国家自然科学基金(30972742)
- 作品数：8 被引量：54H指数：5
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- 改良组织块法培养细针活检滑膜组织成纤维样滑膜细胞被引量：14
- 2010年
- 【目的】探讨体外分离培养细针活检滑膜组织成纤维样滑膜细胞(FLS)的方法。【方法】滑膜组织来自接受盲式细针滑膜活检术的活动期类风湿关节炎患者,分别采用消化酶培养法、组织块培养法和改良组织块培养法分离培养FLS。采用台盼蓝染色进行细胞计数及活性鉴定,并应用倒置相差显微镜、透射电镜、免疫细胞化学染色、流式细胞术对第3～4代FLS进行鉴定。【结果】3种原代分离培养的方法均可成功培养出FLS。台盼蓝染色示FLS细胞计数约(8.30±1.65)×105/瓶,活细胞百分率>95%。传代可使FLS达到形态学上的纯化要求,倒置相差显微镜、透射电镜观察均符合FLS的形态结构特征,免疫细胞化学染色示Vimentin阳性、CD68阴性、CK阳性,流式细胞术检测示CD55+细胞占(95.34±2.47)%。改良组织块法培养FLS成功率较高,细胞游出时间较早,所需传代时间较短。【结论】改良组织块法特别适合于细针滑膜活检标本FLS的培养,第3～4代细胞的数目、活性及纯度符合进一步实验的要求。
- 李婷戴冽杨斌郑东辉朱浪静莫颖倩张白玉
- 关键词：成纤维样滑膜细胞细胞培养细针活检
- 高频超声与病理学检测评价类风湿关节炎膝滑膜炎的相关性研究被引量：14
- 2012年
- 目的评价高频超声检测类风湿关节炎（RA）膝滑膜炎的效能。方法95例活动期RA患者行高频彩色多普勒超声检测膝滑膜炎声像，其中51例评价膝病理滑膜炎指标，应用sDearman秩相关分析及受试者工作特征曲线（Roc）等分析临床、病理与高频超声滑膜炎指标的相关性。结果超声滑膜厚度、彩色多普勒滑膜血流信号分别与病理滑膜炎积分、衬里层增生程度、衬里下层炎症浸润程度呈正相关（滑膜厚度：r值分别为0．438，0．424，0．368，血流信号：r值分别为0．357，0．377，0．347；P均〈0．05）。比较病理轻、重度滑膜炎患者的临床滑膜炎指标，差异无统计学意义（均P〉0．05），而重度滑膜炎患者超声滑膜厚度[4．5（2．3-5．0）mm]及血流信号[1．0（1．0=2．0）]显著高于轻度滑膜炎患者[分别为2．4（2．0-2．8）mm，1．0（0-1．0），P=-0．001，0．036]。超声滑膜厚度≥3．9mm时诊断重度滑膜炎的特异性为96．7％，敏感性为61．9％。结论RA关节高频超声滑膜炎声像与滑膜炎病理表现相关并有助于判断病理滑膜炎的严重程度。
- 莫颖倩戴冽郑东辉钟文景李谦华陈乐锋朱浪静张白玉
- 关键词：关节炎类风湿病理学滑膜炎
- 配体依赖过氧化物酶体增殖活化受体γ通路在类风湿关节炎发病中的作用
- 2012年
- 过氧化物酶体增殖活化受体（pemxisome proliferator-ac-tivated receptors，PPAR）γ是配体依赖核转录因子超家族成员，是调控细胞及组织代谢的关键因子，参与脂肪细胞形成、分化，维持脂质代谢、血糖平衡，并参与调控细胞增生、分化、凋亡和炎症反应，在炎症和免疫反应中发挥重要作用，与肥胖、胰岛素抵抗、高血压、2型糖尿病、动脉粥样硬化、炎症性疾病等密切相关。近年研究表明配体依赖PPARγ通路亦参与调控类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）滑膜炎及关节骨破坏这两个关键的致病环节，本文对此进行综述。
- 韦秀宁莫颖倩戴冽
- 关键词：类风湿关节炎配体通路核转录因子发病细胞形成
- 海藻多糖对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响及机制研究被引量：7
- 2011年
