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国家自然科学基金(30772273)
作品数:
4
被引量:14
H指数:2
相关作者:
王家祥
刘秋亮
郑树
余捷凯
贾佳
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相关机构:
郑州大学第一附属医院
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发文基金:
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作者
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王家祥
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刘秋亮
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肾母细胞瘤细胞株与正常胚肾细胞株微小RNA表达谱的差异分析
被引量:7
2010年
目的 探讨肾母细胞瘤G401与正常胚肾CCC-HEK-1细胞株中微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,为进一步研究相关miRNA在肾母细胞瘤发病机制中的作用奠定基础.方法 选取G401和CCC-HEK-1的各3个样本分别作为实验组和对照组,采用miRNA芯片筛选两者之间差异表达的miRNA,样品间表达变化标准以上调2倍/下调50.0%作为阈值范围,并用实时定量PCR验证miRNA芯片结果的可靠性.结果 上调超过2倍差异表达miRNA分子71个,其中上调超过8倍差异表达miRNA分子11个;其中下调至50.0%以下差异表达miRNA分子59个,其中下调至12.5%以下差异表达miRNA分子11个.总体上,G401和CCC-HEK-1之间差异表达显著.结论 G401和CCC-HEK-1之间存在差异表达miRNA分子,它们可能与肾母细胞瘤的形成有关.
王家祥
胡倩
刘秋亮
韦源
关键词:
WILMS瘤
微RNAS
寡核苷酸序列分析
肾母细胞瘤患儿血清蛋白质标记物的筛选及鉴定
被引量:7
2009年
目的筛选肾母细胞瘤患儿特异性血清蛋白质标记物并对其进行鉴定,以确定其作为肾母细胞瘤血清学诊断和预后监测的特异标志物。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术检测肾母细胞瘤患儿手术前后及正常小儿的血清蛋白质组,筛选差异蛋白质峰,并对目标蛋白质进行分离纯化、酶解,采用液质联用串联质谱(LC—MS/MS)分析,用SEQUST检索程序查询美国Bioworks公司提供的蛋白质序列数据库。结果经SELDI—TOF—MS技术筛选出m/z位于6455.5和6984.4的蛋白质标志物在肾母细胞瘤组低表达(表达强度为1029±364、297±126),正常小儿组高表达(2108±837、753±226),差异均有统计学意义(均P〈0.01);m/z位于9190.8的蛋白质标志物在肾母细胞瘤术前组低表达(283±154),术后组和正常小儿组高表达(5974±657、6231±519)差异均有统计学意义(均P〈0.01)。对m/z位于6455.5和9190.8的标志物进行鉴定,结果分别为载脂蛋白CⅢ和触珠蛋白。结论检测血清中载脂蛋白CⅢ和触珠蛋白含量可能成为肾母细胞瘤的血清学诊断、恶性度分级和预后监测指标,值得进一步研究与应用。
王家祥
杨少波
刘秋亮
董瑞
樊玉霞
张谦
杨福全
吴鹏
余捷凯
郑树
关键词:
WILMS瘤
蛋白质组学
生物学标记
体外培养的肾母细胞瘤细胞株与正常胚肾细胞株差异蛋白的表达
2008年
目的运用SELDI蛋白质芯片技术分析体外培养的肾母细胞瘤细胞株(G401)与正常胚肾细胞株(CCC-HEK-1)蛋白质表达差异。方法在体外培养G401和CCC-HEK-1细胞株,收获细胞和培养液,将细胞用细胞裂解液裂解后,采用SELDI—TOF-MS技术用WCX2芯片检测(2-401和CCC-HEK-1的蛋白质谱差异。结果体外培养的肾母细胞瘤细胞株与正常胚肾细胞株的蛋白质存在差异表达,WCX2芯片共发现差异峰19个,与CCC-HEK~1细胞相比,其中12个在肾母细胞瘤细胞株中高表达,7个差异蛋白在肾母细胞瘤细胞株中低表达。G401细胞裂解液与培养液的蛋白质表达差异峰19个,14个差异蛋白在G401细胞裂解液中高表达,5个在G401细胞裂解液中低表达;G401细胞裂解液与培养液的比较相似蛋白质为3个。结论SELDI蛋白芯片技术检测肾母细胞瘤细胞株与正常胚肾细胞株蛋白质的差异表达方法简便,灵敏度高,重复性好。
王家祥
贾佳
刘秋亮
安乾
余捷凯
郑树
关键词:
肾母细胞瘤
蛋白质芯片
SELDI技术分析肾母细胞瘤体外和体内分泌蛋白质的表达
被引量:1
2009年
目的运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析肾母细胞瘤细胞株G401细胞培养液与正常胚肾细胞株CCC-HKE-1细胞培养液的差异蛋白质,分析G401利用血清中的蛋白质,并比较G401培养液与患儿血清存在的相似蛋白质。方法培养含10%胎牛血清及无血清的G401细胞和含10%胎牛血清的胚肾细胞株CCC-HEK-1细胞,收集以上三种培养液及G401裂解液,收集肾母细胞瘤患儿术前血清。将以上样本应用于WCX2(弱阳离子交换)芯片,用SELDI-TOF-MS技术检测、阅读和分析各组间差异及相似蛋白质。结果G401和CCC-HEK-1培养液间存在显著的蛋白质差异表达;G401分泌的蛋白质质荷比有:3996、4084、4144、4215、4232、5980、6069、6094、6855、8553Da;G401利用血清中的蛋白质质荷比有:3830、3917、4144、4460、4795、4932、5688、5981、6023、6050、6075、6094、6188、6203、6857、7064、7308、7964Da;质荷比为4082、4143Da的蛋白质在肿瘤细胞培养液和患儿血清中都检测到。结论SELDI-TOF-MS技术应用于体外培养的肾母细胞瘤细胞和患儿血清方法简便、敏感性高、重复性好;从而为从蛋白质水平研究肾母细胞瘤的发病机制和治疗靶位的寻找奠定基础。
王家祥
安乾
贾佳
余杰凯
郑树
关键词:
肾母细胞瘤
蛋白质组学
SELDI技术
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