国家自然科学基金(30772166)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
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- hTERT启动子联合HSV-tk/GCV对人前列癌裸鼠移植瘤的治疗作用
- 2009年
- 目的观察以人端粒酶逆转录酶(Human Telomerase Reverse Transcriptase promoter,hTERT)为启动子,以腺病毒为载体的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因重组构建体Ad-hTERT-HSV-tk联合更昔洛韦(GCV)体内抗前列腺癌的活性。方法建立前列腺癌裸鼠移植瘤模型,按不同浓度梯度Ad-hTERT-HSV-tk经尾静脉注射荷瘤小鼠后,腹腔注射同一浓度GCV,观察肿瘤体积、瘤重、肿瘤抑制率、肿瘤体积-时间曲线以及裸鼠生存期。评价Ad-hTERT-HSV-tk的抗肿瘤活性。结果在作用底物GCV存在条件下,Ad-hTERT-HSV-tk对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用,对移植瘤的体积和瘤重的抑制效应与Ad-hTERT-HSV-tk呈剂量依赖性增强,且未达量效平台期。将Ad-hTERT-HSV-tk和GCV分别单独应用,结果显示对肿瘤生长均有一定的抑制作用,但与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ad-hTERT-HSV-tk联合GCV对前列腺癌具有明确的实验性治疗作用,值得进一步研究,在人类前列腺癌治疗方面具有明显的临床运用前景。
- 齐进春张勇黎玮蔡文清王亚轩刘凯隆
- 关键词：基因治疗重组腺病毒人端粒酶逆转录酶
- HTERT启动子调控HSV-tk＋GCV系统对人前列腺癌裸鼠移植瘤的疗效观察被引量：2
- 2009年
- 目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HSV-tk)基因结合环氧鸟苷(GCV)对人前列腺癌PC3、LNCaP细胞株裸鼠移植瘤的疗效。方法:建立人前列腺癌BALB/C裸鼠移植瘤模型,利用携带hTERT和HSV-tk基因的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-tk肿瘤局部注射荷瘤裸鼠后,腹腔注射GCV治疗。结果:(1)LNCaP细胞株、PC-3细胞株裸鼠移植瘤各组肿瘤体积的增长趋势基本一致,Ad-hTERT-HSV-tk+GCV治疗组自腹腔注射GCV后第21天开始,肿瘤体积均明显小于另3组,不同组之间,不同治疗时间差别均有统计学意义(LNCaP细胞株:F分别为17.24和557.83,P<0.01;PC-3细胞株:F分别为24.48和599.37,P<0.01),且分组和治疗时间之间存在交互作用(LNCaP细胞株:F=10.15,P<0.01;PC-3细胞株:F=11.88,P<0.01)。(2)LNCaP、PC-3细胞株移植瘤Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组凋亡率均高于其他组,而增殖都低于另3组。(3)透射电镜下发现,Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组可见凋亡小体。结论:Ad-hTERT-HSV-tk联合GCV对人前列腺癌裸鼠移植瘤模型具有明确的治疗作用。
- 敦双华齐进春黎玮蔡文清张勇牟振云张艳平
- 关键词：腺病毒科末端转移酶
- 野甘草醇对胸腺激酶依赖的更昔洛韦阻断前列腺癌进展的增效作用被引量：2
- 2012年
