国家自然科学基金(30900104) 作品数:9 被引量:30 H指数:3 相关作者: 葛荣朝 石翠翠 李晶岚 李晓旭 胡京蕊 更多>> 相关机构: 河北师范大学 制药技术有限公司 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
植物类受体蛋白激酶的研究进展 被引量:11 2010年 植物类受体蛋白激酶是一类定位在质膜上,具有胞外结构域、跨膜结构域和胞内激酶域的蛋白质.简要介绍类受体蛋白激酶的结构、种类以及其在植物生长发育过程中的作用,并对近几年植物类受体蛋白激酶的研究进展进行了综述. 石翠翠 高雷更 惠颖 胡京蕊 路佳 葛荣朝关键词:类受体蛋白激酶 信号转导 抗逆性 腐殖酸钠和高岭土对丹参抗旱性的影响 被引量:2 2014年 在干旱条件下,比较了不同质量浓度的腐殖酸钠及高岭土处理对丹参抗旱性的影响.试验结果表明,在干旱条件下利用5g/L腐殖酸钠溶液对丹参种子进行浸种能够显著提高其萌发率;喷施1g/L腐殖酸钠可明显使丹参幼苗气孔收缩,从而降低蒸腾速率,使丹参幼苗抗旱性得到显著提高.60g/L高岭土悬浮液的叶面喷施可增强丹参幼苗对强光的反射,降低叶片的蒸腾速率,从而减弱丹参叶片由于强光照射造成的水分丢失.生理检测表明,5g/L腐殖酸钠溶液的喷施可明显提高丹参幼苗的可溶性糖和叶绿素含量,这可能是丹参抗旱能力得到提高的原因之一. 程赵惠 高园园 张蕾蕾 王茜 刘雪欢 葛荣朝关键词:丹参 高岭土 抗旱性 生理效应 利用酵母单杂交筛选拟南芥AtSTK基因表达调控蛋白的研究 被引量:1 2017年 拟南芥丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因AtSTK的过量表达可以明显提高拟南芥的耐盐性。为进一步研究AtSTK基因表达的调控机制,以拟南芥基因组DNA为模板设计引物,扩增获得AtSTK基因的启动子序列,并构建到报告载体pAbAi,将重组报告载体质粒pAbAi-HYT利用BstbⅠ进行单酶切线性化,转化酵母菌株Y1H Gold,线性化的pAbAi-HYT整合到基因组中。然后,将纯化的拟南芥双链cDNA、pGADT7-Rec载体共转化含有报告载体pAbAi-HYT的酵母菌,将菌液涂布到含有100 ng/m L Ab A的SD/-Leu培养基上进行阳性克隆的酵母单杂交筛选。通过回复鉴定、序列测定,最终筛选获得了可能参与AtSTK基因表达调控的4个拟南芥基因。测序结果表明,酵母单杂交筛选获得的拟南芥基因AT3G32090含有WRKY转录因子保守结构域,为WRKY类转录因子的一员。因此,AtSTK基因的表达很可能接受MAPK信号传导途径中AT3G32090基因编码的WRKY类转录因子的调控,从而影响拟南芥植株的耐盐性。 杨歌 惠颖 赵翠 田梦涵 任媛媛 黄占景 葛荣朝关键词:启动子 酵母单杂交 水稻OsRPK2基因的克隆及功能初步鉴定 被引量:2 2021年 类受体蛋白激酶基因OsRPK1在水稻的抗逆信号传导中起着重要作用。本研究扩增获得与OsRPK1高度同源的OsRPK2基因,构建p1300:35S:OsRPK2过表达载体后转化拟南芥。对35S:OsRPK2纯合体拟南芥进行抗逆性分析表明,在盐、ABA、PEG胁迫下,OsRPK2过表达拟南芥萌发率都明显低于野生型拟南芥,其幼苗的根长生长和成株生长状况方面比野生型拟南芥表现出更为明显的受抑现象。生理检测表明,盐胁迫处理后,与野生型拟南芥相比,35S:OsRPK2转基因拟南芥中叶绿素含量下降更为明显,脯氨酸上升量较小,丙二醛含量上升更为明显,这些内在生理机制使得OsRPK2过表达拟南芥抗逆性明显下降。通过对35S:OsRPK2拟南芥的qRTPCR检测发现,OsRPK2的过量表达使拟南芥抗逆信号通路下游的SAD、SOS3和FRY基因表达明显受到抑制,OsRPK2基因可能通过SOS和CDPK信号通路影响拟南芥的抗逆性。 张福臻 刘方惠 陈鑫欣 孙静 葛荣朝关键词:类受体蛋白激酶 抗逆性 信号通路 OsRPK1基因过表达和RNA干涉对水稻苗期耐盐性的影响 被引量:7 2020年 水稻OsRPK1基因属于富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶,在盐胁迫下其表达量暂时升高后出现明显下降。前期研究表明,OsRPK1基因过表达会造成拟南芥非生物胁迫耐受性明显降低。本研究对OsRPK1基因在水稻中实现过表达和RNA干涉,进而对OsRPK1的抗逆性功能加以探究。结果表明,OsRPK1基因表达量增加时,水稻幼苗表现为耐盐性下降;RNA干涉则使水稻幼苗表现为耐盐性增加。