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神经再生素促大鼠背根神经节神经突起生长显微图像的分形特征: 2006年; 目的:研究分维数与神经再生素(nerve regeneration factor,NRF)剂量促离体培养新生大鼠背根神经节(dorsal root ganglions,DRGs)神经突起生长之间的关系。方法:采用计盒维数方法,计算在不同浓度NRF条件下大鼠DRGs荧光显微图像的分维数。结果:离体培养大鼠DRGs显微图像的分维数随神经突起数量和长度的变化呈现一致的变化规律。结论:分维数可以作为一个重要定量指标表征大鼠DRGs神经元生长与NRF浓度的依赖关系。; 汤乐民汤敏张琦汤欣丁斐; 关键词：神经再生素背根神经节分维数

神经生长颗粒含药血清对大鼠背根神经节生长的影响被引量：3: 2009年; 目的:研究神经生长颗粒(NGG)含药血清对体外培养新生大鼠背根神经节生长及高分子量神经丝蛋白(NF-H)和生长相关蛋白43(GAP43)表达的影响。方法:采用体外大鼠背根神经节(DRG)植块培养,通过免疫荧光细胞化学法,观察不同剂量的含药血清对DRG神经突起生长的影响;采用DRG单细胞分离培养,通过实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别观察不同剂量的含药血清对DRG细胞NF-H和GAP43基因及蛋白表达的影响。结果:免疫荧光细胞化学法提示NGG含药血清能促进DRG神经突起的生长;实时荧光定量PCR和免疫印迹法结果提示NGG含药血清能增加体外培养的DRG细胞NF-H、GAP43mRNA和蛋白的表达。结论:NGG含药血清能促进体外培养DRG神经突起的生长并促进NF-H和GAP43的表达,表明NGG对发育期感觉神经元具有一定的神经营养作用。; 龚炎培张琦陈褚丁斐; 关键词：背根神经节生长相关蛋白43

牛膝提取物神经再生素促小鼠坐骨神经再生的实验研究被引量：23: 2009年; 目的观察中药牛膝提取物神经再生素(NRF)对小鼠损伤坐骨神经的修复作用。方法ICR小鼠50只,雌雄各半,行坐骨神经夹伤术,随机分成5组:NRF高、中、低剂量组,弥可保组(阳性对照),生理盐水组(空白对照)。术后每日腹腔注射给药。采用小鼠坐骨神经功能指数(sc iatic function index,SFI)、组织形态学及电镜检查,观察NRF对损伤坐骨神经的影响。结果与空白对照组相比,NRF可显著改善小鼠的坐骨神经功能。超微结构观察表明,实验组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,而变性纤维的数目少于对照组。结论NRF能促进小鼠坐骨神经损伤后的修复及其功能的恢复。; 刘小君程琼丁斐; 关键词：牛膝神经再生素坐骨神经损伤神经再生

神经生长液含药血清对神经元生长和雪旺细胞增殖的影响: 2008年; 目的观察神经生长液含药血清对体外培养的背根神经节神经元生长和雪旺细胞增殖的影响，探讨其促损伤神经修复的机制。方法制备神经生长含药血清；采用新生大鼠背根神经节及雪旺细胞体外培养，通过形态学分析，观察神经生长液含药血清对背根神经节神经元突起生长的影响；采用MTT、BmIU标记和细胞计数法，观察神经生长液含药血清对雪旺细胞活力及其增殖的影响。结果高剂量的神经生长液含药血清，可有效地促进大鼠背根神经节神经元生长；高、低剂量的神经生长液含药血清均能显著增加大鼠雪旺细胞的活力，促进雪旺细胞增殖。结论神经生长液含药血清具有促进神经元生长、增强雪旺细胞活力、促进雪旺细胞增殖作用。; 龚炎培刘小君张琦丁斐; 关键词：神经元许旺细胞神经生长液含药血清