- 目的观察野甘草醇（SDC）在人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸腺激酶基因／更昔洛韦（HSV—tk／GCV）自杀基因系统对人前列腺癌细胞的杀伤作用中的增效作用。方法测定胸苷激酶（TK）活性，应用高效液相色谱（HPLC）法测定三磷酸更昔洛韦（GCV—TP）在肿瘤细胞内的浓度，将不同配伍浓度的SDC、Ad—hTERT—HSV—tk、更昔洛韦（GCV）应用于前列腺癌细胞，观察体外对前列腺癌细胞的杀伤作用、旁杀伤效应。结果SDC对转染Ad—hTERT—HSV—tk的LNCaP、PC3细胞的TK酶活性影响不明显。应用高效液相色谱法分析，以单加GCV组的GCV—TP浓度计作100％。在加入0．04umolSDC后，GCV—TP浓度与不加SDC比较提高到（101．0±1．5）％，但差异无统计学意义（P〉0．05）；加入5倍治疗剂量0．20umolSDC后，GCV-TP浓度提高到（106．0±4．5）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。并进一步通过细胞实验证实，SDC对Ad—bTERT—HSV—tk＋GCV杀伤前列腺癌细胞无明显增效作用，但是旁杀伤效应增加明显。结论SDC对胸腺激酶依赖的GCV阻断前列腺癌进展有一定的增效作用，将天然药物SDC与我们构建的具有肿瘤特异性的重组腺病毒Ad—hTERT—HSV—tk以及GCV联合应用，可以达到增效减毒的目的。
- 齐进春王晓路蔡文清黎玮李丽张艳平郭垣杉
- 关键词：前列腺癌基因治疗重组腺病毒端粒酶逆转录酶
- 腺病毒介导的HSV-tk/GCV系统在hTERT启动子调控下治疗人膀胱癌的实验研究
- 2011年
- 目的观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的腺病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因/丙氧鸟苷(GCV)系统在体外及荷瘤裸鼠体内对人膀胱癌的治疗作用。方法利用hTERT启动子及小鼠巨细胞病毒(CMV)启动子调控的携带HSV-tk基因的重组腺病毒(Ad-hTERT-HSV/tk与Ad-CMV-HSV/tk)分别感染人膀胱癌细胞253 J和人正常肺成纤维细胞MRC-5,加入GCV,MTT法观察受染细胞的存活率。建立人膀胱癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,A组(Ad-hTERT-HSV/tk+GCV组)、B组(Ad-hTERT-HSV/tk+PBS组)、C组(PBS+GCV组)和D组(PBS对照组),观察各组肿瘤生长状况、重要脏器病理变化及裸鼠存活情况。结果体外实验表明,应用GCV处理后,Ad-CMV-HSV/tk对253 J和MRC-5细胞均有杀伤作用,而Ad-hTERT-HSV/tk只对膀胱癌细胞253 J具有杀伤作用。动物实验显示,A组移植瘤的体积和瘤重低于其他3组(P<0.01)。A组裸鼠平均存活期长于其他3组(P<0.01)。结论 hTERT启动子调控的重组腺病毒介导HSV-tk/GCV系统是一种安全、有效且靶向性高的基因疗法。
- 王亚轩蔡文清黎玮杨书文李景东齐进春
- 关键词：人端粒酶逆转录酶启动子单纯疱疹病毒胸苷激酶基因
- ABL—N诱导前列腺癌细胞凋亡及其机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨旋覆花内酯（ABL）-N诱导前列腺癌细胞凋亡的作用及其机制。方法0～40μmol／LABL—N分别处理前列腺癌细胞后，利用噻唑蓝（MTF）检测对细胞增长的抑制作用；流式细胞学、TUNEL染色等方法检测其诱导凋亡的作用，并检测Caspase活性，Westernblot测定bax、bcl-2水平变化。结果ABL—N明显抑制前列腺癌细胞PC3、LNCaP及DUl45的生长，并呈剂量依赖性。40tLmol／LABL—N作用24h后，（73．34±4．41）％的PrEC细胞存活，而3种前列腺癌细胞分别为（11．92±2．31）％、（12．55±1．94）％、（13．28±2．26）％。膜联蛋白／碘化丙锭（AnnexinV／PI）及TUNEL染色表明ABL—N呈剂量依赖性诱导PC3凋亡。ABL—N可激活Caspase活性，尤其Caspase-3，20tLmol／LABL—N作用24h后其活性是对照组的4．23倍；bax／bcl-2比率随浓度增加明显增高。结论ABL—N可通过Caspase途径及bax／bcl-2蛋白途径，诱导PC3等前列腺癌细胞凋亡，抑制前列腺癌细胞增殖。
- 黎玮张艳平刘凯隆齐进春张勇蔡文清
- 关键词：前列腺癌BCL-2/BAXCASPASES
