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成都市科技计划项目(06GGYB860SW-030)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
刘友平
宋丽
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宋丽
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刘友平
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年份
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2011
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花椒RAPD-PCR反应体系的建立与优化
被引量:4
2011年
目的:建立并优化花椒随机扩增的多态性DNA-聚合酶链式反应(RAPD-PCR)体系。方法:以汉源花椒DNA为材料,采用正交试验对Mg2+、dNTP、DNA、引物、TaqE等反应条件进行优化。结果:花椒的PCR反应体系为25μL,包括ddH2O13.5μL、25mmol·L-1的MgCl22.0μL、2.5mmol·L-1的dNTPs20μL、10×Buffer30μL、10ng·μL-1的引物2.0μL、DNA2.0μL、5IU TaqE0.5μL;PCR反应程序为95℃预变性3min,94℃预变性2min,94℃变性50s,43.8℃退火1min,72℃延伸1min20s,35个循环,72℃最后延伸5min。用所建立的方法对21个产地的花椒样品进行测定,均可获得清晰、稳定的PCR扩增条带。结论:本研究可为RAPD分析应用于花椒的遗传多样性研究打下良好的基础。
宋丽
刘友平
关键词:
花椒
聚合酶链式反应
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