红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元Bax和Bcl-2表达的影响被引量：1: 2010年; 目的观察红景天苷对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元Bax和Bcl-2基因和蛋白表达的影响。方法原代培养胚鼠海马神经元,不同浓度红景天苷(60、120、240μmol/L)预孵育24 h后,加入125μmol/L Glu损伤24 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组海马神经元活力;显微镜下观察各组细胞形态;Hoechst染色观察细胞凋亡情况;RT-PCR观察细胞内Bax和Bcl-2 mRNA的表达变化;Western blot观察细胞内Bax和Bcl-2蛋白的表达变化。结果红景天苷细胞可显著改善Glu损伤后的神经元生长状态和活力,降低Glu引起的细胞凋亡率(均P<0.01);拮抗Glu损伤导致的细胞Bcl-2/Bax mRNA及其蛋白比例的下降,此作用存在剂量效应关系,至240μmol/L时作用最显著(P<0.05或<0.01)。结论红景天苷可显著拮抗Glu诱导海马神经元的凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达有关。; 陈霞张书强丁斐; 关键词：红景天苷谷氨酸海马神经元 BAX BCL-2

大鼠坐骨神经损伤修复后近端轴突再生的初步研究被引量：2: 2009年; 目的采用生长相关蛋白-43（GAP-43）对sD大鼠坐骨神经近端新生轴突进行标记，观察坐骨神经损伤修复后近端轴突再生过程。方法64只SPF级SD大鼠于右侧坐骨神经分叉以上5mm处切断坐骨神经，分别采用原位缝合以及生物可溶性甲壳质套管小间隙（2mm）缝合方法进行修复，分别于术后1、3、7及14d取材。观察神经缝合处组织大体形态；套管内坐骨神经生长状态；近端新生轴突形态，并应用图像分析方法对新生轴突数目进行定量分析。结果套管小间隙缝合组大鼠神经缝合处粘连情况较轻．免疫荧光染色显示：术后14d，新生纤维神经干形成圆锥形向前生长，形态规则均一。原位缝合组大鼠缝合处粘连较重，新生轴突于7d左右长过缝合点，坐骨神经远端新生轴突散在分布，形态不规则。免疫荧光染色图像分析结果显示：大鼠坐骨神经损伤修复后，术后3d原位缝合组新生轴突数目较套管缝合组多，差异有统计学意义（P〈0．01）；术后7d套管小间隙缝合组大鼠坐骨神经开始大量再生；术后14d左右，套管小间隙缝合组新生轴突数目显著高于原位缝合组（P〈0．05）。结论甲壳质套管具有良好的生物相容性，套管内新生轴突前沿以圆锥形向前生长，新生轴突形态较原位缝合组好，套管小间隙修复7d后新生轴突数目开始较原位缝合组多。本实验主要观察了两种术式修复后大鼠坐骨神经新生轴突的生长规律，也从组织学角度解释了生物套管小间隙套接方法的再生效果比原位缝合效果好的可能原因所在。; 张丞王艳华郁凯张培训张宏波姜保国; 关键词：生长相关蛋白坐骨神经轴突

神经生长颗粒对大鼠腓总神经横断损伤的修复作用被引量：1: 2008年; 目的研究神经生长颗粒(NGG)对大鼠腓总神经横断损伤的修复作用。方法SD大鼠50只,随机分为NGG高、中、低剂量组(剂量分别为5.2g生药/kg、2.6g生药/kg、1.3g生药/kg)、弥可保组(剂量为625μg/kg)、空白对照组。行大鼠腓总神经横断缝合术,术后每日灌胃给药。于术后2周、3周、4周行足迹实验,测定展趾功能,术后4周行电生理检测,测定复合肌动作电位和神经干动作电位检测,组织形态学分析,测定再生有髓神经纤维数、髓鞘厚度和胫前肌肌纤维截面积,观察NGG对大鼠腓总神经损伤的修复作用。结果与空白对照组相比,NGG组展趾功能、复合肌动作电位和神经干动作电位波幅及恢复率、再生有髓神经纤维计数、髓鞘厚度及胫前肌横截面积均显著增高,且呈剂量依赖的量效关系。结论NGG有利于轴突生长和髓鞘形成,可以促进大鼠损伤神经修复和神经功能的恢复。; 顾剑辉龚蕾蕾黄丽薛成斌顾晓松; 关键词：腓总神经电生理

