广东省医学科学技术研究基金(B2009234)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：徐志霞徐八一黄建云王爱国夏涛更多>>
- 相关机构：华中科技大学汕头市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氟化钠诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡及其机制研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究氟化钠(NaF)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的损伤及致凋亡作用,并初步探讨NaF致神经毒性的作用机制。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞(1×107/ml),先加入0(对照)、20、40、80 mg/L的NaF溶液对SH-SY5Y细胞染毒24 h;再选择40 mg/L的NaF溶液与380.40 mg/L的乙二醇双(2-氨基乙醚)四乙酸(EGTA)溶液或38.23 mg/L的胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)溶液(提前30 min加入)联合染毒24 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和胞内钙离子([Ca2+]i)水平,并用激光共聚焦(laser scanningconfocal microscopy,LSCM)技术,从单个细胞水平检测NaF对胞内游离Ca2+瞬间动态变化的影响。结果与对照组比较,40、80 mg/L NaF染毒组SH-SY5Y细胞的存活率较低,凋亡率较高,差异均有统计学意义(P<0.05);各NaF染毒组SH-SY5Y细胞的[Ca2+]i水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。且随着NaF染毒浓度的升高,SH-SY5Y细胞的存活率呈下降趋势,凋亡率和[Ca2+]i水平均呈上升趋势。LSCM连续扫描显示,40和80 mg/L NaF染毒组SH-SY5Y细胞[Ca2+]i的FI值达到峰值的时间分别为6 000～7 000 s和1 000～2 000 s,20 mg/L NaF染毒组未见明显的峰值;且NaF的浓度越高,[Ca2+]i达到峰值的时间越短。析因分析表明,胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)与NaF对SH-SY5Y细胞凋亡和[Ca2+]i升高存在交互作用(F值分别为10.69、366.14,均P<0.05),BAPTA-AM可拮抗NaF对SH-SY5Y细胞的损伤作用;胞外钙离子螯合剂乙二醇双四乙酸(EGTA)与NaF对SH-SY5Y细胞凋亡和[Ca2+]i升高无交互作用(F值分别为0.02、0.03,均P>0.05)。结论 NaF对SH-SY5Y细胞的升钙作用可能参与了NaF的致细胞损伤和诱导凋亡作用,[Ca2+]i的升高可能与胞内钙库的释放有关。
- 徐八一王普生黄建云徐志霞夏涛王爱国
- 关键词：氟化钠细胞凋亡钙离子
