中国博士后科学基金(20100471583) 作品数:5 被引量:8 H指数:2 相关作者: 李阳 仇玉兰 刘海霞 常建梅 陈秀花 更多>> 相关机构: 山西医科大学 山西医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 山西省基础研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
氯乙烯对大鼠肝细胞P21^(WAF1/CIP1)和P53蛋白表达影响 被引量:3 2013年 目的研究氯乙烯(VCM)对大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1和P53蛋白表达的影响。方法 64只无特定病原体级SD大鼠(雌雄各半)随机分为低、中、高3个剂量组和1个对照组,采用腹腔注射染毒,低、中、高剂量组分别以5、25、125mg/kg剂量VCM气体腹腔注射染毒,对照组注射同中剂量组相同体积的清洁空气。每周3次,持续12周。染毒6、12周时每组分别随机处死8只大鼠(雌雄各半),光镜下观察染毒大鼠肝组织病理改变,免疫印迹法检测肝细胞中P21WAF1/CIP1和P53蛋白的表达。结果 VCM染毒6周时,各剂量组大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1蛋白表达量均较对照组降低,高剂量组P53蛋白表达量较对照组增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。VCM染毒12周时,高剂量组大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1蛋白表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各剂量组染毒12周和6周比较,P21WAF1/CIP1蛋白表达量均增高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。组织病理学检查发现VCM染毒12周时,肝细胞有气球样变,汇管区变大,纤维化等改变。结论 VCM可导致大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1和P53蛋白表达改变。 张盼红 马宁 李阳 张文平 高怡 田凤洁 仇玉兰关键词:氯乙烯 P53蛋白 P21WAF1 蛋白印迹 骨髓增生异常综合征ASXL1基因突变的研究 被引量:4 2017年 目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者中表观遗传调节因子ASXL1基因的突变情况。方法在DNA水平采用聚合酶链反应(PCR)扩增产物片段直接测序分析法检测53例初发MDS患者及20名健康人ASXL1基因第12外显子突变情况,比较ASXL1突变患者与野生型患者临床及实验室特征;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增产物直接测序分析法检测ASXL1突变在mRNA水平的表达。结果在53例MDS患者中,9例(16.9 %)ASXL1基因突变。共检测出6种突变类型,包括4种移码突变(2例p.Glu635ArgfsX15、3例p.Gly646TrpfsX12、1例p.Ala640GlyfsX14、1例p.Gly790TrpfsX10)和2种无义突变(1例p.Gln1063X和1例p.Gln695X)。所有突变类型均为杂合突变,其中p.Gly790TrpfsX10和p.Gln695X为新发现突变类型。此外还检测到一种单核苷酸多态性(SNP)位点(4例p.Gly652Ser)。20名健康人中检测出pGly652Ser SNP 5名和p.Leu1173Leu SNP 1名。RT-PCR扩增产物片段直接测序可在mRNA水平检测出移码突变(p.Gly646TrpfsX12)。ASXL1突变患者初发时外周血白细胞计数、红细胞计数、血小板计数、血红蛋白、网织红细胞、中性粒细胞绝对值、外周血淋巴细胞比例、T细胞亚群、骨髓原始细胞比例、MDS分型和染色体核型分布与ASXL1野生型患者相比,差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论ASXL1基因在MDS患者中的突变频率较高,且可在mRNA水平检测到ASXL1基因突变。 