河南省高校青年骨干教师资助项目(2001193)
- 作品数：13 被引量：81H指数：5
- 相关作者：程相朝吴庭才李银聚张春杰李祥瑞更多>>
- 相关机构：河南科技大学南京农业大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：河南省高校青年骨干教师资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 不同时期NDV地方株F基因的克隆及序列分析与基因型研究被引量：14
- 2006年
- 利用RT-PCR技术对1998-2002年闯洛阳地区新城疫典型发病禽群中所分离到的15个毒株的F基因主要功能区片段进行了克隆和序列分析，并根据其47～435位核苷酸序列构建了系统进化树，确定了其毒力强弱和基因型。结果显示，依据核苷酸和推导的氨基酸同源性的不同，15个地方毒株可分为3群，群内各毒株同源性较高，群间差异较大，未发现有因分离禽品种不同所引起的明显的株间差异。其中第1群9株，涉及到各时间段分离的毒株和所有分离禽品种，属典型的基因Ⅶ型强毒株，高度集中于进化树的基因Ⅶ型C亚型区；第2群4株，属传统的基因Ⅵ型强毒株。分散于进化树的基因Ⅵ型区；第3群2株，属古典基因Ⅱ型的弱毒株，分散于进化树的基因Ⅱ型区。结果表明，近年来该地区流行的新城疫病毒以新的基因Ⅶ型为主，同时兼有传统的基因Ⅵ型和古老的基因Ⅱ型；并提示基因Ⅶ型各毒株在该地区流行的时间较短，株间差异不大。
- 程相朝李祥瑞吴志明李银聚吴庭才张春杰
- 关键词：鸡新城疫病毒F基因进化树基因型
- 鸡IL-18真核表达载体的构建及其对新城疫疫苗免疫增强作用的研究被引量：26
- 2005年
- 利用首次从鸡新城疫疫苗接种的鸡胚脾细胞中扩增出的鸡IL 18 全基因,构建IL 18 真核表达载体(pcDNA3 IL18),并观察其对新城疫疫苗的免疫增强作用。结果表明,同时接种pcDNA3 IL18 质粒和活疫苗的免疫鸡在接种后35 d内,特别是15 d之后所产生的HI抗体效价和T、B淋巴细胞增殖反应均高于单纯疫苗免疫组及pcDNA3 空白质粒和疫苗联合免疫组。其中,HI抗体效价在15 d 时差异显著(P<0 05),在30 和35 d时差异极显著(P<0 01); T淋巴细胞增殖反应在15 d后均表现为差异显著(P<0 05〉或极显著(P<0 01);而单纯疫苗组与空白质粒和疫苗联合免疫组之间的各测定指标则无明显的差异(P>0 05)。在35 d时进行攻毒, pcDNA3 IL18和疫苗联合免疫组的保护率为83.3%,而单纯疫苗免疫组、空白质粒和疫苗联合免疫组鸡的保护率则分别只有61.5%和66.7%。说明该pcDNA3 IL18真核表达质粒在鸡体内得到了表达,表达产物不仅能够显著增强新城疫疫苗所诱导的细胞免疫和体液免疫反应,而且还可以明显提高疫苗的保护率。
- 程相朝赵德明吴庭才李银聚张春杰
- 关键词：免疫增强作用新城疫疫苗HI抗体效价体液免疫反应增殖反应
- 不同时期NDV地方株F基因的克隆及序列分析与基因型研究
- 利用RT-PCR技术,对1998-2002年间洛阳地区的新城疫典型发病禽群中所分离到的15个地方毒株的F基因主要功能区片段进行了克隆和序列分析,并根据其47-435位核苷酸序列构建了系统进化树。确定了其毒力强弱和基因型。...
