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国家自然科学基金(30771988)

作品数:11 被引量:109H指数:4
相关作者:李康生陈小璇王革非张衡辛岗更多>>
相关机构:汕头大学广西医科大学香港大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金汕头市科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 5篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 5篇细胞
  • 4篇流感
  • 4篇病毒
  • 3篇大脑
  • 2篇多糖
  • 2篇脂多糖
  • 2篇皮质
  • 2篇小鼠
  • 2篇流感病毒
  • 2篇脑皮质
  • 2篇胶质
  • 2篇胶质细胞
  • 2篇NS1
  • 2篇P53
  • 2篇A型流感
  • 2篇A型流感病毒
  • 2篇大脑皮质
  • 1篇单个核细胞
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡研究

机构

  • 8篇汕头大学
  • 1篇广西医科大学
  • 1篇香港大学

作者

  • 8篇李康生
  • 5篇陈小璇
  • 4篇王革非
  • 3篇辛岗
  • 3篇张衡
  • 2篇陈幼莹
  • 2篇张丹桂
  • 2篇高媛丽
  • 2篇李卫中
  • 2篇曾俊
  • 2篇许燕璇
  • 1篇冯振博
  • 1篇张增峰
  • 1篇陈鸿霖
  • 1篇黄楷
  • 1篇张娟
  • 1篇曾祥兴
  • 1篇罗殿中
  • 1篇韦敏怡
  • 1篇樊晓晖

传媒

  • 2篇生物化学与生...
  • 2篇Cellul...
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中国科学(C...
  • 1篇中华传染病杂...
  • 1篇广东医学
  • 1篇中国热带医学
  • 1篇Scienc...
  • 1篇国际免疫学杂...

