国家自然科学基金(30972886)
- 作品数：7 被引量：24H指数：2
- 相关作者：李洋何平梁杰雄伍冀湘于玮更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院首都医科大学北京航天总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 建立结肠癌SW480细胞原位移植瘤模型的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的建立接近于临床表现的结肠癌动物模型，以便了解结肠癌生长及形态学变化。方法选SPF级Balb／c品系裸鼠，皮下接种SW480细胞，4周后取出瘤体，种植于裸鼠结肠系膜根部，建立结肠癌外科原位手术移植动物模型，4周后取出结肠原位肿瘤，应用病理学方法对结肠癌原位移植动物模型进行评价和鉴定。结果5只裸鼠皮下接种SW480细胞后4周，皮下成瘤3只；10只裸鼠结肠原位移植肿瘤，8只结肠成瘤，显微镜下可见肿瘤浸润肠壁。结论实验成功建立了结肠癌SW480细胞动物结肠原位移植瘤模型，为结肠癌相关实验提供临床研究动物模型。
- 李洋于玮何平许英晨陶莹吴涛戴洁伍冀湘
- 关键词：结肠肿瘤SW480细胞原位移植模型裸鼠
- 70岁以上老年患者腹腔镜结直肠癌根治术安全性分析被引量：16
- 2019年
- 目的分析腹腔镜结直肠癌根治术对≥70岁老龄患者的安全性和效果。方法回顾性分析2014年1月至2017年1月首都医科大学附属北京安贞医院行结直肠癌根治术患者资料。根据患者年龄将患者分为≥70岁组(68例)和<70岁组(84例),分析两组患者术前临床资料;术者严格按照结直肠癌根治术的标准行淋巴结清扫,遵循无瘤原则。对比分析两组患者的手术情况、病理学检查结果、短期疗效指标及随访情况。采用SPSS 20.0进行统计学分析,正态分布的计量资料以Mean±SD表示,组间比较采用t检验。计数资料比较采用χ^2检验或Fisher确切概率法。结果两组患者均顺利完成手术,≥70岁组有2例由于腹腔广泛粘连中转为开腹,无围手术期死亡的病历。≥70岁组合并高血压及冠心病与<70岁组合并高血压及冠心病发病率分别为38.2%(26/68)与14.3%(12/84),差异有统计学意义(P<0.05);两组患者术中出血量、手术时间差异无统计学意义(P均>0.05);≥70岁组与<70岁组术后心血管事件发生率分别为26.4%(18/68)与7.14%(6/84),差异有统计学意义(χ^2=6.428,P=0.010);但术后其他并发症、病死率及术后住院时间等两组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论严格掌握适应证、重视围手术期处理,≥70岁结直肠癌患者行腹腔镜根治术是安全可行的。
- 陶振洲李洋曹广梁杰雄伍冀湘
- 关键词：结直肠癌腹腔镜老年人
- DcR3-RNAi-SW480结肠癌稳转细胞模型的建立及方法优化被引量：4
- 2012年
- 目的建立靶向沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因表达的DcR3-RNAi-SW480稳转细胞系,并对其条件及方法进行优化。方法构建靶向沉默DcR3基因的siRNA质粒表达载体,转染SW480细胞,并以G418及流式细胞仪筛选稳转细胞。实验分为3组:DcR3-RNAi稳转组、阴性对照组、空白对照组。蛋白质印记法(Western-blot)检测DcR3蛋白沉默情况。分别应用琼脂糖凝胶电泳、甲基噻唑基四唑(MTT)比色法、流式细胞术等方法对脂质体与质粒的比例、G418的筛选浓度、筛选的最佳方式等进行优化。结果 DcR3-RNAi稳转细胞组DcR3表达水平较对照组明显降低;在本实验室条件下,脂质体(μl)与DcR3-siRNA质粒(μg)最佳比例为3.5∶1;G418筛选浓度为800mg/L;G418联合流式细胞仪双筛的稳转细胞比例明显高于仅用G418单筛。结论成功建立特异性沉默DcR3基因表达的稳转DcR3-RNAi-SW480细胞系;G418联合流式是筛选稳转细胞较高效的方法;对转染及筛选的条件及方法进行优化,可提高转染与筛选效率。
- 于玮何平陶莹李洋李晶吴涛伍冀湘戴洁
- 关键词：结肠肿瘤TNF相关凋亡诱导配体RNA干扰
