国家自然科学基金(39730280) 作品数:8 被引量:64 H指数:3 相关作者: 阎隆飞 刘国琴 廖俊杰 吴英杰 肖兴国 更多>> 相关机构: 中国农业大学 广东轻工职业技术学院 长春师范学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
从花粉肌动蛋白到作物雄性不育 被引量:50 1999年 肌动蛋白在动植物细胞的生命活动中担负着重要任务 .花粉细胞中含有丰富的肌动蛋白 ,其结构及性质与动物肌动蛋白极其相似 .植物肌动蛋白基因的碱基序列及氨基酸序列与动物的序列亦极为相似 .植物细胞质雄性不育系植株的花粉比其保持系花粉中的肌动蛋白含量低得多 .在植物发育过程中肌动蛋白基因的表达有明显的器官特异性 ,在花粉中的表达量比根、茎、叶中高得多 .构建了肌动蛋白反义基因的表达质粒 ,转移到小麦和番茄原生质体中 ,以抑制花粉中肌动蛋白基因的表达 ,从而获得雄性不育植株 .转基因植株花粉中的肌动蛋白明显减少 ,而雌芯却不受影响 . 阎隆飞 刘国琴 肖兴国关键词:花粉 肌动蛋白 雄性不育 作物 生殖过程 萱草花粉中微管蛋白生物化学性质 被引量:6 2006年 微管(microtubule)是细胞骨架的重要成份,参与囊泡运输、信息传递等多种生命活动。我们从萱草花粉中纯化了植物微管蛋白,对其生物化学及生物物理学部分性质研究表明,纯化的微管蛋白经超离心法测定沉降系数为6.2S,SDS-PAGE分析α,β微管蛋白分子量为56kD、58kD,凝胶扫描分析纯度为93.7%。等电聚焦电泳测定等电点为pI=5.35。光谱学性质研究结果表明,最大紫外吸收峰为280.8nm,荧光光谱研究表明最大激发波长为282nm;此时的最大发射峰为338nm,圆二色光谱分析二级结构表明α-螺旋占27.24%,β-折叠占24.48%,无规卷曲为48.28%,呈典型球蛋白特征。 廖俊杰 吴英杰 阎隆飞关键词:微管蛋白 微管 花粉 萱草 萱草花粉微管蛋白的体外聚合及电镜观察 被引量:2 2005年 微管(microtubule)作为细胞骨架的主要成分,在植物体内,微管除决定细胞的形状外,还参与很多重要的细胞功能。但有关微管蛋白生物化学的研究绝大多数来自动物脑组织材料,对植物微管蛋白的研究除培养细胞外所知甚少,我们纯化了毫克数量的萱草(Hemer-ocallis fulvaL.)花粉微管蛋白,利用紫杉醇作为促进剂,在Mg2+、GTP等存在下体外聚合成功,并观察了其电镜下的形态。 廖俊杰 廖俊杰 吴英杰关键词:萱草 微管 微管蛋白 电镜观察 Isolation and Characterization of Dynamin from Pollen of Hemerocallis fulva 被引量:2 2002年 Dynamin, a 100-kD GTPase first found in animal cells, is essential for vesicle formation in receptor-mediated endocytosis, synaptic vesicle recycling, and possibly vesicle trafficking in and out of the Golgi apparatus. Recently, dynamin-like proteins were also found in some plant cells. We demonstrate here the presence of dynamin with molecular weight of 100 kD in day-lily ( Hemerocallis fulva) pollen based on molecular estimation and Western blotting. The highly purified pollen Dynamin had GTPase activity, which could be stimulated 1.64 fold by calf brain microtubules in vitro. The results from electron microscopic examination showed that the pollen dynamin readily self-assembled into ring-like structures. 