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国家自然科学基金(31171388)

作品数:6 被引量:14H指数:3
相关作者:黄慧哲刘菁袁志梁森高蕊更多>>
相关机构:重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院国家人口计生委科学技术研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金重庆市杰出青年科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学建筑科学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇建筑科学

主题

  • 1篇凋亡
  • 1篇多聚
  • 1篇异位表达
  • 1篇软骨
  • 1篇软骨发育
  • 1篇色素沉着
  • 1篇室间隔
  • 1篇室间隔缺损
  • 1篇突变
  • 1篇缺损
  • 1篇重症
  • 1篇重症监护
  • 1篇重症监护室
  • 1篇胃癌
  • 1篇胃癌细胞
  • 1篇胃癌细胞凋亡
  • 1篇稳定性
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞凋亡
  • 1篇基因

机构

  • 5篇重庆医科大学
  • 2篇重庆医科大学...
  • 1篇国家人口计生...

作者

  • 4篇黄慧哲
  • 2篇刘菁
  • 1篇马旭
  • 1篇程志
  • 1篇袁喆
  • 1篇陈雪梅
  • 1篇袁巧
  • 1篇赵亮
  • 1篇杜渝平
  • 1篇高蕊
  • 1篇王彬彬
  • 1篇梁森
  • 1篇袁志

传媒

  • 2篇第三军医大学...
  • 2篇重庆医科大学...
  • 1篇医学分子生物...
  • 1篇Protei...

