江苏省自然科学基金(BK2012280)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 离体培养时Wnt3a对椭圆囊毛细胞再生的影响
- 2013年
- 目的在小鼠椭圆囊体外培养模型上,通过Wnt3a激活经典WNT信号,与DMSO共同作用,研究其对椭圆囊毛细胞再生的影响。方法 40只小鼠随机分成8组。实验第一部分:小鼠椭圆囊经4 mmol/L新霉素处理后,在不同浓度(0、25、100、200 ng/mL)Wnt3a的培养液中继续培养1 d,培养结束后对β-catenin,毛细胞纤毛及细胞核进行免疫荧光染色。实验第二部分:小鼠椭圆囊经4 mmol/L新霉素处理后,在含25 ng/mL Wnt3a的培养液中培养6 d,分别在空白对照组,50μmol/L DAPT、0.1%DMSO、50μmol/L DAPT+25 ng/mL Wnt3a培养液中继续培养7 d,共培养14 d。在所有培养过程中均加入10μmol/L Brdu。培养结束后Brdu,Myocin7a及细胞核进行免疫荧光染色。结果实验第一部分:在25 ng/mL Wnt3a组中可见β-catenin在支持细胞胞浆中有阳性表达,β-catenin阳性细胞数与其他各组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。实验第二部分:DMSO组中可见Myosin7a染色阳性细胞,对照组、Wnt3a+DAPT组及DATP组中可见大量Brdu阳性细胞而未见Myosin7a染色阳性细胞,DMSO组中Myosin7a阳性细胞数与其他3组相比较,组间差异具有显著性(P<0.01)。结论顺序联合应用Wnt3a和DMSO可通过激活经典WNT信号途径,促使椭圆囊内细胞向毛细胞样细胞转分化。
- 李姝娜马永明钱炜Vincent Lin
- 关键词:椭圆囊WNT3ADMSO毛细胞