- 程相朝李银聚吴庭才张春杰
- 关键词：鸡新城疫病毒F基因进化树基因型
- 文献传递
- NDVF基因DNA疫苗对新城疫病毒灭活油乳苗的免疫协同作用被引量：5
- 2006年
- 目的：为进一步探讨控制新城疫发生和流行的新途径。方法：利用所构建的F基因pcDNA3真核表达质粒（DNA疫苗）和新研制的地方流行株灭活油乳苗，观察了新城疫病毒F基因DNA疫苗对地方分离株灭活油乳苗的免疫协同作用。结果：在7日龄时应用灭活油乳苗和DNA疫苗联合免疫的鸡群，在14～57日龄整个观察期内，不但其胸腺T淋巴细胞对ConA、法氏囊B淋巴细胞对PMA的反应均明显强于单纯油乳苗免疫组（其中除在接种后第7天时两组鸡的B淋巴细胞增殖OD570值差异不显著外，其余各检测时间两组间均表现为差异显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01），特别是T淋巴细胞增殖情况在接种第14天后均表现为差异极显著（P〈0．01））；而且HI抗体效价水平也持续性高于单纯油乳苗免疫鸡群，并在免疫接种后35～49天时差异显著（P〈0．05）。在免疫接种后第49天时进行的攻毒保护试验中，联合免疫组的保护率为100％，而单纯油乳苗免疫组鸡在观察期内则有2只发病，保护率为86．7％，且有1只死亡。结论：试验所用F基因DNA疫苗和灭活油乳苗联合免疫可显著提高机体的体液免疫和细胞免疫水平，产生较好的免疫协同作用，从而使机体对NDV的综合免疫保护能力得到进一步的提高。
- 程相朝吴庭才张春杰李银聚李祥瑞
- 关键词：新城疫病毒F基因DNA疫苗联合免疫
- 15株NDV地方株的分离鉴定与生物学特性被引量：6
- 2005年
- 从1998～2002年河南省洛阳地区代表性新城疫发病禽群中分离鉴定了15株新城疫病毒(NDV),并对其生物学特性进行了研究.结果表明,15株NDV均呈现良好的血凝活性和特异的血凝抑制特性;对鸡胚的致病作用可被新城疫阳性血清所抑制;对鸡胚最小致死量的平均死亡时间(MDT),1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉内接种的致病指数(IVPI)的测定证实,LD-6-01和LR-2-00株是弱毒株,其余均为强毒株;弱毒株的血凝素热稳定性较好,属慢速血凝解脱型;强毒株的血凝素热稳定性差,属快速或中速血凝解脱型;所有毒株均可较好地凝集鸡和人(O型血)的红细胞,但对其他动物的红细胞凝集性差异较大.对HI抗体为6log2的12日龄雏鸡攻毒试验结果表明,15个分离株中2个弱毒株可得到100%保护;13个强毒株中,LG-1-99,LR-1-98,LD-4-01和LD-3-00得到了70%～90%的保护,而其他9个分离株(LD-1-98,LD-2-99,LD-5-01,LD-7-02,LR-3-02,LW-1-02,LG-2-00,LA-1-99和LE-1-01)基本上得不到保护(0～20%),但所有得不到保护的试验组鸡的发病死亡时间均明显向后推迟.
