国家自然科学基金(30500360) 作品数:25 被引量:179 H指数:11 相关作者: 李齐发 谢庄 刘振山 赵兴波 屈旭光 更多>> 相关机构: 南京农业大学 中国农业大学 西南民族大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
The mRNA Expression and Methylation Status in Imprinting Control Region of H19 Gene Between Cattle-Yak and Their Parents 被引量:3 2012年 The H19 gene, which is imprinted with preferential expression from the maternal allele, was one of the first identified imprinting genes in mammals. Recent studies revealed that correct imprinting of the H19 gene plays a vital role in human spermatogenesis. To investigate whether imprinting defects were associated with the hybrid sterility of male cattle-yak, the methylation patterns of the H19 imprinting control region (ICR) and H19 mRNA expression in the testes of cattle-yak, yak, and cattle were examined. The results showed that the 3rd CCCTC-binding factor (CTCF) site of the H19 ICR was significantly hypomethylated in the testes of cattle-yak compared with yak or cattle. As expected, H19 was expressed at a significantly higher level in cattle-yak than in yak or cattle. These results suggest that imprinting defects of the CTCF- binding site in the HI9 ICR were possibly associated with disturbed spermatogenesis of male cattle-yak. Thus, we propose that disorders in H19 imprinting, resulting in an increased H19 mRNA expression, might contribute to the sterility of F1 male hybrids between cattle and yak. LI Ming-gui LIU Zhen-shan PAN Zeng-xiang LUO Hua XIE Zhuang LI Qi-fa关键词:CATTLE-YAK 牦牛2个α-珠蛋白基因在染色体上排列顺序的确定 2006年 本试验扩增并克隆测定了牦牛2个α-珠蛋白基因间区域的序列.根据所测结果及人、鼠、山羊、马和黄牛的α-珠蛋白基因序列比对中的保守区设计了2对特异性引物,扩增并克隆测定了牦牛α-珠蛋白的上、下游基因序列.将测定的牦牛α-珠蛋白基因间区域序列进行同源性搜索,发现没有任何一个基因与它同源.上、下游基因的测序结果表明,上游基因为牦牛α1-珠蛋白基因,下游基因为α2-珠蛋白基因.这表明牦牛的2个α-珠蛋白基因在染色体上紧密排列,其中α1-珠蛋白基因在前,α2-珠蛋白基因在后. 袁青妍 李齐发 张庆波 黄治国 刘振山 谢庄 殷甫路关键词:牦牛 牦牛、犏牛睾丸组织中SYCP3基因mRNA表达水平研究 被引量:31 2008年 本文采用RT-PCR和荧光定量PCR对牦牛SYCP3基因的组织表达,以及SYCP3基因在牦牛和犏牛睾丸组织中的表达水平进行分析。结果表明,SYCP3基因在牦牛睾丸组织中特异表达,牦牛与犏牛睾丸组织中SYCP3基因的表达水平差异极显著(P<0.01)。睾丸和附睾组织切片显示,牦牛睾丸组织中可见各级生精细胞,附睾内可见发育良好的精子,而犏牛睾丸组织中无次级精母细胞和更高级生精细胞、附睾内未观测到精子,与人和小鼠SY-CP3基因缺失或表达水平降低出现的表型一致,可以认为SYCP3基因的表达水平可能与犏牛的雄性不育有一定的关系。 屈旭光 李齐发 刘振山 董丽艳 李新福 郝称莉 谢庄关键词:犏牛 牦牛 组织表达谱 荧光实时定量PCR 牦牛和犏牛睾丸组织DDX4基因mRNA表达水平与启动子区甲基化 被引量:20 2013年 【目的】了解牦牛和犏牛睾丸组织中DDX4基因mRNA表达水平和启动子区甲基化状态。【方法】采用real-time PCR技术检测牦牛和犏牛睾丸组织DDX4基因mRNA表达水平,采用克隆测序技术获得牦牛和犏牛DDX4基因启动子区序列,采用亚硫酸氢钠测序法检测牦牛和犏牛睾丸组织中DDX4基因启动子区甲基化状态。【结果】牦牛睾丸组织中DDX4基因mRNA表达水平极显著高于犏牛(P<0.01);牦牛和犏牛DDX4基因启动子区1 370 bp,含有核心启动子区(251 bp)和CpG岛(918 bp)。犏牛睾丸组织中DDX4基因启动子区甲基化水平(86.5%)极显著高于牦牛(67.0%)(P<0.01)。