红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用被引量：21: 2008年; 目的观察红景天苷(salidroside)对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元的保护作用。方法胚鼠原代培养海马神经元,与不同浓度的红景天苷(10、20和40mg/L)共同孵育24h,加入125μmol/L谷氨酸损伤海马神经元15min。采用MTT法检测细胞活性;生化法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;膜联蛋白-V-FITC(annexin V-FITC)和碘化吡啶(PI)双标染色以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况;激光共焦显微镜观察细胞内Ca2+的变化。结果红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性,抑制谷氨酸损伤后培养液中LDH的活力,降低谷氨酸引起的细胞凋亡率,降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2+浓度。结论红景天苷可明显拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用,其机制可能与抑制谷氨酸引起的Ca2+内流有关。; 陈霞周松林顾晓松丁斐; 关键词：红景天苷谷氨酸海马神经元细胞培养

完全去神经大鼠皮肤愈合过程中神经纤维再生和降钙素基因相关肽的变化被引量：2: 2007年; 目的:观察完全去神经对大鼠皮肤伤口愈合的影响及愈合过程中神经纤维再生和降钙素基因相关肽的变化情况,探讨神经纤维再生和降钙素基因相关肽与伤口愈合的关系。方法:实验于2006-02在北京大学人民医院中心实验室完成。雌性Wistar大鼠32只,体质量250～300g。切断所有大鼠右下肢的坐骨神经和股神经,然后分别制造1cm的圆形皮肤缺损作为去神经组,在大鼠左下肢相应部位制造同样皮肤缺损作为对照组,于伤后1,3,7,14d每个时间点随机处死8只大鼠,用3M贴膜覆盖于伤口,然后沿切口周围1cm切取伤口组织,观察伤口愈合情况,组织化学染色观察神经丝蛋白和降钙素基因相关肽的变化。结果:纳入大鼠32只,均进入结果分析,伤口无感染。①两组大鼠伤后7d的伤口面积比伤后1d均明显缩小[去神经组:(0.195±0.053),(0.687±0.053)cm2;对照组:(0.131±0.041),(0.562±0.088)cm2]。与对照组相比,去神经组伤后3d大鼠的伤口面积无明显变化[(0.366±0.031),(0.408±0.079)cm2,P>0.05]。②去神经组伤口的神经丝蛋白和降钙素基因相关肽阳性染色在伤后第1,3,7,14天均明显少于对照组。结论:完全去神经后皮肤伤口愈合缓慢,而伤口内的神经纤维再生缓慢和降钙素基因相关肽的减少与皮肤伤口愈合缓慢有着密切关系。; 褚亚明姜保国张殿英傅中国徐峰赵富强; 关键词：去神经神经丝蛋白降钙素基因相关肽

神经再生素促进大鼠坐骨神经损伤后再生被引量：1: 2006年; 目的：探讨神经再生素（NRF）对大鼠坐骨神经损伤后再生的影响。方法：SD大鼠30只，雌雄各半，随机分为3组：NRF低、高剂量组和空白对照组。分别于坐骨神经夹伤术后10、15、20d测定大鼠坐骨神经功能指数（SFI），分离出大鼠双侧坐骨神经行电生理学检测，计算神经干动作电位恢复率；各组随机选取2只大鼠，应用透射电镜观察再生坐骨神经超微结构；其余大鼠行光镜下观察脊髓腰膨大（k～k）、夹伤远端处坐骨神经、损伤侧腓肠肌组织，并测定脊髓前角运动神经元数、再生有髓神经纤维数、腓肠肌肌细胞截面积等指标。结果：术后10d各组SFI无显著差异，术后15d仅仅高剂量组SFI明显优于对照组（P〈0．01），术后20d高、低剂量组SFI均优于对照组（P〈0．01，P〈0．05）；术后20d高、低剂量组及对照组大鼠坐骨神经干动作电位的恢复率分别为（57±26）％、（44±15）％、（31±9）％，其中高剂量组与对照组相比有显著差异（P〈0．05）；高剂量NRF组的有髓神经纤维成熟度优于对照组，而变性纤维少于对照组；光镜下NRF高剂量组再生神经纤维排列致密整齐、结构均匀，腓肠肌肌细胞饱满、排列整齐，双侧脊髓前角运动神经元更接近；NRF高剂量组脊髓前角运动神经元计数、有髓神经纤维计数均显著高于对照组（P〈0．05，P〈0．01），NRF高、低剂量组腓肠肌肌细胞截面积显著高于对照组（P〈0．01，P〈0．05）。结论：NRF能促进坐骨神经再生及其功能恢复。; 周鸣鸣张俊芳丁斐; 关键词：神经再生素坐骨神经神经再生

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国家重点基础研究发展计划(2003CB515306)

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