吴英杰 曹勤红 阎隆飞 刘国琴关键词:DYNAMIN POLLEN ISOLATION 衣藻肌动蛋白-绿色荧光蛋白的融合基因在烟草悬浮细胞中的表达及融合蛋白的体外聚合 被引量:2 2001年 将衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)肌动蛋白(actin)基因(cDNA)与绿色荧光蛋白(green fluore- scence protein, GFP)基因融合后, 分别构建到原核和植物表达载体中, 并在BL21plus细菌和烟草悬浮细胞(BY-2)中进行表达. 通过荧光显微镜观测到重组后的融合蛋白在菌体和烟草悬浮细胞中得到正确表达. 肌动蛋白-绿色荧光蛋白的融合蛋白主要分布在烟草悬浮细胞细胞膜周围, 参与膜骨架的组成, 另外还大量分布于细胞核周围和细胞板的位置, 同时也在细胞内形成丝状结构, 参与F-actin的组成. 将肌动蛋白-绿色荧光蛋白融合基因的原核表达产物经过硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和疏水柱层析后, 得以纯化, 并在纯化产物中加入肌动蛋白聚合缓冲液, 纯化的肌动蛋白能聚合成为丝状结构即F-actin, 这表明低等藻类的肌动蛋白具有同高等植物和动物相似的性质和功能. 杨毅 刘国琴 阎隆飞关键词:绿色荧光蛋白 真核表达 融合基因 真核生物 萱草花粉微管蛋白的生物化学性质 2005年 以萱草花粉为材料,采用丙酮粉法、QAE-Sephadex A50离子交换层析及FPLC技术作为主要分离纯化手段,纯化了毫克数量的萱草花粉微管蛋白,并研究了微管蛋白的生物化学及生物物理学部分性质。试验结果表明:纯化的微管蛋白在20℃时沉降系数为6.2 S;α、β2个亚基的分子量分别为56,58 kD;凝胶扫描分析纯度为93.7%;等电聚焦电泳测定等电点(PI)为5.35。光谱学性质研究表明其最大紫外吸收峰为280.8 nm;荧光光谱研究表明其最大激发波长为282 nm,此时的最大发射峰为338 nm;圆二色光谱分析二级结构是α-螺旋占27.24%、β-折叠占24.48%、无规则卷曲为48.28%,呈典型球蛋白特征。 盛艳敏 许月 吴英杰关键词:萱草 花粉 微管 微管蛋白 小麦线粒体肌球蛋白的纯化和特性分析 被引量:1 2001年 通过DE-52离子交换层析和Sephacryl S-300凝胶过滤等方法从小麦线粒体中纯化出了一种脱球蛋白,其重链分子量约为210ku,与骨骼肌肌球蛋白Ⅱ的分子量相近(205ku),并且可以被抗人骨骼肌肌球蛋白多克隆抗体识别.小麦线粒体肌球蛋白的ATP酶活性可以被鸡骨骼肌肌动蛋白丝激活,达到202.5 nmol/min·mg.此外,其ATP酶活性还可以被Ca2+激活,却不被高浓度的Ca2+抑制.结果表明小麦线粒体肌球蛋白与骨骼肌肌球蛋白具有一些相似的生化特性. 赵和平 刘爱校 刘国琴 阎隆飞关键词:肌球蛋白 线粒体 ATP酶活性 小麦 生化特性 百合花粉与花粉管中类高尔基体58K蛋白 被引量:3 2000年 动物细胞中,高尔基体往往位于微管组织中心(MTOC)附近,它们的位置部分地被58K蛋白所决定.通过SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳和免疫印迹方法,我们发现川百合花粉与花粉管内存在类高尔基体58K蛋白,其分子量与动物细胞内58K蛋白类似,约为 60 ku.通过免疫荧光标记方法,在共焦激光扫描显微镜下观察发现,花粉与花粉管内类高尔基体58K蛋白主要存在于一些颗粒状的细胞器上.这些颗粒状细胞器的分布与植物细胞内高尔基体的分布是一致的.进而通过免疫金标和透射电镜观察发现,花粉与花粉管内类58K蛋白主要存在于高尔基体附近的囊泡膜上. 李岩 阎隆飞关键词:花粉 百合 全文增补中