- 目的探讨海藻多糖对体外培养的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synovialcytes,FLS)凋亡的影响及机制。方法采用改良组织块培养法体外培养RA-FLS。分别采用CCK-8比色法、Hoechst 33258染色法、TUNEL染色法及Western blot检测不同浓度海藻多糖(0、15、20、25mg/mL)干预不同时间(0、3、4、5天)后对RA-FLS增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果与0mg/mL海藻多糖组同期比较,15、20、25mg/mL浓度组干预3、4、5天后均可抑制RA-FLS增殖,促进其凋亡(P<0·01),且具有时间和剂量依赖性;15、20、25mg/mL海藻多糖干预4天可上调RA-FLSBax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,促进Caspase-3活化裂解(P<0·05,P<0·01),且呈剂量依赖性。结论海藻多糖在体外呈剂量和时间依赖性抑制RA-FLS增殖,诱导其凋亡,其凋亡机制可能是通过上调细胞内Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白表达影响线粒体通路,从而促进Caspase-3活化裂解,导致RA-FLS凋亡。
- 戴冽李婷朱浪静闻克威高璇郑东辉莫颖倩张白玉
- 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞海藻多糖凋亡
- 类风湿关节炎患者滑膜组织中TRAF6的表达变化及意义
- 目的:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的病理过程包括滑膜炎和关节软骨/骨质破坏两个基本环节。肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumeinecrosis factorreceptor-associ...
- 朱浪静戴冽郑东辉莫颖倩韦秀宁欧阳霞邹婵娟张白玉
- 文献传递
- 322例次膝关节Parker-Pearson针滑膜活检临床分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨Parker-Pearson针滑膜活检的应用价值及影响其活检效果的因素。方法 295例关节病或系统性疾病伴膝关节病变患者行膝关节Parker-Pearson针滑膜活检,光镜下测量合格滑膜总面积并结合H&E染色评估Krenn's滑膜炎积分。有效活检定义为活检到合格滑膜。高效活检定义为至少3块合格滑膜,合格滑膜总面积≥2.5mm2。结果共行322例次滑膜活检,有效活检率为85%,高效活检率为63%,有效活检的合格滑膜总面积中位数为5.3mm2,合格滑膜中位数为5块。25例次重复滑膜活检的有效活检率为84%。5例滑膜见尿酸盐结晶,1例滑膜见草酸钙结晶,1例滑膜病理见结核样结节及坏死。病理呈高度滑膜炎(n=97)的患者高效活检率为89%,与低度滑膜炎者的活检率67%间有统计学差异(n=176,67%,χ2=15.469,P<0.01)。受检膝关节肿胀伴压痛的患者有效活检率为89%,与无肿胀有压痛患者间的差异有统计学意义(χ2=5.458,P<0.05),或与无肿胀、无压痛患者间的差异有统计学意义(χ2=8.906,P<0.01)。结论膝关节Parker-Pearson针滑膜活检获取的合格滑膜可满足临床滑膜病理学检查及科研需要,其中病理滑膜炎程度及受检关节肿胀程度是影响活检效果的主要因素。
- 郑东辉莫颖倩马剑达邹婵娟吴绍惠谢楚龙陈乐锋戴冽
- 关键词：活组织检查细针滑膜关节炎类风湿
- 罗格列酮通过p-ERK通路抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞表达核因子κB受体激活配体被引量：5
- 2011年
- 目的探讨罗格列酮对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞（RA—FLS）核因子-κB受体激活配体（RANKL）和骨保护素表达的影响及信号传导通路。方法原代培养RA—FLS，不同浓度罗格列酮（0、5、10、15、20μmol／L）干预3d，检测罗格列酮对RA—FLS增殖及RANKL、骨保护素mRNA和蛋白表达的影响，并检测0、15、20μmol／L罗格列酮对RA—FLSp-ERK．p-p38、p-JNK蛋白表达的影响。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Bonferroni法。结果5、10、15、20μmol/l罗格列酮干预可抑制RANKLmRNA（0．503±0．005、0．438±0．031、0．161±0．042、0．050±0．