国家重点基础研究发展计划(001CB108901) 作品数:7 被引量:29 H指数:2 相关作者: 武波 陈钢 刘彦杰 俞冠翘 陆祖军 更多>> 相关机构: 广西大学 中国科学院上海生命科学研究院 江苏省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
苜蓿根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)nodD3P1启动子下游序列的缺失和互补分析 被引量:2 2002年 在苜蓿根瘤菌中,nodD3基因的转录由两个彼此分离的启动子P1和P2控制.在P1下游是一段由660 bp组成的序列,接着是nodD3的编码区.由P1下游序列3’末端开始缺失得到的一系列缺失突变体的遗传分析指出,P1下游+1~+125 nt序列对P1的表达是必须的.互补分析和结瘤试验指出,ORF2自我抑制P1的表达,而+1~+125nt序列可对抗ORF2对P1的抑制作用. 陈迪 刘彦杰 朱家璧 沈善炯 俞冠翘关键词:启动子 编码区 质粒构建 茉莉酸甲酯对大豆和百脉根根部类黄酮和茉莉酸类物质合成的影响 茉莉酸甲酯(MJ)作为一种信号分子,可以诱导植物产生系统抗性。Mabood等(2006)研究证明茉莉酸类物质能有效诱导结瘤因子的产生,与黄酮类物质协同作用能更高效地诱导结瘤基因的表达和结瘤因子的产生,明显提高大豆(Soy... 冯思琼 武波 宾金华费氏中华根瘤菌HN01pmrA所在基因簇的结构分析 2007年 经原位杂交,从费氏中华根瘤菌HN01基因组文库中钓出含有pmrA基因的阳性克隆pGXHN 300,对其进行亚克隆测序得到pm rA两翼6.8 kb的DNA序列。生物信息学分析显示,该序列包括6个完整的ORF和1个不完整ORF。pm rA所在的基因簇含有4个ORF:ORF a、ORFb、ORF c、ORFd(pm rA)。其中,ORF a与Rh izobium etli的cy sG(CAA 04958.1)在氨基酸水平一致性为79%,相似性为87%。对ORF c序列分析发现与亚硫酸及亚硝酸还原相关的保守结构域。通过融合PCR方法,将两个潜在的启动子序列分别连在gus上游,以pTR102为载体导入HN 01中。在完全培养基YMA上两个启动子均不表达,在以硝酸钠为氮源,亚硫酸钠、硫酸钠或甲硫氨酸分别为硫源的MM培养基上生长均表达出GU S活性,表明这两个潜在的启动子与硫、氮代谢相关。 曹永强 隆文杰 梁善范 陈钢 陆祖军 武波关键词:费氏中华根瘤菌 基因文库 启动子 费氏中华根瘤菌ntrBC基因突变株的构建及其特性 被引量:2 2007年 从费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01基因文库的重组质粒pGXHN300上获得ntrB、ntrC基因完整序列.通过自杀质粒pK18mob同源单交换的方法,分别获得了HN01菌株的ntrB和ntrC基因的突变株GXHNB、GXHNC.功能检测证明GXHNB、GXHNC能以硝酸盐为唯一氮源进行正常生长,但不能以铵源作为唯一氮源进行正常生长. 龚焘 陆祖军 陈钢 曹永强 武波关键词:费氏中华根瘤菌 突变体 Analysis of the downstream region of nodD3 P1 promoter by deletion and complementation tests in Sinorhizobium meliloti 被引量:1 2003年 In Sinorhizobium meliloti, the nodD3 gene is transcriptionally controlled by two promot-ers, P1 and P2. Under P1, there is a 660 bp sequence including a small open reading frame, ORF2, followed by the nodD3 coding region. Genetic analysis using the different deletions on the 3′ends of P1 downstream sequence showed that the downstream sequence +1—+125nt is es-sential for P1 expression. Complementation, mutations and nodulation tests demonstrated that the ORF2 auto-represses P1 expression, while the P1 downstream sequence +1—+125nt counteracts it. 陈迪 刘彦杰 朱家璧 沈善炯 俞冠翘关键词:SINORHIZOBIUM DOWNSTREAM 费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)质粒复制基因repC序列多样性的研究 被引量:4 2005年 采用质粒快速检测法从供试33株费氏中华根瘤菌中分别检测出2~4个内源大质粒.用根据豌豆根瘤菌的repC基因设计1对引物RC1和RC3,从供试菌株及3株华癸中生根瘤菌和1株大豆慢生根瘤菌中扩增得到repC基因片段,证明在费氏中华根瘤菌中广泛存在repC基因.通过对扩增产物的测序,并与已报道的repC基因序列进行聚类分析,发现供试菌株可分为2个群,群a和群b,群内十分保守,但群间差异明显;其中群b的序列与已知类型的差异明显. 周岿 夏薇 丁晨红 周俊初关键词:费氏中华根瘤菌 聚类分析 接种大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)遗传工程菌株LMG101对大豆的增产效应 被引量:20 2003年 笔者曾报道带外源肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA的大豆根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)工程菌株LMG10 1在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率 ,用其接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。本项工作通过 3年的田间小区试验 ,对工程菌S .frediiLMG10 1的田间施用效果进行了研究。试验表明 ,接种工程菌S .frediiLMG10 1能有效地提高大豆的结瘤固氮效率和大豆产量。接种工程菌S .frediiLMG10 1的大豆植株固氮酶活力分别比对照和接种出发菌植株高 3.1倍和 2 .1倍 ,与之相应工程菌占瘤率也较高 ,大豆田间产量分别比对照和接种出发菌提高 10 %和 5 %以上 ,统计差异显著 (P <0 .0 5 )。 戴小密 刘彦杰 叶小梅 朱万宝 许玲 朱家壁 常志州 黄红英 马艳 俞冠翘关键词:大豆根瘤菌 增产效应 大豆 NIFA基因 共生固氮 费氏中华根瘤菌lrp基因的克隆、突变与功能 2008年 通过分子克隆技术,从费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01基因组文库中克隆到一个lrp基因.该基因与已报道的苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021的lrp基因在核苷酸水平上有89%相似性,在氨基酸水平上有99%相似性.利用自杀质粒pK18mob构建含有lrp基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合后导入原始菌株HN01中,经过同源单交换,获得发生正向插入突变的突变株GXHNLTA和反向插入突变的突变株GXHNLTB.将lrp基因ORF连接到载体pLAFR3上,获得用于互补的质粒pGXHNL100,将该质粒通过三亲本接合导入突变株中,获得互补株GXHNWA、GXHNWB.对野生型菌株、突变株、互补株进一步研究发现,在以脯氨酸、亮氨酸、丝氨酸等氨基酸为唯一碳、氮源的MM培养基中培养时,突变体GXHNLTA、GXHNLTB的生长均滞后于出发菌株HN01.植株试验表明,突变菌株GXHNLTA、GXHNLB比野生菌株HN01开始结瘤的时间提前1d,在结瘤效率、单株瘤数、瘤重、固氮酶活性方面并无显著差别. 陈钢 唐美琼 孙云 许兢 武波关键词:SINORHIZOBIUM FREDII LRP基因 突变