江苏省卫生厅科技发展基金(H200714)
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
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- 发文基金：江苏省卫生厅科技发展基金国家教育部博士点基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
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- 不同质量浓度粒巨噬细胞集落刺激因子对Lewis大鼠骨髓源性树突状细胞诱导分化的影响被引量：5
- 2009年
- 背景：体内成熟和不成熟树突状细胞（dendritic cells,DC）数量极少,仅占外周血单核细胞的1%,占脾细胞的0.2%-0.5%,几乎不能直接从体内分离出大量的纯化的DC,要获得足够的DC,只有依靠体外培养增殖。目的：以不同剂量粒巨噬细胞集落刺激因子诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,拟建立合适的大鼠骨髓源性未成熟DC的培养方法。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/2008-05在苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室和附属儿童医院骨科实验室完成。材料：雄性SPF级Lewis大鼠用于培养骨髓源性DC,雄性SPF级Brown Norway大鼠用于混合淋巴细胞反应实验。方法：采用密度梯度离心法从Lewis大鼠股骨和胫骨获取骨髓源性单个核细胞,分别以2.5,5,10,20μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子和5μg/L白细胞介素4诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,采用黏附法纯化DC。主要观察指标：以流式细胞仪分析DC表型。混合淋巴细胞反应中以Lewis大鼠DC作为刺激细胞,以Brown Norway大鼠脾脏T细胞作为反应细胞,检测其刺激同种T细胞增殖能力。ELISA测定分泌细胞上清液中白细胞介素12、干扰素水平。结果：随粒巨噬细胞集落刺激因子质量浓度的增高,诱导的细胞获得率逐渐升高,但DC比例逐渐下降。CD86、MHC-II表达阳性率随培养时间延长逐渐增加。培养第5,7天,DC不能有效刺激同种异体T细胞的增殖反应,培养第13天,DC刺激同种异体T细胞的增殖反应能力明显增强（P〈0.01）。培养7d以后,DC上清液中白细胞介素12水平明显增高（P〈0.01）,脂多糖刺激以后升高更加明显（P〈0.01）。脂多糖刺激后DC表型MHCII、CD86表达明显增加,白细胞介素12分泌增加,刺激同种T细胞增殖能力轻度增强。结论：5μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子为诱导大鼠骨髓源性未成熟DC的最佳剂量,培养9d可以获得足够数量和纯度的未成熟DC。
- 樊彩斌温端改欧阳骏侯建全严春寅张学光张亚
- 关键词：树突状细胞骨髓白细胞介素4
- 外周血与尿PCA3基因表达和尿PCA3评分在前列腺癌诊断中的意义被引量：21
- 2012年
- 目的 探讨外周血、尿液中PCA3和PSA基因表达在前列腺癌诊断中的应用价值。方法2009年6月至12月因前列腺疾病住院患者105例，收集前列腺按摩后的初始尿液和外周血标本，经病理证实前列腺癌37例、BPH68例；8例泌尿系结石患者作为正常对照。应用实时定量PCR检测尿沉渣、外周血单个核细胞中PCA3、PSAmRNA表达，以Bactin为内参照。结果外周血PCA3的mRNA表达敏感性为48．6％，特异性为100％。尿PCA3评分经ROC曲线分析，ROC—AUC=0．908，以截断值64．6为诊断前列腺癌的临界值，前列腺癌患者中尿PCA3阳性率为81．1％，BPH患者中尿PCA3阴性率为86．8％。5例血清tPSA〈4μg／L前列腺癌患者，尿PCA3评分诊断前列腺癌4例；3例血清tPSA4～10I．zg／L前列腺癌患者，尿PCA3评分诊断前列腺癌2例；29例血清tPSA〉10Ixg／L前列腺癌患者，尿PCA3评分诊断前列腺癌24例（82．8％）。22例血清tPSA〈4Ixg／LBPH者，PCA3评分诊断阴性率为89．4％（20／22）；19例血清tPSA4～10μg／LBPH者中，PCA3评分诊断阴性率为84．2％（16／19）；27例血清tPSA〉10Ixg／LBPH者中，PCA3评分诊断阴性率为81．5％（22／27）。尿PCA3评分、外周血PCA3联合检测的敏感性为86．5％，高于两者单独测定。结论外周血中的PCA3mRNA表达是诊断前列腺癌的特异性指标，尿PCA3评分联合检测外周血中PCA3基因表达可以提高前列腺癌的诊断敏感性。
- 刘龙亚温端改何军侯健全岑建农浦金贤
- 关键词：前列腺癌实时定量聚合酶链反应