【结论】牦牛睾丸组织DDX4基因表达水平极显著高于犏牛,获得了牦牛和犏牛DDX4基因启动子区序列,且犏牛睾丸组织中DDX4基因启动子区甲基化水平极显著高于牦牛(P<0.01)。 周阳 骆骅 李伯江 贾超 谢庄 赵兴波 钟金城 李齐发关键词:牦牛 犏牛 甲基化 牦牛线粒体DNA细胞色素b基因序列测定及其起源、分类地位研究 被引量:31 2006年 牦牛在牛亚科中的分类地位仍存在较大的分歧。根据普通牛线粒体基因组序列设计引物对家牦牛基因组进行PCR扩增和克隆测序,获得了家牦牛细胞色素6(Cytochromeb)基因的全长序列,并以羊亚科绵羊(Ovisaries)为外类群,对牛亚科代表性物种进行了系统发育分析。结果显示:牛亚科不同物种间线粒体细胞色素b基因的转换/颠换比值为4.9,突变未达到饱和状态;牦牛与牛属间的序列差异百分比为8.0%~8.6%,大于牦牛与美洲野牛间的序列差异百分比;系统发育分析发现家牦牛与野牦牛首先聚为一类,再与美洲野牛聚为一类;说明牦牛与美洲牦牛属间的遗传相似性较高,而与牛属间的遗传相似性较低,结果支持现在的家牦牛和野牦牛都是同一祖先原始牦牛的后代,推测两者分化时间大约为0.55百万年前;支持将牦牛划分为牛亚科牦牛属的观点,牦牛属包括家牦牛和野牦牛两个种。 李齐发 李隐侠 赵兴波 刘振山 张庆波 宋大伟 屈旭光 李宁 谢庄关键词:牛亚科 牦牛 线粒体 细胞色素B基因 黄犏牛与黄牛b-Boule基因编码区序列、结构、表达模式和睾丸组织表达水平的差异分析 被引量:9 2009年 Boule是动物精母细胞减数分裂过程中的必需蛋白,与精子发生减数分裂阻滞、雄性不育等密切相关.文中通过PCR扩增和克隆测序获得黄犏牛b-Boule基因的cDNA全序列,生物信息学分析发现黄犏牛b-Boule基因编码区全长885bp,具有典型的RNA识别基序(RRM)和DAZ重复序列;与黄牛氨基酸序列的同源性为98.65%,仅在C-末端有4个氨基酸的差异,典型结构域的氨基酸序列和高级结构相同.RT-PCR发现b-Boule基因在黄牛和黄犏牛睾丸组织中特异表达,原位杂交显示b-Boule存在于初级精母细胞和次级精母细胞的细胞质中.荧光定量PCR发现黄牛睾丸组织中b-Boule基因表达水平显著高于黄犏牛(P<0.05),且黄犏牛精子发生减数分裂阻滞的表型与人、小鼠Boule基因表达缺失或降低引起的不育表型一致,因此推测b-Boule基因可能在精母细胞减数分裂过程中发挥重要作用,且与黄犏牛雄性不育有密切的关系. 李新福 李齐发 李隐侠 张庆波 徐洪涛 马志杰 钟金城 谢庄关键词:黄牛 雄性不育 原位杂交 荧光定量PCR DAZ家族新成员BOULE蛋白的结构与功能 被引量:11 2007年 BOULE蛋白是2001年发现的DAZ家族的新成员,是人类精子发生过程中减数分裂的关键调控因子.BOULE基因表达的改变或BOULE蛋白的缺乏可引起减数分裂阻滞和精子生成障碍,从而导致无精子症并产生不育.BOULE蛋白的一级结构中含有DAZ家族的特征结构域,包括DAZ重复和RNA结合域(RBM),因此,将其列为继DAZ、DAZL之后DAZ家族的第3个成员.本文对BOULE的发现过程、结构和定位进行了总结回顾,并重点介绍了其在精子发生减数分裂中的作用及其作用机制. 李齐发 李隐侠 张庆波 刘振山 曲旭光 谢庄关键词:男性不育 牦牛与犏牛联会复合体蛋白b-FKBP6基因的表达特征分析 被引量:2 2013年 联会复合体蛋白FKBP6是哺乳动物精子发生减数分裂联会复合体形成必需的。采用RT-PCR和荧光定量PCR技术对牦牛和犏牛b-FKBP6基因的组织表达特征,以及牦牛与犏牛睾丸组织中b-FKBP6 mRNA表达水平进行了分析。结果显示:b-FKBP6基因在牦牛、犏牛睾丸和卵巢组织中特异表达,且牦牛睾丸组织中b-FKBP6 mRNA表达水平极显著高于犏牛(P<0.01)。结合犏牛精子发生减数分裂联会复合体形成障碍表型,推测睾丸组织b-FKBP6 mRNA表达水平可能与犏牛雄性不育有一定的关系。 李伯江 骆骅 屈旭光 潘增祥 谢庄 刘红林 李齐发关键词:牦牛 犏牛 黄牛、牦牛和犏牛b-Sycp2基因的克隆与睾丸组织mRNA的表达水平 被引量:5 2013年 【目的】克隆黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列,了解牛Sycp2基因序列特征和组织表达特征,分析睾丸组织中Sycp2基因的表达水平。【方法】采用电子克隆和克隆测序技术获得黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列,利用生物信息学方法分析其序列特征;采用RT-PCR分析牛Sycp2基因的组织表达特征;采用real-time PCR技术检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Sycp2基因的表达水平。【结果】①黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因编码区序列全长均为4 365 bp,命名为b-Sycp2,编码蛋白含有1 454个氨基酸残基,并包含卷曲螺旋结构域等典型结构域;②b-Sycp2基因在睾丸组织中特异表达,黄牛和牦牛睾丸组织中b-Sycp2基因的表达水平显著高于犏牛(P<0.05)。【结论】成功克隆了b-Sycp2基因,b-Sycp2基因为睾丸组织的特异表达基因,且黄牛和牦牛睾丸组织b-Sycp2基因表达水平显著高于犏牛。 骆骅 贾超 屈旭光 赵兴波 钟金城 谢庄 李齐发关键词:黄牛 牦牛 犏牛 克隆 中国地方鹅品种遗传分化和分子系统发育分析 本文利用80个随机引物对8个中国地方鹅品种和莱茵鹅进行RAPD分析,并以莱茵鹅为外类群,对中国地方鹅品种进行了系统发育分析。结果发现中国地方鹅品种的遗传分化程度低,与起源于灰雁的莱茵鹅遗传差异较大,支持中国鹅起源于鸿雁的... 李齐发 张丕燕 苏胜彦 刘红林 何大乾 谢庄关键词:分子系统发育