广东省科技计划工业攻关项目(2KM05203S)
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 相关作者：吴静徐锦堂郝念李姝燕王彦平更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金珠海市软科学研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织被引量：8
- 2004年
- 目的 :以脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织 ,并观察其形态结构 ,以寻找体外构建角膜组织最佳载体材料及方法 ,最终目的是体外构建可用于移植的角膜内皮组织。方法 :以脱水处理的猪角膜基质片为载体 ,将猫角膜内皮细胞接种于去除猪角膜内皮细胞的后弹力膜上 ,在添加了表皮生长因子和层粘连蛋白的培养液中培养 7d ,分别观察倒置显微镜下、组织学切片及扫描电镜下内皮组织的形态结构。结果 :倒置显微镜下 ,组织培养的猫角膜内皮细胞形成单层内皮组织 ,排列较规律 ,细胞间连接紧密 ;组织学观察发现 ,培养的猫角膜内皮细胞形成完整的内皮组织 ,贴附于脱水基质的后弹力膜上 ,与正常的角膜内皮组织结构相似 ;扫描电镜下 ,组织培养的猫角膜内皮细胞间连接紧密 ,细胞大小不甚一致 ,胞核清晰。结论 :以脱水猪角膜基质为载体 ,体外成功构建出猫角膜内皮组织 ,其形态结构近似于正常角膜内皮组织。
- 吴静李姝燕郝念徐锦堂赵松滨
- 关键词：内皮角膜角膜基质
- 异种角膜基质作为生物角膜载体的免疫学研究被引量：6
- 2006年
- 目的探讨异种(猪)角膜基质组织免疫原性,以评价其作为角膜重建载体材料的可行性。方法将新鲜、脱水2种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12d、90d抽取外周血,行抗CD25·FITC和抗CD4/CD8·PE双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。结果测得新鲜组、脱水组大鼠术后12d外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.53%±0.47%,2.13%±0.53%与0·57%±0.20%,0.67%±0.18%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.28,1.69±0.18)与同基因移植组(1.78%±0.36%,1.50±0.19)、阴性对照组(2.06%±0.52%,1.44±0.32)比较无显著性差异(P>0.05)。术后90d,新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.48%±0.39%,1.50%±0.46%与0·55%±0.15%,0·58%±0·11%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.51,1.36±0.59)与同基因移植组(1.32%±0·75%,1.31±0.29)、阴性对照组(1.34%±0.18%,1.44±0.42)比较,也无显著性差异(P>0.05)。结论异种(猪)角膜基质免疫原性低,是一种理想的角膜体外重建载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质免疫原性生物载体异种移植
- 猫角膜内皮中央与周围部端粒酶活性比较及其与增生潜能关系的研究
- 2009年
- 目的比较不同年龄猫角膜内皮周围部和中央部的增生潜能。方法实验所用眼球取自不同年龄猫进行分组:幼年猫组(<6个月龄)和成年猫组(>18个月龄)各7只,每只猫均取一只眼球作中央部和外周部的分离,其角膜用9.5mm直径环钻分离巩膜组织,6.0mm直径环钻分离中央部和周围部,然后完整撕取带有角膜内皮细胞的后弹力层,根据每眼角膜取材部位不同分为周围部组和中央部组。用实时荧光定量PCR检测端粒酶活性,探讨角膜内皮中央部与周围部增生潜能是否存在差异。结果经实时荧光定量PCR检测猫角膜内皮周围部组和中央部组端粒酶表达,组间比较差异有显著统计学意义(F=58.510,P=0.000),周围部组高于中央部组,中央部组仅有微量表达。成年猫组和幼年猫组比较差异无统计学意义(F=6.210,P=0.028),即端粒酶活性表达不受年龄因素影响。结论猫角膜内皮周围部具有增生潜能,且其增生能力不受年龄因素影响。
- 何文婷吴静侯光辉陈剑徐锦堂
- 关键词：角膜内皮端粒酶活性增生
- 低能量激光对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察低能量激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响。方法传代的兔角膜内皮细胞分为两组:一组为处理组,采用低能量激光照射,1次/d,连续7d;另外一组为对照组,不行激光照射。通过扫描电镜及透射电镜等检测观察兔角膜内皮细胞经激光照射前后形态学超微结构的变化。结果扫描电镜和透射电镜检测表明,与对照组相比,激光照射组内皮细胞表面可见丰富的微绒毛,细胞核较大,细胞核膜结构清晰,核仁明显且数目较多,染色质丰富,胞浆内细胞器发达。结论角膜内皮细胞经低能量激光照射后的超微结构变化表明其增殖活性提高。
- 刘存宁吴静徐锦堂陈建苏潘红卫赵松滨
- 关键词：低能量激光角膜内皮细胞超微结构增殖活性