年份

  • 1篇2019
  • 1篇2017
  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
  • 1篇2012
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
CRISPR/Cas9技术敲除faf1基因对斑马鱼软骨及肌节发育的影响被引量:4
2017年
目的利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼faf1基因,并研究faf1基因对斑马鱼发育的影响。方法针对斑马鱼faf1基因设计并制备gRNA,通过显微注射技术将gRNA与Cas9 mRNA混合注入斑马鱼单细胞胚胎中,通过酶切和基因测序技术筛选出发生突变的F0代斑马鱼,将其与野生型斑马鱼外交得到F1代杂合体斑马鱼,检测其可遗传突变类型,并用显微镜观察、记录每一代斑马鱼表型。结果成功制备了faf1 gRNA和Cas9 mRNA。位于faf1 6号外显子的gRNA(gRNA6)能使faf1基因发生移码突变。筛选出可遗传突变类型(mutant 1,MU1)并观察到该杂合突变型斑马鱼有体细胞色素沉积延迟,受精后第4天开始尾部肌节出现"结节样"表型以及头颅缩小、舌骨小角角度增大等颅面软骨畸形的变化,并于受精后8~9 d死亡。结论利用CRISPR/Cas9敲除该基因产生了新的表型,即色素沉积延迟及尾部肌节部位出现"结节样"变化。
刘菁梁森袁志黄慧哲
关键词:斑马鱼软骨发育
重症监护室目标监测感染控制范围的建立及应用被引量:3
2014年
目的:建立重症监护室(intensive care unit,ICU)的月医院感染发病率的控制范围,为医院感染的控制提供一种科学的方法。方法:依据统计学医学参考值范围的原理:正态分布下曲线面积的规律,数值落在(-∞,x+1.64s)的区域概率为95%,若有数据超出此值,则需要提醒临床科室注意;数值落在(-∞,x+2.33s)的区域概率为99%,若有数据超出此值,则表明质量失控。分别统计本院2011年1月至2012年6月呼吸ICU、神内ICU、中心ICU、神外ICU、心胸外ICU目标监测的资料,确立各ICU月医院感染发病率的预警限和控制限,于2012年7月至今对超出预警限的临床科室进行反馈,对超出控制限的临床科室进行反馈干预。结果:确立了各ICU月医院感染发病率的预警限和控制限,其中神外ICU月医院感染发病率的控制限是22.39%,2012年8月神外ICU的医院感染发病率超出控制限,分析反馈干预后,该ICU 9月至11月的医院感染发病率下降。结论:本文已确立ICU的月医院感染发病率的控制范围,可以此来判断ICU的医院感染的流行趋势,及时预警,作为各ICU比较的衡量标准,保证持续改进的质量控制过程,是一种值得推荐的科学方法。
袁巧陈雪梅袁喆杜渝平黄慧哲
关键词:重症监护室
室间隔缺损患者ISL1基因突变的研究
2013年
目的在中国室间隔缺损患者中寻找ISL1基因致病突变,探讨其与室间隔缺损发生之间的关系。方法采用PCR直接测序技术对195例室间隔缺损患者ISL1基因的主要编码区以及外显子一内含子交界区进行基因突变分析。结果在患者中发现3个已知的单核苷酸多态性位点rs2288468、rs2303750和rs2303751.没有发现新的基因突变。3个单核苷酸多态性位点的基因型频率和等位基因频率在室间隔缺损患者和对照组之间无统计学差异。结论1SL1基因突变在室间隔缺损的发病机制中可能不占主导地位。
程志王彬彬马旭黄慧哲
关键词:室间隔缺损基因突变
Smurf1通过抑制LKB1的多聚泛素化而调控其蛋白稳定性被引量:1
2019年
目的:为了探寻肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的上游调控分子,并研究其对LKB1的影响。方法:首先,利用UbiBrowser数据库预测LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1和LKB1相关过表达质粒,并转染HEK293T细胞,通过Western blot检测LKB1蛋白质表达的变化。最后,运用荧光定量PCR(qPCR)、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)探索Smurf1调控LKB1可能的分子机制。结果:①成功构建LKB1和Smurf1相关过表达质粒。②在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的野生型Smurf1时其对应的LKB1蛋白相对表达量分别为0.0262±0.0007、0.0727±0.0003、0.1301±0.0013、0.4315±0.0010。经单因素方差分析,其结果为F=79636.433,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。③在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的突变型Smurf1时其对应的LKB1的蛋白相对表达量分别为0.0180±0.0001、0.0530±0.0004、0.1250±0.0010、0.2004±0.0017。经单因素方差分析,其结果为F=12887.993,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。④以GAPDH为内参,未过表达Smurf1组和过表达Smurf1组中,LKB1的相对mRNA表达水平分别为1.0851±0.4125、2.3982±1.7669。经独立样本t检验统计分析,P=0.257。⑤以β-actin为内参,未经Smurf1处理组、野生型Smurf1(WT)处理组、突变型Smurf1(C699A)处理组中LKB1的相对泛素化水平分别为1.8238±0.0278、0.0881±0.0051、0.2127±0.0062。经单因素方差分析,其结果为F=6721.953,P=0.000。与未经Smurf1处理组相比,进一步采用LSD-t法分析,野生型Smurf1组和突变型Smurf1组各组P值分别为0.000和0.000。结论:这些结果表明Smurf1通过降低LKB1的多聚泛素化从而参与其蛋白稳定性的调节。
袁志马林强程志梁森黄慧哲
关键词:LKB1稳定性
Bisindoylmaleimide I enhances osteogenic differentiation被引量:2
2012年
The Wnt/β-catenin and bone morphogenetic proteins(BMPs)pathways play important roles in controlling osteogenesis.Using a cell-based kinase inhibitor screening assay,we identified the compound bisin-doylmaleimide I(BIM)as a potent agonist of the cyto-solicβ-catenin accumulation in preosteoblast cells.Through suppressing glycogen synthase kinase 3βenzyme activities,BIM upregulatedβ-catenin respon-sive transcription and extended duration of BMP initi-ated signal.Functional analysis revealed that BIM promoted osteoblast differentiation and bone formation.The treatment of human mesenchymal stem cells with BIM promoted osteoblastogenesis.Our findings pro-vide a new strategy to regulate mesenchymal stem cell differentiation by integration of the cellular signaling pathways.
Fangfang ZhouHuizhe HuangLong Zhang
关键词:OSTEOGENESIS
异位表达FOXO4对胃癌细胞凋亡的影响被引量:4
2015年
目的应用p CMV5-Flag和p LL3.7真核表达载体构建Forkhead box O4(FOXO4)基因的过表达质粒和干扰RNA表达质粒,研究其对胃癌细胞凋亡的影响。方法将FOXO4基因的开放阅读框克隆入p CMV5-Flag载体,将靶向FOXO4基因的siRNA克隆入p LL3.7载体,获得FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。将获得的质粒及对照质粒通过脂质体转染MKN45和SGC7901胃癌细胞,Western blot检测其对细胞中FOXO4蛋白的表达和沉默效率。FCM检测其对细胞凋亡的影响,Western blot检测Cleaved Caspase-3的表达以及应用Real-time PCR检测其对促凋亡转录因子BCL-6的表达的变化。结果成功构建FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。Western blot结果表明,Flag-FOXO4可以明显增加细胞FOXO4的表达,FOXO4-shRNA明显抑制细胞FOXO4的表达。FCM结果显示,Flag-FOXO4组与Control组相比较,MKN45细胞和SGC7901细胞凋亡显著增加了16.54%(P<0.001)和26.23%(P<0.001)。Western blot结果显示Cleaved Caspase-3表达与FCM结果一致。Real-time PCR结果表明Flag-FOXO4组细胞FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达显著增加(P<0.01),FOXO4-shRNA明显抑制了细胞BCL-6的表达(P<0.01)。结论 FOXO4的过表达可能通过增加FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达促进了胃癌细胞的凋亡。FOXO4的沉默降低了BCL-6的表达。
赵亮高蕊刘菁黄慧哲
关键词:过表达RNA干扰细胞凋亡胃癌细胞
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