年份

  • 3篇2011
  • 1篇2010
  • 5篇2009
  • 2篇2008
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
星形胶质细胞纯化方法改良及脂多糖刺激后一氧化氮系统的表达被引量:3
2011年
目的对BALB/c小鼠大脑皮层星形胶质细胞分离纯化的方法进行改良和优化,并进一步研究经脂多糖(LPS)刺激后其一氧化氮(NO)的产生及一氧化氮合酶(NOS)表达情况。方法星形胶质细胞采用温和胰酶与定轨摇床振荡相结合的方法进行分离,采用抗GFAP抗体鉴定其纯度;再采用LPS刺激分离培养的星形胶质细胞,检测培养上清中NO的产生及3种NOS表达情况。结果体外培养的星形胶质细胞经免疫荧光方法鉴定,纯度达97%;LPS刺激后星形胶质细胞合成NO的量明显增多,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达量明显上调。结论经温和胰酶消化和振荡相结合的方法,可以获得高纯度的原代培养小鼠大脑皮质星形胶质细胞;星形胶质细胞经LPS刺激后可诱导产生大量的NO及高水平表达iNOS。
辛岗苏芸张娟高媛丽陈小璇李康生
关键词:大脑皮质星形胶质细胞一氧化氮
不同亚型流感病毒NS1蛋白在酵母菌细胞中转录激活功能的差异
2009年
非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1)是甲型流感病毒一种重要的调控蛋白,与病毒的毒力密切相关.本文检测了不同亚型流感病毒NS1蛋白在酵母菌细胞中的基因转录激活能力.将携带NS1基因的诱饵载体与空的猎物载体共转化AH109和Y187酵母菌细胞,观察AH109在QDO培养基上的生长情况,以X-α-gal为底物检测其分泌α-半乳糖苷酶的能力;通过ONPG实验定量分析Y187酵母菌细胞β-半乳糖苷酶活性的强弱.结果发现转化H1N1,H5N1和H9N2亚型流感病毒NS1基因的AH109酵母菌细胞能够在QDO培养基上生长,并分泌高水平的α-半乳糖苷酶.同时这些基因转化的Y187酵母菌细胞具有很强的β-半乳糖苷酶活性.与此相反,H3N2亚型流感病毒NS1基因转化AH109和Y187后,上述实验结果均为阴性.这说明H1N1,H5N1和H9N2亚型的NS1蛋白具有刺激酵母菌细胞基因转录的功能,而H3N2亚型的NS1蛋白缺乏这种能力,表明NS1蛋白型别的不同可造成其生物学活性的差异.
李卫中王革非曾俊张丹桂张衡陈小璇陈幼莹李康生
关键词:流感病毒NS1蛋白酵母双杂交转录激活
Apoptosis and Proinflammatory Cytokine Responses of Primary Mouse Microglia and Astrocytes Induced by Human H1N1 and Avian H5N1 Influenza Viruses被引量:29
2008年
Patients with an influenza virus infection can be complicated by acute encephalopathy and encephalitis. To investigate the immune reactions involved in the neurocomplication, mouse microglia and astrocytes were isolated, infected with human H1N1 and avian H5N1 influenza viruses, and examined for their immune responses. We observed homogeneously distributed viral receptors, sialic acid (SA)-a2,3-Galactose (Gal) and SA-a2,6-Gal, on microglia and astrocytes. Both viruses were replicative and productive in microglia and astrocytes. Virus-induced apoptosis and cytopathy in infected cells were observed at 24 h post-infection (p.i.). Expression of IL-1β, IL-6 and TNF-a mRNA examined at 6 h and 24 h p.i. was up-regulated, and their expression levels were considerably higher in H5N1 infection. The amounts of secreted proinflammatory IL-1β, IL-6 and TNF-a at 6 h and 24 h p.i. were also induced, with greater induction by H5N1 infection. This study is the first demonstration that both human H1N1 and avian H5N1 influenza viruses can infect mouse microglia and astrocytes and induce apoptosis, cytopathy, and proinflammatory cytokine production in them in vitro. Our results suggest that the direct cellular damage and the consequences of immunopathological injury in the CNS contribute to the influenza viral pathogenesis. Cellular & Molecular Immunology.
Gefei WangJuan ZhangWeizhong LiYun SuYuanli GaoHeng ZhangGuimei LinXiaoyang JiaoKangsheng Li
关键词:MICROGLIAASTROCYTEAPOPTOSIS
脂多糖活化小鼠大脑小胶质细胞后炎性细胞因子的表达被引量:3
2011年
目的采用细菌脂多糖(LPS)对原代培养的BALB/c小鼠大脑皮质小胶质细胞进行刺激,检测小胶质细胞IL-1bI、L-6和TNF-α等细胞因子的基因表达情况。方法分离纯化小胶质细胞,采用1μg/ml LPS刺激24h,再采用RT-PCR检测IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平。结果体外培养的小胶质细胞经LPS刺激后,细胞因子IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平明显上调。结论 LPS活化的小胶质细胞可产生大量的炎性细胞因子。
辛岗苏芸许燕璇陈小璇李康生
关键词:脂多糖小胶质细胞白细胞介素-1B肿瘤坏死因子-A
Effects of NS1 variants of H5N1 influenza virus on interferon induction, TNFa response and p53 activity被引量:3
2010年
Non-structural protein 1(NS1)is an important virulence factor of the highly pathogenic H5N1 avian influenza virus.A five-amino-acid(5 aa)deletion at position 80–84 and an aspartic acid to glutamic acid substitution at position 92(D92E)are two major NS1 mutations that are highly correlated with enhanced virulence.To investigate the effect of these mutations in H5N1 virulence,three H5N1-NS1 variants were constructed:NS51(lacking 5 aa at position 80–84),NS51(I)(carrying a 5-aa insertion at position 80–84)and NS51(IM)(carrying both the 5-aa insertion and the D92E mutation).We examined the effects of these mutations on interferon(IFN)induction,tumor-necrosis factor(TNF)a response,p53 activity and apoptosis.We found that the D92E mutation eliminated NS1’s repressive effect on IFN induction,while the 5-aa deletion resulted in enhanced resistance to TNFa responses.We also observed that all three variants exhibited a similar suppressive effect on p53 transcriptional activity,although none of them significantly influenced apoptosis of host cells.Our findings shed new light on the role of NS1 in the pathogenicity of H5N1 virus.
