广东省医学科学技术研究基金(B2009180)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 相关作者：史雪川杨汉华肖丹萍陈思红庄静文更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第二附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织细胞红蛋白的表达被引量：2
- 2010年
- 目的探讨细胞红蛋白（cytoglobin，CYGB）在7日龄新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）脑内的表达变化。方法健康7日龄SD大鼠70只，按简单随机抽样法随机取50只制备HIBD模型作为HIBD组，再随机分为HIBD后0、4、12、24和48h组，每组10只；假手术组10只，只分离左颈总动脉，不结扎，也不放入缺氧箱；另10只不做任何处理作为对照组。假手术组术后即断头取脑，对照组同时取脑，HIBD组在相应时间点取脑。采用免疫组织化学法和Western印迹法从蛋白水平分析CYGB在脑组织中的分布及表达特点。结果（1）免疫组织化学染色显示CYGB主要表达于大脑皮质、丘脑和海马神经元的胞浆，HIBD组CYGB表达数量及染色强度均高于对照组，其中缺氧24、48h组表达最强。（2）Western印迹结果显示，HIBD后0、4、12、24和48hCYGB平均吸光度分别为261．5±5．0，263．0±5．4，464．3±6．8，522．8±11．2，512．9±7．9，明显高于假手术组（117．6±7．0）及对照组（116．6±9．0），P〈0．01。其中缺氧0和4h组明显高于对照组（P〈0．01）；缺氧12h组的表达明显高于缺氧0、4h组（P〈0．01）；缺氧24、48h组明显高于缺氧12h组（P〈0．01）；缺氧0、4h组间，缺氧24、48h组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论7日龄新生大鼠HIBD后脑内CYGB表达明显增强，并且随着缺氧缺血发展呈现时相性变化，提示其可能在脑缺氧缺血的适应性调节过程中起重要作用。
- 郑淮武史雪川庄静文杨汉华陈思红
- 关键词：珠蛋白类SPRAGUE-DAWLEY
- 细胞红蛋白基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时的表达被引量：2
- 2013年
- 目的探讨缺氧缺血性脑损伤时脑中细胞红蛋白基因的表达及变化。方法将出生7d的SD大鼠50只分成5组，其中实验组在手术后制成脑损伤模型，并且在血流阻断4、12、24、48h取脑；对照组为假手术组，术后即取脑。设计细胞红蛋白基因引物，提取脑组织总RNA，进行PCR。以GraphPadPrism统计软件包的One-way单因素方差分析进行数据统计分析。结果设计的新生大鼠细胞红蛋白cDNA序列引物可靠，扩增产物与设计相符。实验组细胞红蛋白mRNA的表达在缺血4h开始升高，24h达到高峰，48h开始下降，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞红蛋白mRNA表达增强，提示细胞红蛋白可能在脑缺氧的适应性调节过程中起重要作用。
- 杨汉华田树凤史雪川肖丹萍
- 关键词：新生大鼠基因表达缺氧缺血性脑损伤
- siRNA对体外培养大鼠海马神经元细胞红蛋白基因表达的抑制
- 2011年
- 【目的】研究siRNA（small interfering RNA）对细胞红蛋白（Cytoglobin,CYGB）基因表达的抑制作用。【方法】取新生大鼠海马做神经元原代培养,NeuN免疫荧光抗体鉴定神经元纯度后,通过阳离子脂质体转染试剂将体外化学合成的针对CYGB基因的siRNA转入细胞中,以未转入siRNA细胞及转入阴性siRNA细胞为对照,通过转染荧光对照siRNA检测转染效率,用RT-PCR方法检测siRNA对CYGB表达的抑制作用。【结果】成功体外培养海马神经元,转染荧光对照siRNA结果示转染效率在70%左右,RT-PCR结果提示与阴性对照及空白对照相比,转染siRNA-78后24 h（P〈0.01）,48 h（P〈0.001）及60 h（P〈0.001）CYGB mRNA的表达明显减弱,72 h后表达无明显减少。而转染siR-NA-79,siRNA-80在各时间点与对照相比没有明显差别（P〉0.05）。【结论】特异性针对CYGB的siRNA-78转染体外培养的大鼠海马神经元24~60 h能显著下调CYGB基因的表达。