- 角膜体外重构异种生物载体材料植入性实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的:分析测定异种(猪)角膜基质组织免疫原性,观察其角膜层间植入后与受体角膜愈合情况,以评价该材料生物相容性,并在此载体上体外重构角膜内皮组织,探讨其作为角膜重建载体材料可行性。方法:(1)将新鲜、脱水两种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12、90d对外周血进行CD25和CD4/CD8双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。(2)猪角膜基质植入新西兰白兔角膜层间,定期临床观察植片愈合情况,并取受体兔角膜进行组织学观察。(3)将猫角膜内皮细胞接种于保留后弹力层的脱水猪角膜基质上,加入培养液培养7d,组织学观察体外重构的角膜内皮组织形态结构。结果:(1)测得新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞CD4+CD25+、CD8+CD25+双阳性表达率及CD4+/CD8+比值与同基因移植组、阴性对照组比较无显著差异(P>0.05)。(2)兔眼临床观察:全部植片存活,12只术眼未见有角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生,新鲜植片在2个月左右已透明,脱水植片在6个月后透明。兔角膜组织学观察:新鲜植片4个月时与兔角膜基质相融愈合,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑于8个月后与兔角膜基质相融愈合,两组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。(3)体外重构的内皮组织形态结构与正常内皮层相似。结论:异种(猪)角膜基质免疫原性低,具有良好的生物相容性,是目前较为理想的角膜体外重构载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质生物相容性材料
- IL-1ra抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 观察白细胞介素 - 1受体拮抗剂 (IL 1ra)对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响。方法 建立大鼠同种异体穿透性角膜移植动物模型 ,受者随机分为生理盐水对照组 ,CsA治疗组 ,IL - 1ra治疗组。术后连续观察 2周 ,对各组大鼠角膜植片存活情况进行评分比较 ,评价药效。结果 IL - 1ra组与CsA组角膜植片存活时间分别为 (19.5 83± 0 .2 88)d和 (16.667± 0 .43 2 )d ,与对照组 (11.0 0 0± 0 .3 2 6)d相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组和CsA组排斥反应指数 (RI)均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组新生血管评分明显低于对照组和CsA组 (P <0 .0 1)。结论 IL - 1ra可明显抑制角膜移植术后免疫排斥反应 ,减轻炎性反应 ,减少新生血管生成 。
- 徐宁陆晓和张永强安平
- 关键词：角膜移植白细胞介素-1受体拮抗剂免疫排斥反应
- 大鼠角膜移植术后早期角膜基质细胞凋亡的初步研究
- 2002年
- 目的 研究角膜移植术后早期角膜移植物基质细胞凋亡发生的规律。方法 建立大鼠穿透性角膜移植动物模型 ,以同基因角膜移植和同种异体角膜移植为实验组 ,并以正常大鼠做正常对照。术后一周取材 ,应用光镜、电镜及细胞凋亡原位末端标记 (TUNEL法 )分别检测植片伤口附近 (<0 3mm)及植片中央区 (>0 5mm)角膜基质细胞凋亡情况。结果 对照组和实验组角膜中央区基质细胞凋亡数无明显差异 ;实验组角膜植片伤口附近基质细胞凋亡明显增加 ,两实验组相比无明显差异。结论 角膜移植术后一周基质细胞凋亡主要发生在切口附近 ,可能与伤口愈合有关。
- 张永强陆晓和徐宁柯晓云周瑾
- 关键词：术后细胞凋亡角膜移植脱噬作用角膜基质
- 角膜内皮细胞与脉络膜色素瘤细胞培养后细胞生物行为研究
- 2010年
- 目的观察角膜内皮细胞（CECs）与脉络膜黑色素瘤细胞（OCM-1）共培养后，细胞形态、中心体表达及细胞骨架形态、结构情况。方法对CECs与OCM-1Transwell体系共培养后，通过倒置相差显微镜、HE染色观察CECs生长及形态变化；通过抗中心体γ-tubulin蛋白抗体和抗α-tubulin蛋白抗体免疫荧光染色，观察内皮细胞中心体形态和数量，细胞骨架形态和结构。结果实验组（CECs与OCM-1共培养）CECs形态基本规则，较空白对照组（CECs单独培养）和阳性对照组（CECs与基质细胞共培养）细胞密度高；免疫荧光染色显示，贴近细胞核边缘有清晰的一到两个中心体，细胞显示结构形态规则的细胞骨架。结论CECs与OCM-1共培养后细胞形态、中心体、细胞骨架形态和结构未见明显异常。
- 黎颖莉吴静侯光辉李永平陈剑徐锦堂
- 关键词：角膜内皮细胞中心体
- 猫角膜内皮细胞与人脉络膜色素瘤细胞共培养后增殖能力的变化被引量：1
- 2008年
- 目的观察猫角膜内皮细胞(CEC)与人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)共培养后增殖能力及细胞周期的变化。方法将角膜内皮细胞分别与肿瘤细胞OCM-1、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化。结果与空白对照组角膜内皮细胞周期比较,肿瘤细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加,G1期细胞比例下降,肿瘤组增加幅度高于基质细胞组的。肿瘤细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近19%,增殖能力显著提高。结论与肿瘤细胞OCM-1共培养能促进角膜内皮细胞增殖。
- 黎颖莉吴静李永平何文婷徐锦堂
- 关键词：角膜内皮细胞共培养增殖
- 角膜基质培养液对离体角膜上皮重建的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:观察角膜基质培养产物对离体角膜上皮细胞存亡的影响,旨在体外构建组织工程角膜上皮中,寻找促进角膜上皮细胞增殖以及预防离体角膜上皮细胞凋亡的途径。方法:应用流式细胞仪,对基础培养1-6代的兔角膜缘上皮细胞凋亡(亚2倍体DNA)进行检测及对比分析,并同时对与角膜基质共育的角膜缘上皮细胞的凋亡情况进行了对比。结果:基础培养的第六代角膜缘上皮细胞出现明显的细胞凋亡,凋亡率为19·88%±4·69%;与角膜基质共育的角膜缘上皮细胞凋亡率则为6·84%±1·74%,明显低于无角膜基质培养下的同代细胞(P<0·01),并与基础原代细胞凋亡率(7·01%±2·23%)比较无显著差异(P>0·05)。结论:在体外重建角膜上皮组织中,角膜基质成分对离体角膜缘上皮细胞培养有减少细胞凋亡的作用。
- 黄耀忠吴静陈剑黎颖莉王彦平
- 关键词：角膜基质
