辽宁省自然科学基金(20092113)
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 相关作者：王涤非孟馨侯士方相泓冰王晓黎更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科学技术计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 初发的自发酮症倾向糖尿病患者的临床特征及分型被引量：2
- 2011年
- 目的探讨自发酮症起病的糖尿病患者的临床特征及分型。方法将206例自发酮症起病的糖尿病患者根据糖尿病抗体分为抗体阳性组、抗体阴性组。阴性组依据体质量分为肥胖组、非肥胖组。比较不同组别在起病年龄、体质量指数、体质量下降、C肽水平等方面的差异,并对抗体阳性组20例,阴性组50例进行了随访观察。结果抗体阳性与阴性组相比,起病年龄、体质量指数、C肽水平、血甘油三酯等差异有统计学意义,2组起病时血糖、体质量下降、糖尿病家族史等差异无统计学意义。肥胖组与非肥胖组相比,空腹血糖、C肽水平、血甘油三酯等差异有统计学意义,2组之间葡萄糖耐量试验(OGTT)2 h血糖、起病年龄、糖尿病家族史等差异无统计学意义。随访的抗体阳性20例患者,其中4例停用胰岛素治疗,16例继续胰岛素治疗,20例患者3个月后复查C肽,治疗前后差异无统计学意义。随访的50例抗体阴性患者中肥胖组21例停用胰岛素治疗,4例胰岛素治疗;非肥胖组16例停用胰岛素治疗,9例胰岛素治疗;50例患者中8例停用胰岛素患者3个月后复查C肽,2 hC肽水平治疗前后差异有统计学意义,2例继续胰岛素治疗患者C肽水平差异无统计学意义。结论在自发酮症倾向的初发患者中不仅包括1型糖尿病,也包括部分血糖升高的有胰岛素抵抗的2型糖尿病,对初发自发酮症倾向的糖尿病患者分型不明确者,需在病程中监测胰岛功能,逐渐明确分型。
- 王振艳孟馨侯士方相泓冰王涤非
- 关键词：糖尿病糖尿病酮症酸中毒特发性
- 葡萄糖和肿瘤坏死因子-α对内皮细胞中早期生长反应基因-1表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨葡萄糖和肿瘤坏死因子-α对内皮细胞中早期生长反应基因-1表达的影响。方法利用人脐静脉内皮细胞体外培养,予以25mmol/L葡萄糖和/或10ng/ml肿瘤坏死因子-α与内皮细胞共同孵育,运用蛋白免疫印迹方法检测细胞中早期生长反应基因-1蛋白的表达,运用酶联免疫吸附法检测纤溶酶原激活抑制物-1的表达。结果葡萄糖和肿瘤坏死因子-α均可增加早期生长反应基因-1的表达,两种因素共同作用产生协同作用。而且,葡萄糖和肿瘤坏死因子-α也可促进纤溶酶原激活抑制物-1的表达。细胞外调节蛋白激酶1/2的抑制剂(PD98059)可下调肿瘤坏死因子-α所诱导的早期生长反应基因-1、纤溶酶原激活抑制物-1的表达,而对葡萄糖所诱导的早期生长反应基因-1的表达无明显影响。结论肿瘤坏死因子-α可能通过细胞外调节蛋白激酶1/2路径促进早期生长反应基因-1和纤溶酶原激活抑制物-1表达。肿瘤坏死因子-α和葡萄糖可能通过不同的信号通路调节早期生长反应基因-1、纤溶酶原激活抑制物-1表达,在肥胖、糖尿病等代谢紊乱所致的血管并发症的发生中起到重要的作用。
- 曹艳丽王涤非孟馨谷剑秋王晓黎张锦
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α早期生长反应基因1肥胖血管疾病
- 麦没食子儿茶素没食子酸酯对TNF-α诱导的内皮细胞中PAI-1表达的影响及机制研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨绿茶的主要成分麦没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在血管内皮细胞中对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所诱导的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及机制。方法利用人脐静脉内皮细胞体外培养方法,分别与TNF-α和/或EGCG孵育,运用蛋白免疫印迹方法检测内皮细胞中磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)和肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)蛋白表达,应用酶联免疫吸附法方法检测细胞液中PAI-1水平。结果 TNF-α以浓度依赖和时间依赖方式增加内皮细胞中PAI-1的表达。EGCG可抑制TNF-α所诱导的PAI-1的表达,并可抑制ERK1/2磷酸化。TNF-α的刺激可使TN-FR1表达明显减少,而EGCG可抑制这一作用。结论 EGCG可能通过抑制ERK1/2的磷酸化,从而抑制TNF-α所诱导的PAI-1的表达,同时可减少TNF-α对TNFR1的抑制作用,在改善肥胖、胰岛素抵抗及相关心血管疾病中起着重要作用。
- 曹艳丽王涤非王晓黎孟馨张锦单忠艳