- 张潇史雪川
- 关键词：SIRNA基因海马
- 胞红蛋白在缺氧神经元中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的探讨细胞红蛋白（cytoglobin,CYGB）在体外培养神经元缺氧时的表达,为研究缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy,HIE）的生理病理机制及寻求该病新的治疗方法提供实验基础。方法运用无血清培养技术进行胎鼠皮质神经元原代培养6d;先用神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学方法纯度鉴定,然后随机分配为4组,将其中3组（第1组作为对照）置于0.5%-0.9%的O2中,用CCK8试剂盒测试细胞生存率,同时用Real-timePCR和Westernblot观察CYGB在神经元正常及缺氧不同时间点（8h,16h,24h）核酸及蛋白的表达情况。结果神经元纯度鉴定纯度大于99%;缺氧后神经元生存率随着时间推移降低,但绝大部分神经元仍存活;CYGB核酸及蛋白的表达随缺氧时间增长而递增,且每组之间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论在体外培养的神经元细胞中,缺氧可以促进CYGB的表达,提示CYGB在缺氧性神经损伤中可能发挥某种特定的生理功能。
- 马海然史雪川
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤
- 细胞红蛋白对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用
- 2013年
- 目的探讨细胞红蛋白（cytoglobin，CYGB）在缺氧缺血性脑损伤（ hypoxic-ischemic brain damage, HIBD）中的神经保护作用。方法健康7日龄新生Sprague-Dawlay大鼠随机分为假手术组、HIBD组、HIBD＋氯化高铁血红素（Hemin）组和HIBD＋锌原卟啉（zinc protoporphyrin，ZnPP）组。HIBD组、HIBD＋Heroin组及HIBD＋ZnPP组大鼠分别腹腔注射0．5ml生理盐水、Heroin（50mg／kg）及ZnPP（50mg／kg），12h后结扎并剪断左侧颈总动脉，缺氧2h，制成HIBD动物模型。建立模型后0、24、48h免疫组织化学法检测各组大鼠海马及皮质中CYGB的表达情况，每组10只。HE染色观察建立模型后48h的大鼠脑组织病理变化，每组8只。称重法检测建立模型后72h新生大鼠脑含水量，每组8只。建立模型后28d采用Morris水迷宫实验检测海马学习记忆功能变化，每组10只。组间差异比较采用方差分析，组间两两比较使用Bonferroni法。结果（1）大鼠脑组织CYGB的表达水平：用平均灰度值（与蛋白表达水平成反比）表示。在0h，HIBD＋Hemin组和HIBD组皮质CYGB的平均灰度值分别为166．7±5．1和207．1±5．1，低于似手术组（232．3±3．4），而HIBD＋ZnPP组（234．9±4．5）高于假手术组（P〈0．05）。随时间的增加，各HIBD组CYGB的平均灰度值递减，至48h时，CYGB的平均灰度值HIBD＋Hemin组最低（126．0±2．6），其次是HIBD组（150．9±4．5）和HIBD＋ZnPP组（163．7±6．3），最高是假手术组（232．1±5．8），差异均有统计学意义（P均〈O．01）。CYGB在海马组织的表达变化与皮质一致。（2）各组脑组织病理变化：建立模型后48h，HIBD组、HIBD＋Heroin组和HIBD＋ZnPP组新生大鼠脑组织可见典型的脑梗死和出血，H1BD＋Hemin组梗死灶明显较HIBD＋ZnPP组小，出仇减轻。（3）脑组织含水量变化：建立模型后72h，HIBD组和HIBD4-ZnPP组左侧脑组织含水量分别为（86．5±0．4）％和�
- 肖丹萍杨汉华史雪川
- 关键词：珠蛋白类
