王宝恩肝纤维化研究基金(20070047)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脂联素真核表达质粒构建及其在LX-2中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建人全长脂联素真核表达质粒,转染人肝星状细胞系(LX-2),观察其表达及分泌情况,为脂联素在肝纤维化作用的基础及临床研究提供实验数据。方法提取人脂肪组织mRNA,用RT-PCR扩增出添加酶切位点的人全长脂联素基因片段,双酶切扩增出的目的基因片段及空载体质粒P7,将酶切后的片段进行连接、转化构建质粒。用FuGENE HD将构建成功的质粒转染LX-2细胞,用免疫荧光观察其转染效率及细胞定位,Western blotting检测脂联素蛋白表达。结果酶切及测序证实成功构建人全长脂联素真核表达质粒,免疫荧光检测转染效率约为40%,Western blotting检测到30000处存在目的蛋白表达,与预期相对分子质量一致。结论成功构建的人全长脂联素真核表达质粒能有效转染LX-2细胞及表达脂联素蛋白。
- 张育先白启轩马超马红
- 关键词：脂联素肝纤维化