- 诱骗受体3的RNA干扰对结肠癌树突状细胞瘤苗抑瘤效应的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨诱骗受体3的RNA干扰（DcR3-RNAi）对结肠癌树突状细胞（DC）瘤苗抑瘤效应的影响。方法体外培养结肠癌患者外周血DC；应用DcR3-RNAi转染结肠癌SW480细胞系；分别用正常SW480和转染DcR3-RNAi的SW480（DcR3-RNAi-SW480）诱导DC制备DC瘤苗。采用抗癌药物敏感试验方法进行DC瘤苗对SW480细胞的细胞抑制实验，将SW480（SW480组）和DcR3-RNAi-SW480（DcR3抑制组）诱导的DC瘤苗分别致敏T淋巴细胞，获得细胞毒性T淋巴细胞；以常规培养的T淋巴细胞作为对照（T组）；将各组T细胞分别与SW480细胞共培养48h，测定T细胞对SW480细胞的杀伤率。结果DcR3抑制组、SW480组、T组间杀伤率比较[（43．3±1．0）％、（38．7±1．1）％比（21．2±2．2）％]，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论应用DcR3-RNAi抑制结肠癌DcR3表达可以提高DC瘤苗的抑瘤效应。
- 何平胜利余和芬梁杰雄李洋张钊
- 关键词：结肠癌诱骗受体3RNA干扰
- 特异性小干扰RNA抑制诱骗受体3在结肠癌SW480细胞表达的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因在人结肠癌SW480细胞系中的抑制作用。方法设计特异性的DcR3 siRNA序列;构建DcR3的pSUPER表达质粒并鉴定,鉴定成功后用于转染SW480细胞。以RT-PCR的方法检测细胞转染后DcR3 mRNA的表达;以Western blotting的方法检测DcR3蛋白的表达情况,并作统计学处理。结果与对照组相比,本实验设计两段siRNA对SW480细胞中DcR3 mRNA及蛋白表达的抑制作用明显,实验细胞DcR3 mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论针对DcR3的siRNA质粒转染真核细胞后可抑制其mRNA及蛋白表达,为进一步探讨DcR3的功能及封闭DcR3基因表达而治疗肿瘤奠定了实验基础。
- 何平伍冀湘钟晨熙戴洁梁杰雄李洋许英晨于玮
- 关键词：诱骗受体3小干扰RNA结肠癌细胞
- DcR3基因和VEGF水平与结直肠癌临床病理的相关性被引量：1
- 2013年
- 目的探讨DcR3基因和血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌组织中的表达及意义。方法对61例结直肠癌组织和10例正常结直肠组织(对照组)采用免疫组化方法进行DcR3和VEGF的检测。结果 61例结直肠癌中37例DcR3(+);48例VEGF(+)。正常肠组织(-),两者的阳性表达与淋巴结转移、DUCK分期有关。结论DcR3和VEGF二者联合检测可以为临床诊治结直肠癌提供理论依据。
- 李晶张勇王川来林芬于玮伍冀湘戴洁
- 关键词：结肠肿瘤DCR3血管内皮生长因子免疫组化
- MiR-200c调节人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的分子机制研究
- 2019年
- 目的探究miR-200c对人结肠癌SW480细胞侵袭和迁移的影响及其相关机制。方法将SW480细胞分为类似物转染组(转染miR-200c类似物)、抑制物转染组(转染miR-200c核酸抑制剂)、类似物阴性对照组(转染miR-200c类似物的无义序列)、抑制物阴性对照组[加入miR-200c核酸抑制剂的载体(不含miR-200c核酸抑制剂)]以及空白组(不进行任何处理)。实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测12 h和24 h转染效率。细胞划痕实验和transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。Western blot法检测转染后β-catenin和E-cadherin的表达。结果细胞划痕实验显示,类似物转染组12 h和24 h后伤痕宽度均高于类似物阴性对照组(均P<0.05),抑制物转染组均低于抑制物阴性对照组(均P<0.05)。Transwell实验显示,与类似物阴性对照组和抑制物阴性对照组比较,类似物转染组24 h和48 h通过8μm孔径的细胞数减少,抑制物转染组增多(均P<0.05)。类似物转染组β-catenin和E-cadherin的表达均升高,抑制物转染组各蛋白表达均下降(均P<0.05)。结论 miR-200c可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制SW480细胞的侵袭和迁移。
- 何平宋辉梁杰雄邵天松张钊李洋
- 关键词：肿瘤侵润
