湖南省卫生厅科研基金(B2003-016)
- 作品数：3 被引量：63H指数：3
- 相关作者：邓永文伍军陈风华李茗初方加胜更多>>
- 相关机构：中南大学首都医科大学附属北京友谊医院武警总医院更多>>
- 发文基金：湖南省卫生厅科研基金湖南省自然科学基金湖南省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的分离培养与鉴定被引量：16
- 2007年
- 目的建立人神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的体外分离、培养体系，观察其分化现象，鉴定其特异性标志物，为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法将26例脑肿瘤手术中取出的脑肿瘤细胞，以2×10^5／ml的密度接种于含生长因子的无血清培养基培养，使其中的脑肿瘤干细胞增殖，并进行单克隆形成实验及溴脱氧尿苷掺入实验；然后将增殖形成的脑肿瘤干细胞球接种于无生长因子的含血清培养基诱导分化；利用免疫荧光和免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养和组织切片中CD133和巢蛋白的表达。结果各类肿瘤标本中仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长，并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球，传代后脑肿瘤干细胞保持很强的自我更新和增殖能力；在含血清培养基中脑肿瘤干细胞贴壁分化；体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和巢蛋白，在肿瘤组织切片中存在CD133阳性细胞，其阳性表达率为（21．0±6．2）％～（38．0±7．0）％。结论人神经上皮来源脑肿瘤组织中存在少量具有自我更新和增殖能力、表达CD133和巢蛋白的脑肿瘤干细胞，并能在体外将其分离、培养和诱导分化；脑肿瘤干细胞有可能成为脑肿瘤基础研究的新平台和临床治疗的重要靶细胞。
- 方加胜邓永文李茗初陈风华王延金卢明方芳伍军杨转移周向阳王飞陈诚
- 关键词：肿瘤干细胞
- 脑肿瘤干细胞与神经上皮肿瘤病理级别的相关性被引量：17
- 2006年
- 目的:探讨脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cells,BTSCs)的分离、培养及鉴定的方法,研究BTSCs比例与人脑神经上皮肿瘤病理级别之间的相关性。方法:将人神经上皮肿瘤细胞接种于含生长因子的无血清培养基中,使其中的脑肿瘤干细胞增殖和传代,利用细胞免疫荧光及免疫组化法检测干细胞的特异性标记物Nestin和CD133的表达;采用免疫组化(SABC法)研究46例脑肿瘤及5例正常脑组织CD133的表达,并与肿瘤病理分级进行相关性分析。结果:可以从人神经上皮肿瘤病例中分离培养出BTSCs;BTSCs可以在体外增殖并传代,并且表达干细胞的特异性标记物Nestin和CD133;CD133在正常的脑组织中未见表达,在各级神经上皮肿瘤中均有表达,各级别肿瘤中的阳性细胞比例差异有显著性(P<0.01),CD133阳性细胞比例与肿瘤的恶性程度呈正相关(P<0.01)。结论:各种病理类型神经上皮肿瘤组织中均存在干细胞特征的细胞,CD133的表达与肿瘤级别呈正相关。
- 邓永文方加胜李茗初陈风华周向阳伍军周仁辉方芳陈成卢明曾飞跃
- 关键词：神经上皮肿瘤脑肿瘤干细胞CD133NESTIN病理级别
- 髓母细胞瘤中脑肿瘤干细胞的分离培养及鉴定被引量：39
- 2006年
- 背景与目的:长期以来,脑肿瘤等实体肿瘤中是否存在肿瘤干细胞一直存在争论,最近已经有报道从胶质瘤和髓母细胞瘤等脑肿瘤及其它系统实体肿瘤中成功分离出肿瘤干细胞。本研究旨在利用简化的无血清培养基和悬浮培养方法,从人髓母细胞瘤中分离培养脑肿瘤干细胞,观察其在体外的增殖、分化,鉴定其特异性标志物CD133和Nestin的表达,验证肿瘤组织切片中CD133阳性细胞的存在,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法:术中取11例患者髓母细胞瘤组织,分离成单细胞悬液,接种于含表皮生长因子、成纤维生长因子以及B27添加剂的无血清培养基中悬浮培养,以分离其中的脑肿瘤干细胞;对其增殖形成的脑肿瘤干细胞球连续传代培养;并进行单克隆形成实验,以确定原代肿瘤组织中肿瘤干细胞的百分率,观察脑肿瘤干细胞球的形成过程。然后,将脑肿瘤干细胞球接种于含血清培养基,观察脑肿瘤干细胞的分化现象。最后,利用免疫荧光法检测脑肿瘤干细胞特异性标志物CD133和Nestin在脑肿瘤干细胞球中的表达;利用免疫组化法检测组织切片中CD133阳性细胞的分布,并计算CD133阳性细胞百分率。结果:本组11例髓母细胞瘤中均仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长、增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力。单克隆形成实验表明原代肿瘤细胞中具有单克隆形成能力的肿瘤干细胞百分率为(31.18±6.18)%。在含血清培养基中脑肿瘤干细胞发生贴壁分化,产生具有多种细胞形态的分化细胞。脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和Nestin;肿瘤组织切片中CD133阳性细胞呈巢状或散在分布,占全部肿瘤细胞的(33.06±8.57)%。结论:人髓母细胞瘤组织中存在一定量的具有自我更新和增殖能力、表达CD133和Nestin�
- 李茗初邓永文伍军陈风华刘劲芳方加胜
- 关键词：髓母细胞瘤肿瘤干细胞细胞分化CD133NESTIN
