辽宁省自然科学基金(2001225002-3)
- 作品数：3 被引量：19H指数：3
- 相关作者：吴涛姜成钢于淼徐惠绵贾兰玲更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院秦皇岛市第一医院大连医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转化生长因子-β1小干扰RNA对胃癌细胞生物学行为的影响被引量：5
- 2006年
- 目的探讨载体介导的转化生长因子(TGF)-β1小干扰RNA(siRNA)对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响。方法构建TGF-β1特异性siRNA真核表达载体。转染胃癌细胞72 h后,以半定量逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测细胞中TGF-β1的mRNA和蛋白表达的变化；以噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术、细胞附壁试验和Miliicell小室测定细胞增殖、周期、体外黏附和侵袭力,并观察裸鼠体内成瘤性。结果与未处理组比较,TGF-β1-siRNA载体能明显下调TGF-β1 mRNA[(0．910±0．066)与(0．617±0．025)比较,P＜0．01]和蛋白[(120．00±8．72)与(41．00±5．57)比较,P＜0．01]。在胃癌细胞中的表达；细胞抑制率达30．18%,体外黏附、侵袭力下降,裸鼠体内成瘤性受到抑制。结论载体介导的TGF-β1 siRNA可显著下调TGF-β1在胃癌细胞中的表达,在一定程度上抑制其恶性生物学行为。
- 吴涛徐惠绵苏忠贾兰玲于淼姜成钢
- 关键词：转化生长因子-Β1小干扰RNA胃肿瘤
- 转化生长因子β_1小干扰RNA抑制SGC-7901腹膜转移被引量：10
- 2006年
- 吴涛徐惠绵吴晓华高娜姜成钢于淼贾兰玲
- 关键词：SGC-7901胃癌腹膜转移基因治疗技术肿瘤相关基因人胃癌细胞株
- TGF-β_1小干扰RNA影响人腹膜间皮细胞黏附胃癌细胞株SGC-7901的研究被引量：4
- 2006年
- 目的:观察人腹膜间皮细胞转染TGFβ1小干扰RNA后对胃癌细胞株SGC7901黏附的变化,探讨其治疗腹膜转移的作用。方法:使用线性化的pcPURβicassette质粒构建针对TGFβ1基因的siRNA表达载体;采用胰蛋白酶EDTA消化法,从人的腹膜组织中分离腹膜间皮细胞。将TGFβ1siRNA载体转染人腹膜间皮细胞,以半定量RTPCR和Western蛋白印迹方法检测转染后间皮细胞中TGFβ1表达水平的变化,以3HTdR掺入实验测定腹膜间皮细胞和人胃癌细胞株SGC7901之间的黏附变化。结果:电泳、DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确并已准确克隆入pcPURβicassette载体。免疫组化染色结果显示腹膜间皮细胞角蛋白、波形蛋白表达阳性,而白细胞共同抗原(CD45)、第Ⅷ因子相关抗原阴性。与对照组比较,TGFβ1siRNA载体能显著下调TGFβ1mRNA(0.779±0.091vs0.503±0.064,P=0.013)和蛋白(77.67±5.69vs29.33±6.03,P=0.001)在腹膜间皮细胞中的表达,间皮细胞黏附胃癌细胞的能力减弱。结论:载体介导的RNAi技术可成功地干扰TGFβ1在腹膜间皮细胞中的表达。同时,降低了间皮细胞黏附肿瘤细胞的能力,有望减少胃癌腹膜转移的发生。
- 吴涛高娜苏忠于淼姜成钢徐惠绵
- 关键词：载体介导RNAI间皮细胞
