国家科技重大专项(2009ZX08009-091B)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：左开井张洁琼王劲刘明月代其林更多>>
- 相关机构：上海交通大学中国农业科学院生物技术研究所西南科技大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- GAPB基因原核表达载体的构建
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：融合蛋白
- 农杆菌介导棉花茎尖遗传转化体系优化被引量：11
- 2011年
- 生根困难和转化效率较低是农杆菌介导棉花茎尖遗传转化体系的应用瓶颈。本研究以柯字棉312为研究材料,探讨茎尖遗传转化中植物生长调节剂、生根诱导时间、无菌苗型、针刺处理等对茎尖生根率、茎尖形态以及抗性苗产生率等的影响。结果表明,1.5 mg/L NAA能够有效提高生根率,促进茎尖伸长;生根诱导时间是生根率的重要影响因子;经多次针刺处理的正常苗抗性苗率较高;培养5 d的正常苗茎尖生长速度和状态优于黄化苗。
- 刘明月左开井
- 关键词：棉花农杆菌介导茎尖
- 棉花黄萎病菌AD-cDNA文库的构建
- 2011年
- 以黄萎病菌（从邯208中分离到的致病性中等的和从中棉所8号中分离到的致病性弱的菌株）为材料,构建了AD-cDNA文库。该文库的转化效率为4×105cfu/μg,库容量为4.8×106克隆,插入片段的大小在750~1 500 bp之间。筛选获得的候选蛋白测序结果表明含有TRRAP结构域（TRansformation/tRanscription domain-Associated Protein,转化/转录域相关蛋白）,推测TRRAP是一个锚定蛋白,是Avr蛋白和R蛋白相互识别和交换信号的场所,其功能和作用机制有待进一步的研究。该文库可以用于棉花抗黄萎病的相关研究,并为进一步解释棉花抗黄萎病菌的机理提供研究基础。
- 张洁琼左开井
- 关键词：黄萎病菌
- 真菌无毒基因克隆与抗性蛋白互作研究被引量：3
- 2010年
- 无毒基因(avirulence genes,Avr)是病原物遗传因子,能诱发寄主植物产生抗病性。真菌Avr基因的克隆、编码产物结构和功能分析,以及与寄主抗性蛋白的互作机制等方面的研究对于深入了解植物的抗真菌病害分子机理具有重要意义。其编码AVR蛋白(又可以称为效应子,effector)通常富含半胱氨酸,效应子通过吸器或侵入丝被分泌到寄主细胞内促发抗性反应。在抗性反应过程中,效应子能直接或间接地被植物细胞相应的抗性蛋白识别,这种识别机制与效应子和抗性蛋白的区段相关。以几个真菌病害为例,综述了近年来有关无毒基因克隆、表达,以及与抗性蛋白的互作机制等方面的主要研究进展,以期为相关研究的深入提供参考。
- 张洁琼王劲左开井
- 关键词：无毒基因抗病基因