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制物-1血管疾病
- PTEN基因对胰岛素抵抗骨骼肌细胞凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察胰岛素抵抗骨骼肌细胞第10号染色体缺失并与张力蛋白同源的磷酸酶(PTEN)的表达。方法传代培养大鼠骨骼肌细胞,棕榈酸作用制备胰岛素抵抗模型。分以下4组:正常细胞组、胰岛素抵抗组、正常细胞+胰岛素刺激15 min组、胰岛素抵抗+胰岛素刺激15 min组。Western blot方法检测各组磷酸化PTEN(p-PTEN)、PTEN的表达。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果胰岛素抵抗组大鼠骨骼肌细胞p-PTEN与PTEN表达较正常细胞组均增加(P<0.01);胰岛素抵抗+胰岛素刺激15 min组p-PTEN的表达较正常细胞+胰岛素刺激15 min组明显增加(P<0.01),而2组PTEN的表达差异无统计学意义(P>0.05)。胰岛素抵抗组较正常细胞组凋亡明显增多(P<0.01),胰岛素抵抗+胰岛素刺激15 min组较正常细胞+胰岛素刺激15min组凋亡亦明显增多(P<0.01)。结论 PTEN基因参与胰岛素抵抗的发生,并可能影响骨骼肌细胞凋亡。
- 丁娇王涤非
- 关键词：胰岛素抵抗细胞凋亡
- 大鼠骨骼肌细胞的原代培养及鉴定被引量：7
- 2011年
- 探讨体外条件下骨骼肌卫星细胞的原代培养、纯化及鉴定的方法。取新生3～5 d的SD大鼠处死清洗后,采用Ⅰ型胶原酶、胰蛋白酶联合酶消化30 min,细胞悬液过滤离心后,用含有10%胎牛血清的培养液悬浮细胞,1 h后重新接种,重新接种2次,最后接种于L-多聚赖氨酸铺底的培养瓶中;采用骨骼肌肌动蛋白(α-sarcometric actin)免疫荧光方法鉴定骨骼肌细胞。肌卫星细胞培养5～6 h后开始贴壁,48 h完全贴壁,之后细胞进一步增多并相互融合,逐渐按一定方向呈有序排列。当细胞增殖至70%密度时,有融合趋势,加入分化培养基培养48 h后可形成多核的肌管,行免疫荧光染色,90%以上的细胞α-sarcometric actin染色阳性,证明培养的为骨骼肌细胞。
- 侯士方孟馨相泓冰王涤非
- 关键词：卫星细胞骨骼肌原代培养细胞纯化细胞鉴定
- 蛋白激酶C对胰岛素抵抗骨骼肌细胞的影响
- 2011年
- 目的探讨蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)在棕榈酸(Palmitic Acid,PA)诱导的骨骼肌细胞胰岛素抵抗(Isulin Resistance,IR)中的作用。方法免疫荧光鉴定原代大鼠骨骼肌细胞,氧化酶-过氧化物酶偶联法(GOD-POD法)检测培养液中葡萄糖浓度。设立对照组、棕榈酸组(PA组)、罗格列酮组(Rosiglitazone,Ros组),每组一分为二,分别加PKC抑制剂白屈莱红碱(Chelerythrine Chloride,CC)与正常培养液作用1h,Western Blot检测PKB及P-Ser473 PKB表达水平。结果 90%以上的细胞-αsarcometric actin免疫荧光染色呈阳性反应,表明培养的细胞为骨骼肌细胞;0.6mmol/L的PA作用24h可诱导骨骼肌细胞产生胰岛素抵抗;PA组与对照组相比P-Ser473 PKB水平显著降低,与本组未加CC相比显著升高。同时,罗格列酮组及本组加CC中P-Ser473PKB水平均高于PA组。结论在PA诱导的骨骼肌细胞IR方面PKC起重要作用,罗格列酮与PKC抑制剂CC均能改善PA引起的IR。
- 侯士方孟馨相泓冰王涤非
- 关键词：胰岛素抵抗蛋白激酶C蛋白激酶B棕榈酸骨骼肌细胞
- 胰岛素抵抗骨骼肌细胞中P-Ser473PKB及糖原合成酶-3表达被引量：2
- 2011年
- 目的探讨棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗(IR)骨骼肌细胞中P-Ser473PKB及糖原合成酶(GSK)-3的表达。方法培养大鼠骨骼肌细胞,免疫荧光鉴定原代大鼠骨骼肌细胞;设立对照组、PA组(0.6mmol/L PA),在细胞培养6、122、4 h后,胰岛素刺激15 min,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联(GOD-POD)法测定培养液中葡萄糖的浓度;Western blot检测P-Ser473PKB及P-Ser21/9GSK-3α/β的蛋白表达。结果 90%以上的肌细胞-αsarcometric actin单克隆抗体染色呈阳性,证明培养的为骨骼肌细胞;培养24 h后,PA组培养液中葡萄糖浓度高于对照组,P-Ser473PKB蛋白水平低于对照组,而P-Ser21/9GSK-3α/β高于对照组(P值均<0.05)。结论 PA作用下,胰岛素刺激的骨骼肌细胞对葡萄糖的处理能力下降,即PA可诱导骨骼肌细胞产生胰岛素抵抗,其机制可能与P-Ser473PKB蛋白表达下调,P-Ser21/9GSK-3α/β表达增加有关。
- 侯士方孟馨相泓冰王涤非
- 关键词：胰岛素棕榈酸
