国家自然科学基金(31101850)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
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- 大鼠不同部位内皮细胞的体外培养被引量：3
- 2012年
- 为了建立一种能有效分离、培养和获取较高纯度的大鼠心肌膜微血管内皮细胞(RMMECs)、肠黏膜微血管内皮细胞(RIMECs)、主动脉内皮细胞(RAECs)、后腔静脉内皮细胞(RPVECs)的模型,自7dSD大鼠分别取左心室壁、空肠、主动脉、后腔静脉,采用II型胶原酶消化、差速贴壁、差速消化法获得较纯的RMMECs、RIMECs、RAECs、RPVECs。结果表明:通过形态学特征及微血管内皮细胞和血管内皮细胞相关特异性抗原检测证实,得到高纯度RMMECs、RIMECs、RAECs、RPVECs。结论:利用胶原酶II型消化法成功分离并培养大鼠的RMMECs、RIMECs、RAECs、RPVECs,为进一步开展内皮细胞的生物学特性的相关研究提供有效的方法。
- 李杰董虹张涛段慧琴刘小瑜许光勇郭洋穆祥
- 关键词：SD大鼠细胞培养模型微血管内皮细胞内皮细胞
- 犀角地黄汤对脂多糖复制大鼠发热模型下丘脑IL-1β和PGE_2的影响被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在探讨犀角地黄汤对脂多糖引起大鼠发热的退热效果及其机制。120只SD大鼠,随机分为4组,对照组、脂多糖组、阿司匹林组和犀角地黄汤组,每组30只。脂多糖组、阿司匹林组和犀角地黄汤组腹腔注射100μg·kg-1脂多糖复制大鼠发热模型,2h后,阿司匹林组和犀角地黄汤组分别灌服阿司匹林(0.04g·mL-1,按体重以10mL·kg-1给药)和犀角地黄汤(1.6g·mL-1,按体重以10μg·kg-1给药);对照组和脂多糖组灌服同体积的生理盐水。检测各组动物基础体温和攻毒给药后每小时肛温,并在2、3、5、8h分别从每组中随机选取6只大鼠断头处死,采取下丘脑组织,检测其IL-1β和PGE2的变化。结果表明,与脂多糖组比较,犀角地黄汤能显著缓解脂多糖引起的大鼠体温升高,且在用药后2h显著降低脂多糖引起的IL-1β(P<0.05)和PGE2(P<0.05)的升高,用药后3h显著降低IL-1β的升高(P<0.05)。说明犀角地黄汤能明显抑制脂多糖引起的大鼠发热,其初期的退热作用机制可能与抑制下丘脑IL-1β的生成,进而抑制发热介质PGE2释放有关。
- 董虹张涛胡格姜代勋王建舫李佳穆祥
- 关键词：犀角地黄汤脂多糖IL-1ΒPGE2
- 人参皂苷Rb1对微血管自律性舒缩活动及大鼠心肌微血管内皮细胞内钙瞬时变化的影响被引量：1
- 2015年
- 探讨人参皂苷Rb1(GSRb1)对人合谷穴区皮内微血管自律性舒缩活动振幅及大鼠心肌微血管内皮细胞(RMMECs)内游离钙离子瞬时变化的影响。利用激光多普勒血流测定仪结合离子导入仪检测微血管自律性舒缩活动的振幅。利用激光共聚焦显微镜、钙离子荧光探针Fluo-3AM检测ATP引起的RMMECs细胞内钙离子的变化及Rb1对其的影响。结果表明:试验确定了能够引起RMMECs细胞内游离钙离子释放的ATP的最低量为0.5μg·mL-1,瞬时升高差异显著的剂量是0.7μg·mL-1,能够影响RMMECs细胞内钙离子变化的GSRb1的最低量为8μg·mL-1。RMMECs经8μg·mL-1 GSRb1孵育后,能够刺激细胞内游离钙离子释放的ATP的最低量升高为1.5μg·mL-1。本研究说明,提高微血管自律运动振幅的中药成分GSRb1能够通过对RMMECs胞内钙离子的影响,提高RMMECs对ATP的耐受能力(ATP的刺激量由0.5μg·mL-1升高到1.5μg·mL-1)。
- 王鑫冯波孙向婉李平丽董虹穆祥
- 关键词：CA2+
- 大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养与鉴定被引量：2
- 2014年
- 本研究旨在建立1种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。取710日龄SD大鼠,分离大脑皮质,经Ⅱ型分散酶消化、葡聚糖3次离心法获得大鼠脑微血管段,用胶原/分散酶消化后,在37℃5%CO2培养箱中进行原代细胞培养。利用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测法,结合细胞形态学观察对培养的细胞进行鉴定。成功分离培养了大鼠脑微血管内皮细胞,倒置显微镜下单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长;免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原呈阳性。本试验成功建立了分离纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养方法。
- 王鑫冯波刘晓晔张倩董虹穆祥
- 关键词：脑微血管内皮细胞体外分离培养
- 激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3 AM负载大鼠心肌微血管内皮细胞最佳浓度和时间的探讨
- 2013年
- 为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内荧光信号的强度、位置、装载探针后细胞的形态来观察装载效果。结果表明:1～3μM/L的Fluo-3 AM负载5～20min均不出现荧光信号;4μM/L的Fluo-3 AM负载5～10min时即出现荧光信号;5μM/L的Fluo-3 AM孵育细胞15min后出现清晰且分布均匀的荧光信号。Fluo-3 AM对贴壁生长的RMMECs负载效果主要受探针浓度和负载时间的影响。
- 冯波董虹张涛胡格房克凤穆祥
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜心肌微血管内皮细胞