018）和蛋白（1．72±0．09、1．58±0．05、1．46±0．11、1．22±0．14）表达（F=200．820，肚13．602，均P〈0．01），上调骨保护素mRNA（2．8±0．5、7．0±3．2、8．4±2．3、25．7±5．1）和蛋白（1．21±0．11、1．52±0．16、1．63±0．11、1．91±0．03）表达（F=26．531，F=24．872，均P〈0．01），RANKL／骨保护素mRNA和蛋白比率降低（F=453．425，P〈0．01；F=4．173，P〈0．05），且呈剂量依赖性；15、20μmol／L罗格列酮明显抑制p-ERK蛋白表达（0．55±0．06、0．45±0．06，F=6．991，P〈0．05）。结论罗格列酮可能通过p-ERK信号途径抑制RA—FLS表达RANKL并上调骨保护素的表达。
- 韦秀宁戴冽朱浪静莫颖倩郑东辉张白玉
- 关键词：类风湿成纤维细胞骨保护素罗格列酮
- 类风湿关节炎患者滑膜TRAF6表达与血清骨代谢标志物的相关性被引量：11
- 2014年
- 目的了解类风湿关节炎（RA）患者滑膜肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）表达及其与血清骨代谢标志物的相关性。方法2010年4月至2012年12月在中山大学孙逸仙纪念医院采用电化学发光法检测51例确诊RA患者和102例健康对照者的血清骨代谢标志物I型前胶原氨基端前肽（PINP）、骨钙素降解产物（N—MID．OC）和I型胶原C末端肽（CTX—I）的水平并分析其与临床疾病活动指标的相关性。免疫组化染色检测30例活动期RA患者滑膜TRAF6表达，评估TRAF6＋细胞数并分析其与骨代谢标志物之间的相关性。结果RA患者血清CTX—I水平明显高于健康对照组[（0．53±0．33）×10^-3比（0．33±0．16）×10^-3 g／L，P〈0．01]。RA患者血清PINP和N—MID．OC与晨僵时间、健康评估问卷HAQ评分、疼痛VAS评分呈负相关（P〈0．05）。RA患者血清PINP与双手平均握力呈正相关（r=0．296，P〈0．05）。RA滑膜衬里层和衬里下层均见TRAF6表达，且TRAF6表达在重度滑膜炎组高于轻度滑膜炎组。RA患者滑膜组织TRAF6表达与PINP和N—MID．OC呈正相关（r=0．381，0．345，P〈0．05）。结论RA患者存在骨吸收增加、骨代谢失衡，其滑膜TRAF6表达增加可能与RA代偿性骨形成增加有关，TRAF6可能通过介导滑膜炎症参与了RA的骨代谢失衡。
- 朱浪静欧阳霞郑东辉马剑达陈乐锋韦秀宁莫颖倩戴冽
- 关键词：类风湿关节炎滑膜TRAF6骨代谢标志物
- 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞通过高表达RANKL促进破骨细胞分化及活化被引量：9
- 2011年
- 目的探讨类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)对破骨细胞(Oc)分化和活化的作用及机制。方法活动期RA滑膜体外分离培养FLS,以骨关节炎(OA)-FLS为对照,分别与健康人外周血单核细胞(MNC)共培养后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定Oc并计数、甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况。细胞免疫荧光染色检测FLS RANKL表达,Real-time PCR及W estern blot检测RANKL和OPG mRNA、蛋白表达。结果 RA-FLS与MNC共培养7 d时TRAP+且细胞核≥3个的Oc很少,14 d时见较多的Oc,21 d甲苯胺蓝染色示清晰的骨吸收陷窝,而OA-FLS与MNC共培养后未见Oc,也未见骨吸收陷窝。细胞免疫荧光染色示RA-FLS较OA-FLS高表达RANKL(P<0.05)。RA-FLS RANKL mRNA和蛋白表达较OA-FLS明显增高,而OPG mRNA和蛋白表达则明显降低,RANKL/OPG mRNA和蛋白比率较OA-FLS明显增高(均P<0.05)。结论 RA-FLS可能通过高表达RANKL,促进外周血MNC向Oc分化,并促进Oc的骨吸收功能。
- 郑东辉戴冽韦秀宁朱浪静莫颖倩张白玉邹婵娟
- 关键词：滑膜破骨细胞骨保护素
