河北省自然科学基金(C2005000605)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
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- 大豆脂肪氧化酶同功酶抗原的快速纯化方法被引量：2
- 2008年
- 目前常用的蛋白纯化方法均存在操作复杂、纯化周期长、成本高等缺点,本试验试图探索出一种经济快捷的蛋白纯化方案,且纯化后的蛋白可以用于制备单克隆抗体;以普通大豆品种冀豆12以及脂肪氧化酶缺失近等基因系Suzuyutaka中的Su-1,3,Su-2,3为材料,将大豆脂氧酶非变性PAGE分析与电洗脱技术相结合,纯化脂肪氧化酶同功酶抗原蛋白;回收到具有活性的电泳纯级脂肪氧化酶溶液,回收率达到了与离子交换柱层析相当的水平(49.64%);本试验探索的方法实现了应用经济快捷的纯化方案获得免疫所需抗原,为尽早获得脂肪氧化酶单克隆抗体并将其应用于实践打下了基础,并为其它蛋白质的快速分离纯化提供了参考。
- 马志民刘渊蒋春志杨春燕马峙英张孟臣
- 关键词：脂肪氧化酶电洗脱纯化
- 非变性PAGE在鉴定大豆脂肪氧化酶类型中的应用被引量：7
- 2007年
- 为解决脂肪氧化酶检测复杂、费用昂贵、剧毒试剂对人体影响等问题,研究出一种安全、快速而经济有效的大豆脂氧酶检测技术。以Suzuyutaka脂氧酶缺失近等基因系和非缺失类型大豆冀豆12为材料,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳探索非变性PAGE分析大豆脂肪氧化酶,通过对不同样品浓度、电泳条件和分离胶浓度的比较,摸索鉴定大豆Lox缺失类型的最佳条件。通过电泳条件优化分析发现,电泳样品中预样品的浓度为30%、分离胶浓度为11%、电泳时间为6 h时,3种脂肪氧化酶分辨清晰度最高;通过重复电泳的相对迁移率分析,表明在上述电泳条件下的检测结果比较稳定且重复性好;通过3种脂肪氧化酶酶带与缺失酶带对照比较和分子量测定两方面验证了所得到的3条脂肪氧化酶酶带。非变性PAGE是一种简单、经济、快捷而安全的检测分析大豆脂肪氧化酶同功酶的方法,因而可以用于资源分析、良种繁育以及生产、收购和加工利用中的大豆脂氧酶缺失类型鉴定。
- 马志民蒋春志杨春燕马峙英张孟臣
- 关键词：大豆迁移率