盐胁迫后OsRPK1过表达植株脯氨酸含量低于野生型、MDA含量和相对电导率显著高于野生型,而OsRPK1-RNAi水稻植株的脯氨酸含量显著高于野生型、MDA含量和相对电导率显著低于野生型。因此,OsRPK1基因的表达量对水稻耐盐性具有明显影响,脯氨酸含量及细胞质膜受破损程度的改变可能是造成转基因水稻耐盐性变化的内在原因。本研究为进一步阐明OsRPK1基因的抗逆作用机制奠定了基础,对于通过调整该基因表达改良水稻的耐盐性具有重要意义。 李晶岚 陈鑫欣 石翠翠 刘方惠 孙静 葛荣朝关键词:水稻 过表达 RNA干涉 生理指标 拟南芥基因AtSTPK的功能及表达调控研究 AtSTPK基因是拟南芥中与耐盐相关的蛋白激酶基因,属于丝/苏氨酸蛋白激酶基因,生物信息学分析表明,此基因含有1137bp的完整开放阅读框,编码378个氨基酸,蛋白分子量为41.6KD,等电点为9.3,此基因与小麦中的丝... 邴雷 冯翠翠 赵翠 李晶岚 赵宝存 沈银柱 黄占景 葛荣朝关键词:拟南芥 耐盐 基因功能 文献传递 大豆GmRPK2基因的克隆及功能初步鉴定 2022年 非生物胁迫如干旱、土壤盐碱化等严重影响着农作物的生长发育,农作物产量明显受限。大豆GmRPK2基因与拟南芥抗逆基因AtRPK1高度同源,为探究其抗逆功能和作用机理,构建了GmRPK2基因过表达载体并转化拟南芥筛选获得纯合体。抗逆性检测结果表明,在高盐、PEG和ABA处理下,GmRPK2过表达拟南芥种子的萌发率显著低于野生型,其幼苗阶段根的生长量也明显小于野生型。成株阶段抗逆性检测表明,盐、旱胁迫下过表达拟南芥的生长受抑现象更为明显。为探究其抗逆性降低的内在机理,对GmRPK2过表达拟南芥进行了生理指标检测。结果表明,高盐胁迫后其叶绿素含量明显低于野生型,其丙二醛和电导率则明显较高,DAB染色比野生型更深;旱胁迫后过表达拟南芥的脯氨酸和可溶性糖含量明显较低,失水率明显较高。荧光定量PCR检测发现,GmRPK2基因在拟南芥中过表达后明显抑制了SAD1、P5CS1和ADH1的表达。因此,GmRPK2基因可能通过抑制CDPK抗逆信号转导通路、降低脯氨酸积累和减弱ABA信号传导通路影响拟南芥的抗逆性。 顾哑慧 张常青 张雪冰 张鑫月 张鑫杰 葛荣朝关键词:大豆 类受体激酶 生理指标 信号转导通路 水稻基因OsATS的克隆及功能鉴定 被引量:1 2021年 植物胚胎特异性蛋白ATS3和植物的渗透胁迫响应有密切关系,本文对水稻OsATS基因的抗逆相关功能进行了初步研究。qRT-PCR检测发现,水稻在盐胁迫后OsATS基因表达量显著增加。构建OsATS基因过表达载体,转化拟南芥植株,抗逆性检测表明, OsATS基因的过表达可以显著提高拟南芥在萌发阶段和成株阶段的耐盐性。随后将过表达载体p1300-35S:OsATS和RNA干涉载体pTCK303-OsATS-RNAi转入水稻,抗逆性分析表明,OsATS过表达水稻株系在萌发阶段和苗期的耐盐性显著提高,而OsATS基因RNAi水稻株系耐盐性则明显下降。qRT-PCR和生理指标检测表明,OsATS基因的表达可能通过调节OsP5CS1、OsLEA3-1、OsPDH基因的表达,调控了水稻细胞中的脯氨酸、LEA蛋白质含量,进而影响了水稻植株整体的耐盐性。本研究初步揭示了OsATS基因的抗逆功能,后续可通过调整该基因的表达量,改良水稻的抗逆性。 李晓旭 王蕊 张利霞 宋亚萌 田晓楠 葛荣朝关键词:水稻 过表达 生理指标 拟南芥耐盐相关基因AtSTK原核表达载体的构建及表达 被引量:5 2013年 提取拟南芥总RNA,反转录获得cDNA后PCR扩增获得1 212 bp目的基因AtSTK。将该基因片段构建到PET-32a表达载体,转化大肠杆菌Rosetta菌,用IPTG进行诱导表达。该基因表达的最佳诱导条件为IPTG终浓度1mmol/L,诱导时间为4 h,此时融合蛋白表达量最高。该融合蛋白存在于包含体中,经包含体溶解、复性,最终纯化获得了AtSTK融合蛋白,为AtSTK蛋白的理化性质研究奠定了基础。 胡京蕊 沈金宝 李晶岚 李晓旭 赵宝存 葛荣朝关键词:拟南芥 丝氨酸 苏氨酸蛋白激酶 原核表达 耐盐基因 拟南芥耐盐相关基因AtSTK的克隆与功能研究 研究表明,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶是生物酶中的一个大家族,参与环境胁迫信号的传递是其重要功能之一.TaSTK是我们筛选获得的一个盐诱导后表达增强的小麦基因,通过在拟南芥中的异源功能验证,表明TaSTK基因的过量表达能够显著... 邴雷 李晶岚 李晓旭 赵宝存 沈银柱 黄占景 葛荣朝关键词:拟南芥 抗逆性