广东省卫生厅资助课题(A2000187)
- 作品数:3 被引量:17H指数:2
- 相关作者:黄建荣刘尚礼宋卫东李卫平黄东生更多>>
- 相关机构:中山大学附属第二医院暨南大学更多>>
- 发文基金:广东省重点攻关基金广东省卫生厅资助课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 改性PLA材料在软骨细胞立体培养中的应用被引量:1
- 2003年
- 【目的】观察改性 PLA 材料与不同载体材料对关节软骨细胞的吸附作用、对软骨细胞形态和功能的影响及其自身降解,为软骨组织工程学选择合适的支架材料提供实验基础。【方法】将甲壳素(chitin,CH)分别加入聚乳酸(PLA)、胶原(Co)中,制成三维支架;将软骨细胞与三维支架材料进行复合培养,以单纯 PLA、胶原材料为对照;利用相差倒置显微镜、扫描电镜观察软骨细胞生长情况及材料降解情况。免疫组化试剂盒检测Ⅱ型胶原表达。【结果】在加入软骨细胞悬液后,PLA/甲壳素(P/CH)组、胶原/甲壳素(Co/CH)组三维支架均对软骨细胞有良好吸附作用,2~3d 开始良好吸附,4d 开始分裂增殖,6d后开始在 PLA/甲壳素材料伸出的侧枝上形成软骨样组织,3周后检测具透明软骨特性;而单纯 PLA 组亲水性差,对软骨细胞吸附性差;胶原海绵组则降解太快(4周)。【结论】PLA/甲壳素复合材料对软骨细胞有良好吸附作用,且降解较慢;在上述材料中是软骨细胞立体培养良好的三维支架。
- 宋卫东刘尚礼黄建荣周长忍李卫平李立华
- 关键词:软骨细胞细胞培养
- 人关节软骨细胞培养法的改良及其特有表型的检测被引量:8
- 2003年
- 目的探讨简便、易行的人关节软骨细胞体外培养方法。方法 以0.25%胰酶消化软骨块0.5 h,0.30%胶原酶消化4 h后,将软骨细胞与小片软骨(0.2 mm3大小)共同置入预涂多聚赖氨酸的培养瓶中培养;与传统方法对照,用倒置显微镜、免疫组织化学、电镜、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,检测经7次传代后软骨细胞表型改变相伴随的形态学及分子生物学特征。结果改良法培养的细胞活性率可达100%。经多次传代的软骨细胞仍保持原代软骨细胞的表型特征,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性,并可观察到软骨的特有的细胞-胶原纤维几何构像。而传统法培养的软骨细胞在第7代特有表型出现改变。结论本改良法是一种较方便而且有效的培养法。
- 宋卫东刘尚礼李卫平沈慧勇黄东生黄建荣
- 关键词:关节软骨细胞表型
- 不同方法体外培养软骨细胞的活力、功能及成软骨能力被引量:11
- 2002年
- 目的探讨不同体外培养方法所培养软骨细胞活力、表型及成软骨能力的差异。方法取股骨髁关节面软骨,经不完全酶消化法消化后,与未完全消化的软骨块置入预涂多聚赖氨酸的培养瓶中培养;以传统法对照,用倒置显微镜、免疫组化等方法进行观测;并将多次传代后的软骨细胞悬液注入裸鼠腋部皮下,观察其成软骨能力。结果改良法培养的细胞活性率可达100%;经多次传代的软骨细胞仍保持初代软骨细胞的表型特征,并可观察到软骨的特有的细胞-胶原纤维几何构象;移植到裸鼠皮下后可形成软骨样组织。结论改良法是一种较方便、有效的培养法。
- 宋卫东刘尚礼李卫平沈慧勇黄东生黄建荣
- 关键词:关节软骨细胞体外培养成骨能力关节软骨缺损软骨细胞移植改良法