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吉林省科技厅科技发展计划项目(20030442)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
洪敏
李奇
王昭
张纪周
程熠
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相关机构:
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王昭
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2008
1篇
2005
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阴、阳离子交换示差组合色谱法的设计及在纤溶酶纯化中的应用
被引量:1
2005年
目的:探索以阴、阳离子交换色谱串接组合为方式,进行高分辨率分离纯化蛋白质的可行性。方法:阴、阳离子交换示差组合色谱法,以等度洗脱方法进行的阴、阳离子交换组合色谱,以及亲和色谱的纯化结果相对比。结果:聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色法结果显示,阴、阳离子交换示差组合色谱法,具有较好的分离纯化效果。结论:以等度洗脱、pH梯度与盐梯度洗脱串接组合的阴、阳离子交换示差组合色谱是一种较好的组合纯化的方式,达到亲和色谱的纯化效果。
程熠
洪敏
李奇
张云龙
关键词:
色谱法
离子交换
纤溶酶
一种新的具有纤溶活性的N-V蛋白酶酶学性质分析
被引量:2
2008年
目的:测定N-V蛋白酶的最适反应温度、最适反应pH值及酶促反应动力学常数(Km),并对其进行蛋白酶分类。方法:利用纤维蛋白平板法测定N-V蛋白酶最适反应温度、最适反应pH值。以卜亮氨酸-p-硝基苯胺酯(Leu-pNA)作为底物,测定N-V蛋白酶的Km值。利用卜反式环氧琥珀酰亮氨酰氨基(4-胍基)丁烷(E64)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、1,10-邻菲哕啉、抑肽酶作为抑制剂对N-V蛋白酶的纤溶活性进行抑制作用,确定其蛋白酶分类。结果:N-V蛋白酶最适反应温度为50℃,最适反应pH值为8~9,Km值为1.97×10^-3mol·L^-1,PMSF有效抑制N-V蛋白酶的纤溶活性(P〈O.01),而E64、1,10-邻菲哕啉啉、抑肽酶对其活性均无明显抑制作用(P〉0.05)。结论:N-V蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶类。
李奇
王昭
张纪周
洪敏
关键词:
KM值
丝氨酸内肽酶类
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