国家自然科学基金(81272130) 作品数:5 被引量:13 H指数:3 相关作者: 林煌 鲁昆 褚小玲 王绿娅 董勇 更多>> 相关机构: 首都医科大学附属北京安贞医院 北京市心肺血管疾病研究所 南华大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
以眶下血管为蒂的颞区眼轮匝肌真皮下血管网皮瓣修复面部缺损的临床应用 被引量:3 2015年 目的 探讨以眶下血管为蒂的颞区眼轮匝肌真皮下血管网皮瓣修复面部缺损的临床价值.方法 对2007年6月至2014年12月于首都医科大学附属北京安贞医院整形激光外科门诊及住院病例和外院会诊病例13例应用眶下血管皮下蒂的颞区真皮下血管网皮瓣转移修复组织缺损,缺损位于下眼睑区6例,鼻部7例;基底细胞癌9例,鳞癌3例,外伤缺损1例;缺损大小为1.2cm×0.8cm~2.4cm×2.0cm.结果 13例皮瓣全部存活,供区瘢痕隐蔽,形态满意.结论 以眶下血管为蒂的颞区眼轮匝肌真皮下血管网皮瓣是邻近组织缺损修复重建的理想方法之一. 林煌关键词:皮肤缺损 皮瓣 真皮下血管网 缺血后处理激活自噬保护皮瓣机制研究 被引量:3 2013年 目的:缺血后处理皮瓣在临床上已经运用,开始相关研究探究缺血后处理对皮瓣保护机制。方法:健康成年新西兰大白兔,分为3组。A组为给予缺血后处理;B组为再灌注前5mi n给予自噬阻滞剂3-甲基腺嘌呤10μl+缺血后处理。C组,直接应用微血管夹阻断腹壁浅血管持续缺。6h后再灌。各组分别进行自噬指标Becl i n1、LC3免疫组化和皮瓣存活率检测。结果:新西兰大白兔完全存活。B、C组相比较,自噬Becl i n1、LC3免疫组化染色阳性细胞面积变化未见统计学差别(P>0.005)。实验组皮瓣存活面积比较,B与C相比较,无统计学意义(P>0.005),但是A与B、C相比较,上述指标两两之间都有统计学意义差别(P<0.005)。结论:缺血后处理对皮瓣再灌注损伤有保护作用,该作用可能和自噬激活有关。 林煌 董勇关键词:皮瓣 缺血-再灌注损伤 自噬 人真皮微血管内皮细胞的原代培养及低氧/复氧模型的建立 被引量:2 2015年 目的:培养人真皮微血管内皮细胞,建立人真皮微血管内皮细胞低氧/复氧模型。方法:采用酶消化及联合磁珠分选法,得到人真皮微血管内皮细胞(HDMECs),体外培养传至P5代,采用Ⅷ因子免疫荧光及CD309、CD34流式细胞学进行鉴定。用缺氧Buffer加低氧舱的方法低氧处理P5代HDMECS。实验分为四组,Con组不做任何处理、H8组低氧8小时组,H8R12组低氧8小时复氧12小时组、H8R24组低氧8小时复氧24小时组。TUNEL(脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法)染色法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达。结果:联合法分离的细胞,经过2次CD31磁珠分选后,可见细胞短梭形,呈铺路石样。细胞传至P5,Ⅷ因子免疫荧光染色阳性率为(95±2.61)%。流式细胞仪检测CD309阳性率为(95.4±1.34)%;CD34阳性率为(42.5±3.23)%。TUNEL染色、Western Blot结果显示:H8组的细胞凋亡率和活化的Caspase-3表达高于Con组(P<0.05),H8R12组、H8R24组细胞凋亡率和活化的Caspase-3表达高于H8组(P<0.05)。结论:本研究采用磁珠分选的办法成功培养了HDMECs,并且建立了HDMECs低氧/复氧模型,为临床研究游离皮瓣缺血再灌注损伤机制提供实验基础。 鲁昆 王月丽 王海红 关啸 王绿娅 辛毅 褚小玲 林煌关键词:细胞凋亡 人真皮微血管内皮细胞缺氧后处理模型的建立 被引量:1 2015年 目的探讨建立人真皮微血管内皮细胞的缺氧后处理模型的方法。方法采用酶消化加磁珠分选的方法,获得人真皮微血管内皮细胞,用5%ECM培养基培养,取第6~8代细胞备用,在进行缺氧处理后复氧前,将细胞进行3次一定时间的缺氧/复氧交替处理;将细胞接种于6孔板,1个6孔板为1组,共6组。1组:不作任何处理;2组:缺氧8h+复氧24h;3组:缺氧8h+2min×3次缺氧后处理;4组:缺氧8h+5min×3次缺氧后处理;5组:缺氧8h+10min×3次缺氧后处理;6组:缺氧8h+20min×3次缺氧后处理。各组经过8h缺氧箱+缺氧Buffer的缺氧处理和24h复氧后,检测乳酸脱氢酶(LDH)随缺氧时间含量的变化;Tunel法染色计算各组的细胞凋亡率;用Western Blot的方法检测Bcl-2、Bax和caspase-3以及活化easpase-3的蛋白含量表达。实验数据采用SPSS18.0进行统计分析,2组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析。结果在连续的缺氧过程中,LDH含量在8h(1563±83.35)IU/L与0h(582.85±58.25)IU/L比较,差异有统计学意义(P=0.0001)。Western Blot结果:2组Bax/Bcl-2表达含量为0.38±0.02,2组与3组0.23±0.01和4组0.22±0.02比较,差异有统计学意义(P=0.012,P=0.005),2组与5组0.33±0.02和6组0.34±0.01比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。2组活化的caspase-3/easpase-3比例为6.30±1.50,与3组2.17±0.26和4组2.63±0。31比较,差异有统计学意义(P=0.008,P=0.019);2组与5组4.36±0.29和6组4.97±0.51比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论成功地建立了人真皮微血管内皮细胞缺氧后处理模型。 鲁昆 褚小玲 王绿娅 林煌关键词:微血管内皮细胞 外科皮瓣 细胞缺氧 细胞凋亡 TBL显微外科教育模式分析和探讨 被引量:4 2015年 目的随着显微外科专业在我国的蓬勃发展,国内不同等级的医疗机构必须对不同层次的整形美容外科医生进行正规培训。方法为了提高教学效果我们采用了多种形式加强学生教育,开展对学生有针对性的团队化显微外科教学模式。结果我们教学模式能够培养学生的显微外科协作精神。结论对团队教学模式的运行模式进行分析,希望能对其它医疗教学机构提供参考。 林煌关键词:显微外科 临床教学