国家自然科学基金(30500147)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
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- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
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- 利用碱性磷酸酶融合表达技术研究神经导向因子netrin-4的功能
- 2006年
- 目的:采用碱性磷酸酶(AP4)标记技术研究netrin-4的神经导向功能和受体结合特征,并评估碱性磷酸酶作为标签分子在真核基因功能研究中的意义。方法:将netrin-4全长及3个结构域编码区cDNA克隆到碱性磷酸酶表达载体APtag4,成功构建真核表达载体AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT,进而在COS7细胞中表达出含有AP标签的融合蛋白,并通过神经组织块培养技术和神经元原代培养技术对其活性进行鉴定。结果:确认了netrin-4的神经突起导向功能。进一步通过对AP标签进行检测,发现netrin-4全长、LNT和NCT可与原代培养的神经元表面相结合,而EGFL不结合,说明神经元表面含有netrin-4受体或结合位点,且可能通过LNT和NCT结构域起作用。结论:netrin-4具有明确的神经突起导向功能,在神经元表面含有结合位点,同时发现碱性磷酸酶标签融合表达技术在真核基因功能研究方面具有一定优势。
- 秦树桐高艳王利红周仁平张成岗
- 关键词:碱性磷酸酶基因神经元
- 神经突起导向因子netrin-1及其受体与肿瘤发生被引量:4
- 2006年
- 近年来的研究发现,netrin1和其受体基因在多种肿瘤中表达下调,未与配体netrin1结合的DCC和UNC5H能够诱导细胞凋亡,而在结合配体后则抑制细胞凋亡。在肿瘤细胞中凋亡通路通常被抑制,而且在50%以上的肿瘤中p53是失活的。netrin1与其受体结合后能完全抑制p53诱导的细胞凋亡;同时p53也直接调节netrin1及其受体基因的表达。因此,netrin1及其受体可能在肿瘤发生过程中发挥重要作用。
- 秦树桐张成岗
- 关键词:肿瘤发生细胞凋亡