吉林省科技发展计划基金(201205071)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：吉林省畜牧兽医科学研究院吉林省畜牧兽医工作总站吉林农业大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省科技攻关计划丹东市科技计划项目更多>>
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- 柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2013年
- 根据已发表的柔嫩艾美耳球虫(Houghton株)基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,将扩增的片段连入pMD18T载体,筛选阳性克隆进行测序和序列分析。结果表明,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,测得ORF全长813bp;与GenBank中收录的Houghton株柔嫩艾美耳球虫的SAG2基因序列相比,有4个碱基发生变异,两者的核苷酸序列同源性为99.50%;柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的推导氨基酸序列同源性为99.63%,其中,A185G变异导致了编码氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸(E62G),A247T变异导致了编码氨基酸由蛋氨酸变为亮氨酸(M83L),而其他核苷酸的突变为无义突变;SAG2抗原的N端和C端疏水性较强,并且N端前23个氨基酸为跨膜信号肽区,而中间有许多亲水性区域,且显示很强的抗原性。柔嫩艾美耳球虫长春株与Houghton株的SAG2基因编码蛋白相似性很高,具有很强的抗原性,可以作为球虫疫苗的候选抗原来进一步研究。
- 曹利利姚新华侯洪烈苑淑贤任科研
- 关键词：克隆
- 柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达被引量：6
- 2015年
- 为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。
- 曹利利姚新华郭衍冰王英贺任科研魏峰苑淑贤
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫卡介苗
- 柔嫩艾美尔球虫SAG_2基因重组卡介苗的抗球虫保护效果被引量：2
- 2015年
- 本研究旨在通过动物试验,按设计以滴鼻、口服和颈部皮下注射的方式,将已构建的含有柔嫩艾美尔球虫SAG_2基因的卡介苗pMV361-SAG_2免疫雏鸡,通过检测鸡体液及细胞免疫水平、卵囊数、相对增重率、抗球虫指数等指标,对所构建的重组卡介苗的保护效果进行综合评价。结果显示,在实验室条件下重组卡介苗pMV361-SAG_2具有增强鸡抵抗柔嫩艾美尔球虫的免疫保护功效,且以滴鼻的方式进行免疫时效果最佳。本研究为抗球虫疫苗的研究提供试验依据。
- 郭衍冰曹利利姚新华任科研苑淑贤
- 关键词：重组卡介苗免疫保护
