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温州市科技计划项目(Y20060081)
作品数:
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陈韶
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尖锐湿疣患者血清及宫颈分泌物HPV6bE7抗体检测方法的建立及流行病学意义
被引量:2
2010年
目的建立尖锐湿疣(CA)患者血清和宫颈分泌物人乳头瘤病毒(HPV)6b型E7特异性抗体检测方法。方法利用PCR扩增HPV6bE7全长基因,构建重组原核表达质粒pET32a(+)/HPV6bE7,原核表达产物采用SDS—PAGE和Western blot进行鉴定。进一步经镍螯合亲和层析法(Ni—NTAAgarose)纯化后作为包被抗原,以间接ELISA方法分别对56例CA患者、81名健康对照者的血清和宫颈分泌物标本巾的特异性抗体进行检测,另取43例宫颈癌患者的血清标本作为对照;同时用PCR方法对56例CA组织标本进行HPV6bDNA的检测。结果从CA组织标本中扩增的HPV6bE7全长基因与标准序列(GenBank登录号:NC001355)同源性为99.5%。HPV6bE7融合蛋白在原核表达系统中得到了较高效的表达(40μg/ml)。经间接ELISA检测,CA组血清特异性IgG抗体水平明显高于宫颈癌组和健康对照组(P〈O.05),吸光度(A)均值分别为1.82±0.48、1.36±0.39和1.39±0.27。CA组宫颈分泌物特异性slgA抗体水平亦显著高于健康对照组(P〈0.05),A值分别为O.63±0.26和0.53±0.06。经PCR检测,CA患者组织HPV6bE7DNA阳性率为78.6%(44/56)。与PCR检测结果比较,HPV6bE7特异性IgG和sIgA抗体用于检测CA患者HPV6b感染的敏感性分别为68.2%(30/44)、54.6%(24/44),特异性均为100%(12/12)。结论CA患者血清和宫颈分泌物HPV6bE7特异性抗体,用于诊断HPV6b感染具有一定的敏感性和较高的特异性,可用于HPV6b感染的流行病学调查。
钟晓芝
陈韶
朱珊丽
薛向阳
李文妹
王乐丹
张丽芳
关键词:
尖锐湿疣
人乳头瘤病毒
血清
宫颈分泌物
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