- 程相朝吴志明吴庭才李银聚张春杰李祥瑞
- 关键词：新城疫病毒生物学特性
- 新城疫病毒的基因组与结构蛋白特征被引量：14
- 2004年
- 新城疫病毒属于副粘病毒科、Rubulavirus病毒属、Ⅰ型副粘病毒的惟一成员 ,为单股负链RNA病毒 ,整个基因组全长 15 5 86个核苷酸 ,编码核衣壳蛋白、磷蛋白、基质蛋白、融合蛋白、血凝素神经氨酸酶和高分子量的RNA聚合酶 6种结构蛋白。为进一步做好新城疫的防治工作 ,对新城疫病毒的分子生物学特性 ,特别是对其基因组特征和编码蛋白的结构及功能等方面进行了较为详尽的综述 ,从而为新城疫病毒的深入研究奠定了一定的基础。
- 程相朝
- 关键词：新城疫病毒基因组结构蛋白分子生物学
- 不同基因型NDV灭活油乳苗与La Sota株灭活油乳苗的免疫效果比较被引量：4
- 2005年
- 用地方分离的基因Ⅵ型和Ⅶ型代表株 (LD - 3- 0 0株和LD - 7- 0 2株 )配以传统的LaSota株所制备的灭活油乳苗与LaSota株单价灭活油乳苗进行的免疫效果比较显示 :前者在接种后各个时期所产生的HI抗体效价与LaSota株灭活苗免疫鸡所产生的HI抗体效价无明显差异 ,至接种后第 4 2天两者均具有 7.3log2 的HI效价。在对具有不同HI抗体水平的试验鸡进行的攻毒试验中 ,对F4 8E9标准强毒株的攻击 ,无论是LaSota株疫苗免疫鸡 ,还是不同基因型灭活苗免疫鸡 ,在HI抗体效价为 6log2 以上时均能 10 0 %地被保护 ;但对不同基因型野毒株的攻击 ,尤其是基因Ⅶ型野毒株的攻击 ,2种疫苗则呈现出明显的差异。在LaSota株疫苗免疫鸡HI效价为 6log2 时 ,对不同基因Ⅶ型野毒株的攻击 ,保护率只有 0～ 2 0 % ;而具有 6log2 效价的不同基因型疫苗免疫鸡则对不同基因Ⅶ型野毒株的攻击具有 6 0 %～ 70 %的保护率 ;当HI效价达 8log2 左右时 ,LaSota株疫苗免疫鸡对基因Ⅶ型野毒株的攻击也只有 80 %的保护率 ,而不同基因型疫苗免疫鸡已能 10 0 %地被保护 ;LaSota株疫苗免疫鸡只有在HI效价在 9log2 以上时 ,方可 10 0 %地抵抗基因Ⅶ型野毒株的攻击。
- 吴志明赵淑娟程相朝吴庭才朱文文张志玲陈创
- 关键词：新城疫病毒基因型免疫效果
- 新城疫病毒地方分离株不同基因型灭活油乳苗的研制被引量：4
- 2004年
- 应用两株分离于当地流行的新城疫病毒基因Ⅵ型和Ⅶ型代表株(LD 3 00和LD 7 02),配以传统的LaSota株(基因Ⅱ型)成功地研制了不同基因型新城疫灭活油乳苗。经实验室检验及大田试验证明,该灭活苗安全可靠,其产生的HI抗体在接种后第42d仍保持7.5log2的效价,保护率在攻毒试验中达100%;在大田试验中,与新城疫弱毒疫苗联合应用,保护率可达99%以上,能有效地控制当地新城疫的暴发和流行。
- 程相朝吴志明吴庭才张春杰李银聚李慧琴王冰洁
- 关键词：新城疫基因型新城疫病毒地方分离株
- 鸡新城疫病毒地方野毒株的分离鉴定与致病性试验
- 2004年
- 从某一疑似新城疫病例的蛋鸡群中分离到一株病毒,经HA和HI试验、血清中和试验和动物回归试验,最终确认所分离毒株为新城疫病毒。经对分离株的MDT、ICPI和IVPI等致病指数的测定,表明该毒株为新城疫强毒株。
- 吴志明王婷程相朝吴庭才李清利马淑蕾
- 关键词：新城疫病毒新城疫
- 鸡新城疫病毒地方株F基因的扩增克隆与鉴定
- 2004年
- 应用RT PCR技术对分离自发病鸡群的新城疫病毒(NDV)的F基因进行了扩增,结果得到0.8kb的扩增产物。将该扩增产物克隆至pMD18 T载体中,经酶切和PCR鉴定后,证明与设计的目的片段完全相符,从而用分子生物学的方法确定了常规实验室诊断的正确性。
- 赵淑娟吴志明程相朝李银聚王婷朱文文赵海未
- 关键词：新城疫病毒F基因基因克隆地方株新城疫
