国家自然科学基金(81172381)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：蒋强刘超于莉娜王红霞于莉娜更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省高等学校科技创新团队项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 简易的单个肿瘤干细胞分离及其培养方法
- 2012年
- 目的建立一套简单有效的单个肿瘤干细胞分离及培养方法,提高研究的效率与质量。方法在火焰上轻烤拉伸后的毛细管,与无菌塑料管连接建立口控毛细管单细胞分离装置。分离单个SW480细胞无血清培养筛选出克隆球,CD133、CK7荧光标记鉴定;消化克隆球吸取单个肿瘤干细胞并移至石蜡油封闭的微滴及96孔板中培养对比观察。结果 SW480细胞克隆形成率约为1.04%,其CD133表达强CK7表达弱;口控毛细管单细胞分离装置分离单个肿瘤干细胞的有效率可高达98.99%;单个肿瘤干细胞在微滴中培养与在96孔板中培养的比较:在分裂时间点上,前两次分裂时间相差无几(P>0.05),在微滴中培养的细胞后续分裂需时较长;在持续扩增的数量上,微滴培养为11.5%(22/192)而96孔板为9.2%(17/184),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论单个SW480细胞无血清培养可形成肿瘤干细胞球,口控单细胞分离装置能够有效分离单个肿瘤干细胞,石蜡油封闭微滴培养法和96孔板培养法均能够有效扩增单个肿瘤干细胞。但石蜡油封闭微滴培养法操作灵活、观察便捷、环境稳定,可作为培养单个肿瘤干细胞的首选。
- 邓永键蒋强于莉娜于莉娜于莉娜王红霞丁彦青
- 关键词：肿瘤干细胞
