山东省自然科学基金(Z2000D03)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：山东省农业科学院莱阳农学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
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- 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）SD2株ORF5/ORF6双基因真核表达载体在哺乳动物细胞中的表达
- 为了实现猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的 ORF5和 ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥 E 蛋白的病毒中和优势和 M 蛋白的细胞免疫优势,将构建成功的 pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法...
- 李俊符芳袁小远崔尚金童光志温建新王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒CHO
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6双基因真核表达载体在哺乳动物细胞中的表达被引量：4
- 2006年
- 为了实现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势,将构建成功的pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法转入稳定表达的细胞CHO,经G418加压筛选获得具稳定表达的细胞株。以RT-PCR、SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。结果表明:RT-PCR检测到两种目的基因的转录;SDS-PAGE和West-ern blot检测到同时表达的两种目的蛋白;间接免疫荧光检测到目的蛋白得到表达。
- 李俊符芳袁小远崔尚金童光志温建新王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒CHO
- 浅谈仔猪先天性震颤病的病因及防治
- 仔猪先天性震颤病自发现以来,普遍存在于世界各地,其死亡率高并具有一定的感染和遗传特性.近年来该病在许多地区猪场的发病率有所增加,给养猪生产造成了较大的经济损失.本文分别从流行特点、分类、病因及诊断防控要点等方面进行总结,...
- 招丽婵张继亮王东东苏润环邓雨修宋延华
- 关键词：仔猪先天性震颤
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定及毒力变异机制初探
- 从“无名高热综合征”病猪体内分离到3株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Nsp2缺失)变异株,其中 SD-JN 株 TCID为10/0．1mL。对其部分 Nsp2基因和 ORF5基因进行了序列测序和分析,发现3 株病毒仍属...
- 李俊王金宝时建立孙翠兰温建新徐绍建张秀美
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
- 根据哺乳动物细胞真核表达载体 pIRES MCSA MCSB 多克隆位点的序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF50RF6基因阅读框架,并在基因起始密码子前面加入 Kozak 序列,分别设计了针对 ORF50RF6 的引物...
- 李俊王金宝袁小远崔尚金李曦符芳周艳君
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 文献传递
- PRRSV SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
- 2006年
- 以PRRSV细胞培养物为模板,经RT-PCR扩增得到ORF5/ORF6基因,该产物和pIRES真核表达载体分别经双酶切,连接构建pIRES-ORF5/ORF6。经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了真核表达载体pIRES-ORF5/ORF6。测得的ORF5/ORF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99%和100%,属北美洲型。
- 李俊王金宝袁小远崔尚金李曦符芳周艳君
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征
- PRRS V SD-1株ORF7基因的克隆、测序及原核表达载体的构建被引量：2
- 2006年
- 参照PRRSV ATCC VR2332株基因序列设计1对引物P1、P2,经RT-PCR扩增出PRRSV SD-1株ORF7基因,经与PMD18-T Vector连接后筛选出阳性克隆株测序。把PRRSV SD-1株ORF7 cDNA亚克隆到PQE上构建PQE-N原核重组表达载体。结果表明,PRRSV SD-1株ORF7核甘酸序列与PRRSV ATCC VR2332株ORF7核甘酸序列完全一致,与欧洲株LV符合率为58%。成功构建原核表达载体PQE-N,为N蛋白的研究和制备诊断性抗原奠定了基础。
- 李俊王金宝任慧英朱新产袁小远周顺张祯涛
- 关键词：开放阅读框原核表达载体