Weizhong LiGefei WangHeng ZhangGang XinDangui ZhangJun ZengXiaoxuan ChenYanxuan XuYouhong CuiKangsheng Li
关键词:INTERFERONP53TNFA
人甲型H1N1流行性感冒病毒全基因组分析与反向遗传载体的克隆被引量:2
2009年
目的明确一株人甲型H1N1流行性感冒(流感)病毒的遗传背景,建立流感病毒反向遗传的平台。方法对分离自汕头市儿童的一株人甲型H1N1流感病毒进行空斑纯化;利用甲型流感病毒通用引物,对该病毒全基因组的8条片段(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS)进行RT-PCR全长克隆、DNA测序及初步生物信息学分析;将其8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体,构建人甲型H1N1流感病毒的反向遗传系统。结果RT-PCR克隆得到该H1N1毒株的8条全长片段,经测序分析确认该毒株的基因序列,该毒株与2006年至2008年分离的人甲型H1N1流感病毒具有很高的同源性,未出现奥司他韦或金刚乙胺抗药性的遗传突变。PCR与测序证实,插入该菌株8个全长基因组片段的载体序列完全正确。结论成功构建了该毒株的感染性克隆。获得了该毒株全基因组序列,为明确病毒遗传信息、提供流行病学监测数据、建立流感病毒反向遗传平台奠定了研究基础。
王革非张衡李卫中曾俊张丹桂陈幼莹陈小璇李康生
关键词:流感病毒A型H1N1亚型克隆遗传学技术基因组病毒
无脊椎动物细胞免疫研究进展被引量:4
2009年
无脊椎动物的细胞免疫机制近年来逐渐得到重视。无脊椎动物缺乏真正的抗体和特异性的免疫细胞,机体防御反应依靠非特异的固有免疫结构。无脊椎动物的自然免疫是由细胞免疫和体液免疫共同完成的。因而阐明无脊椎动物的细胞免疫机制对于研究免疫系统的进化有重要意义,同时对于无脊椎动物的资源开发和资源利用有积极的促进作用。
曾祥兴张驰李康生
关键词:无脊椎动物细胞免疫免疫细胞血细胞体腔细胞
人呼吸道禽流感病毒受体的分布趋势(英文)被引量:37
2008年
禽类流感病毒和人类流感病毒具有很强的受体识别特异性,分别与唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体分子结合而感染各自的宿主细胞.这种受体结合特异性是流感病毒在禽类和人类之间跨种属传递的主要障碍.应用凝集素组织化学染色技术,探讨人呼吸道各解剖学部位流感病毒唾液酸受体的分布特征.结果显示,唾液酸α-2,3Gal受体,即禽类流感受体,主要分布在下呼吸道的呼吸部即呼吸细支气管和肺泡,而在主气管、支气管和细支气管仅少量分布.相反,人类流感病毒受体,唾液酸α-2,6Gal受体在气管、支气管呈高密度分布,随着支气管分级逐渐降低分布减少,至肺泡分布最少.但比较人呼吸道发育成熟过程中,唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体的表达,未发现明显差别.禽流感H5N1病毒体外感染人呼吸道组织试验结果表明,肺泡上皮较支气管和气管上皮易感染,与唾液酸α-2,3Gal受体分布特点相符合.结果提示,人呼吸道可被禽流感病毒感染,目前H5N1病毒极少发生人传人的特点,可能与个体间上呼吸道唾液酸α-2,3Gal受体表达差异有关.
张增峰樊晓晖李康生黄楷罗殿中冯振博韦敏怡管轶陈鸿霖张锦霞
关键词:A型流感病毒唾液酸H5N1病毒
H1N1亚型流感病毒诱导外周血单个核细胞凋亡研究被引量:17
2009年
A型流感病毒能诱导淋巴细胞、单核巨噬细胞的凋亡,为进一步探讨淋巴细胞和单核巨噬细胞在凋亡中可能存在的相互作用,用H1N1亚型流感病毒诱导人外周血淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡.结果显示,前48h,H1N1流感病毒能诱导淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡,但在培养48h后,流感病毒对单核巨噬细胞表现为凋亡抑制作用,同时流感病毒对淋巴细胞吸附不同时间后,荧光染色和流式细胞术检测凋亡未见明显差异,说明细胞凋亡与病毒吸附时间长短并无相关性.检测p53抑制剂Pifithrin-α(PFT-α)加入前后淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡情况,结果显示,淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡均被抑制,提示通过p53诱导的凋亡可能是流感病毒诱导细胞凋亡的一条重要途径.
张衡王革非高媛丽陈小璇林桂梅李康生
关键词:外周血单个核细胞A型流感病毒凋亡P53
Differential transcription-activating capability of NS1 proteins from different influenza virus subtypes expressed in yeast被引量:2
2009年
Influenza A virus NS1 protein is an important regulatory factor with multiple functions and contributes greatly to viral pathogenesis.In the present study,transcription-activating potential of NS1 from different influenza A virus subtypes was examined in yeast two-hybrid system.The bait vectors contain-ing different NS1 genes,along with an empty prey vector,were transformed into yeast AH109(for growth assay on QDO plate and α-galactosidase assay),and Y187(for β-galactosidase assay).AH109 transformants with NS1 gene from H1N1,H5N1,and H9N2 viruses grew vigorously on the QDO plate and secreted high level of α-galactosidase.Also,Y187 bearing the above NS1 genes exhibited en-hanced β-galactosidase activity.Nevertheless,H3N2-NS1-transformed AH109 and Y187 yeasts did not grow on QDO plate and secrete β-galactosidase,respectively.These findings denote the remarkable variation in NS1 proteins from different influenza A virus subtypes on the transcription-stimulating capability in yeast.
LI WeiZhong,WANG GeFei,ZENG Jun,ZHANG DanGui,ZHANG Heng,CHEN XiaoXuan,CHEN YouYing & Li KangSheng Department of Microbiology and Immunology,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China
关键词:INFLUENZANS1YEAST
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