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上海市科学技术委员会基础研究重点项目(07JC14037)
作品数:
1
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H指数:1
相关作者:
牟姗
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王琴
顾乐怡
梁馨月
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相关机构:
上海交通大学医学院附属仁济医院
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发文基金:
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2011
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足细胞表达有功能的代谢型谷氨酸受体1和5
被引量:2
2011年
目的研究足细胞是否表达有功能的代谢型谷氨酸受体(mGluR)。方法以RT—PCR法检测基因表达,Western印迹、免疫荧光双染色和免疫电镜检测蛋白质表达。酶免疫实验(EIA)、电泳迁移位移实验(EMSA)和Western印迹法检测细胞环腺苷酸(cAMP)的产生和转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的活化。激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的变化。结果足细胞表达mGluR1和5的基因和蛋白质,。肾小球中mGluR1的表达和足细胞标志蛋白synaptopodin表达共定位。免疫电镜显示mGluR1位于足细胞体和足突细胞膜下层。mGluR1和5的激动剂3,5-二羟基苯甘氨酸(DHPG)诱导足细胞快速地产生cAMP,转录因子CREB被激活,磷酸化CREB表达增高。这些改变能被mGluR1和5的选择性抑制剂1-氨基茚-1,5-二羧酸(AIDA)以及腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)抑制,而2-氨基乙氧化联苯-甲硼烷(2APB)则不具有上述抑制作用。DHPG诱导足细胞内游离钙缓慢持续地增加,细胞孵育于不含钙的培养液中、AIDA预处理以及2APB预处理抑制了DHPG诱导的细胞内游离钙离子增加。结论足细胞表达有功能的mGluR1和5。
顾乐怡
梁馨月
王丽华
倪兆慧
严玉澄
高嘉元
牟姗
王琴
钱家麒
关键词:
足细胞
受体
CAMP反应元件结合蛋白质
环腺苷酸
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