的特异性片段。初步临床研究显示 ,1 0例经ECT ,检查证实骨转移的前列腺癌患者的外周血均检到PSAmRNA ,其含量变化为 8～ 1 0 4细胞 /ml,健康男性、女性各 5名外周血中PSAmRNA含量均小于本法最低检测限。结论 荧光定量逆转录聚合酶链反应检测PSAmRNA具有灵敏、特异、简便、结果数据化等特点 ,该方法可为前列腺癌微转移诊断、预后判断、指导治疗等奠定良好基础 。
- 陶志华柯峰陈晓东温秀姝王金果朱燕英杨建荣
- 关键词：荧光定量逆转录聚合酶链反应前列腺特异性抗原基因
- 前列腺癌组织中DD3和PSA基因定量表达与临床意义
- 2006年
- 目的探讨DD3和PSA基因在前列腺癌组织中定量表达及其临床意义。方法用实时荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌组织(PCa)、39例良性前列腺增生(BPH)组织中DD3mRNA和PSAmRNA含量进行检测,用ROC曲线对DD3mRNA、PSAmRNA和DD3mRNA/PSAmRNA等指标对前列腺癌诊断价值进行评价。结果LNCaP细胞株中PSAmRNA含量约为DD3mRNA的4000倍。PCa组织中DD3mRNA和PSAmRNA含量以及DD3mRNA/PSAmRNA比值均显著高于BPH组织,差异具有统计学意义(P<0·01),但PCa不同临床分期和分化程度间差异无统计学意义(P值均>0·05)。ROC曲线分析结果显示,DD3mRNA、PSAmRNA和DD3mRNA/PSAmRNA的曲线下面积(AUC-ROC)分别为0·937(95%CI:0·879~0·995)、0·755(95%CI:0·629~0·880)和0·839(95%CI:0·738~0·940)。当DD3mRNA、PSAmRNA和DD3mRNA/PSAmRNA临界值分别为1·4×105copies/mgtissue、3·0×107copies/mgtissue和5·0×10-3时,灵敏度分别为90·5%、81·0%和81·0%;特异度分别为85·0%、62·0%和66·7%。若将DD3mRNA和PSAmRNA联合用于PCa的诊断,其特异性与DD3mRNA相同,特异性均为85·0%,灵敏度可达100%。结论PCa组织DD3mRNA、PSAmRNA和DD3mRNA/PSAmRNA较BPH组织显著增高,DD3mRNA用于PCa的诊断性能均优于PSAmRNA和DD3mRNA/PSAmRNA,DD3mRNA和PSAmRNA的联合检测时特异度与DD3mRNA相同,但可明显提高灵敏度,对PCa的早期诊断具有重要意义。
- 陶志华毛晓露陈晓东余凯远翁志梁胡元平张筱骅吴秀玲谢辉王瓯晨宋其同李澄棣陈占国
- 关键词：DD3基因MRNA实时荧光定量RT-PCR前列腺组织
