国家公益性行业科研专项(201303021)
- 作品数：3 被引量：18H指数：3
- 相关作者：魏利辉周益军任春梅季英华缪倩更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院湖南农业大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法被引量：10
- 2013年
- 针对小麦黄花叶病毒(WYMV)和中国小麦花叶病毒(CWMV)在症状、传播途径、发生规律等方面高度相似、难以用常规手段鉴定的问题,根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物CWWY-R2、CW1-F2和WY1-F2,以植物总RNA为模板、CWWY-R2为引物反转录合成cDNA。通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系:cDNA1.6μL,引物(10μmol.L-1)各0.4μL,10×PCR Buffer(不含Mg2+)2μL,dNTPs(10mmol.L-1 each)0.4μL,Taq DNA聚合酶(5U.μL-1)0.8μL,MgCl2(25mmol.L-1)0.8μL,ddH2O 13.2μL,合计20μL;PCR反应条件:94℃预变性5min,94℃50s,50℃50s,72℃90s,共30个循环,72℃延伸10min。WYMV和CWMV的PCR扩增预期目的片段分别为508和918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测,它们分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染,证明该方法准确性较高,可用于两种病害同步检测。
- 缪倩季英华任春梅魏利辉周益军程兆榜
- 关键词：小麦黄花叶病毒禾谷多粘菌复合PCR
- 探讨不同因素对白背飞虱在稻苗间传播南方水稻黑条矮缩病毒效率的影响被引量：5
- 2014年
- 结果表明,白背飞虱（5龄若虫、长翅型和短翅型成虫）在18～34℃的温度区间内均能在不同生育期的水稻上传毒,传毒率在3.3%～41.2%间.介体发育阶段、环境温度和水稻生育期均能显著影响该虫的传毒能力（P 〈0.01）,不同发育阶段白背飞虱的传毒能力依次是5龄若虫〉短翅型成虫〉长翅型成虫；26℃时该虫传毒率最高,其次是22℃,最后依次是28℃、18℃和34℃；苗龄越低传毒率越高.这三者中任意2因素间都有极显著的互作效应（P 〈0.01）,它们对该虫传毒的影响顺序依次是温度〉水稻生育期〉介体发育阶段〉环境温度×介体发育阶段〉环境温度×水稻生育期〉介体发育阶段×水稻生育期.不同品种的感染率不同,5个品种感染率从高到低的顺序分别是陵两优268（41.7%）、金优899（37.6%）、金优284（36.2%）、培两优981（32.1%）和威优644（29.3%）.其中,陵两优268的感染率显著高于其它品种（P〈0.05）,金优898和金优284之间感染率差异不显著（P〈0.05）,威优644的感染率显著低于其它品种（P〈0.05）.禁食时间在12 h以上时,该虫传毒能力显著降低（P〈0.05）.白背飞虱在稻苗间的传毒效率与水稻品种、环境温度、该虫发育阶段、水稻品种及生育期、该虫禁食时间长短密切相关,其中水稻生育期、温度和白背飞虱的发育阶段间还存在极显著的互作效应.
- 曹杨李有志
- 关键词：白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒环境温度
- 小麦黄花叶病毒蛋白P1与Rubisco互作验证
- 小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)大麦黄花叶病毒属(Bymovirus)成员之一,由土壤中禾谷多黏菌(Polymyxa gramini...
- 梁乐乐刘丽娟孙炳剑李洪连
- 关键词：小麦黄花叶病毒蛋白
- 文献传递
- 大麦黄矮病毒PAV青海分离物运动蛋白抗血清制备及其与同属BYDVs的血清学关系被引量：3
- 2020年
- 大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf viruses, BYDVs)属于黄症病毒科,主要以蚜虫为介体进行传播,引发多种作物减产或绝收。本文将BYDV-PAV青海分离物的运动蛋白(MP)克隆到原核表达载体pDB-MBP-His上,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),在IPTG诱导下表达蛋白分子量约为61 kDa的融合蛋白。将纯化后的蛋白作为抗原免疫‘新西兰’大白兔制备抗血清,Western blot检测本生烟瞬时表达带标签的MP蛋白,结果显示该抗血清效价为1∶32 000,灵敏度达1∶256,且该抗血清可与相差34个氨基酸的PAV015株系以及隶属于黄症病毒属其他的BYDVs(PAS、MAV、KerⅡ和KerⅢ)MP均能发生强烈的血清学反应,具有血清学相关性。本研究制备的大麦黄矮病毒PAV青海分离物运动蛋白多克隆抗体为探索BYDV-PAV运动蛋白的功能以及作用机制打下了基础。
- 胡汝检赵添羽左登攀王颖张宗英韩成贵
- 关键词：运动蛋白原核表达抗血清制备