刘海霞 王宏伟 覃艳红 陈秀花 任方刚 常建梅 张耀方 薛凤 李娟 徐智芳关键词:骨髓增生异常综合征 突变 氯乙烯对肝细胞周期G_1/S关卡相关蛋白表达影响 2016年 目的探讨氯乙烯(VCM)对细胞周期G1/S关卡功能影响及可能的机制。方法将人正常肝细胞HL-7702暴露于VCM气体(体积分数为0.8%、2.5%、7.5%、15.0%和30.0%)和空气(对照组)48 h后用流式细胞仪检测HL-7702细胞周期;Western blot测定细胞中G1/S关卡相关蛋白表达水平。结果染毒48 h后,在<7.5%剂量时,HL-7702细胞G0/G1期细胞百分数随染毒剂量增加呈上升趋势,与对照组[(73.35±1.56)%]比较,7.5%剂量组G0/G1期细胞百分比[(78.52±4.46)%]升高,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组[(12.85±0.02)%]比较,2.5%剂量组S期细胞百分比[(10.97±0.17)%]下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK 4)和P16蛋白表达量均呈上升趋势,与对照组比较,7.5%剂量组HL-7702细胞CDK 4、P16表达[分别为(1.43±0.51)、(0.80±0.30)]均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论低剂量VCM染毒可使肝细胞发生G1期阻滞,高剂量时G1期阻滞作用消失;其机制主要与上调P16、CDK 4蛋白表达有关。 胡君阳 李阳 王慧 张文平 仇玉兰慢病毒介导的RNA干扰下调TSC2表达对白血病U937细胞系的影响及作用机制 2017年 【摘要】目的研究下调TSC2基因表达对白血病U937细胞系的生物学作用及其对mTOR通路活性的影响。方法选择TSC2高表达的U937细胞系,通过慢病毒介导的RNA干扰技术下调TSC2基因表达;采用CCK-8比色法、细胞集落形成实验和流式细胞术检测其对细胞增殖、分化和凋亡的影响;采用Westernblot法和实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测TSC2表达下调对mTOR通路蛋白表达及活性的影响。结果TSC2基因表达降低能够促进U937细胞的增殖和集落形成(P〈0.05);能够使U937细胞G.期[(52.53±3.75)%对(75.10±4.33)%,t=6.829,P=0.002]比例明显降低,G2/M期[(22.43±1.00)%对(15.47±1.20)%,t=-5.581,P=-0.019]、S期[(25.03±4.34)%对(14.33±0.91)%,t=-5.413,P=0.013]比例升高;对细胞分化和细胞凋亡没有明显影响(P〉0.05)。TSC2基因表达下调后,mTOR活性升高,磷酸化的4EBP1和S6KI蛋白活性升高,而AKT蛋白活性没有明显变化;与细胞增殖相关的基因cyclinD1、c—myc表达升高,PTEN基因表达升高,P27KIP基因和凋亡相关基因BCL-XL的表达没有明显的改变。结论TSC2基因表达下调可以通过调节mTOR通路活性促进白血病细胞的增殖。 徐智芳 刘海霞 覃艳红 陈秀花 任方刚 张耀方 常建梅 张娜 胡晋军 王宏伟关键词:ROTOR 白血病 氯乙烯染毒对大鼠肝细胞P16、CCND1和CDK4基因mRNA表达的影响 被引量:1 2013年 目的通过检测氯乙烯(VCM)对大鼠肝脏细胞P16、CCND1和CDK4基因mRNA表达的变化,从细胞周期调控角度,探讨VCM可能的致癌机制。方法选用健康SD大鼠32只,按体重随机分为4组:阴性对照组,5、25、125mg/kg氯乙烯染毒组。采用腹腔注射染毒,隔日染毒,每周3次,连续6周。采用实时荧光定量PCR方法,测定大鼠肝脏细胞P16、CCND1和CDK4基因mRNA表达量。结果氯乙烯对大鼠肝脏细胞CCND1和CDK4基因mRNA表达量随着染毒剂量的升高而降低,且125 mg/kg染毒组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。P16基因mRNA表达量没有明显改变,差异无统计学意义。结论 VCM对大鼠肝脏细胞周期的影响可能是通过下调CCND1和CDK4基因mRNA的表达。 马宁 张盼红 李阳 王慧 高怡 仇玉兰关键词:氯乙烯 P16 CCND1 MRNA表达