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半胱亚磺酸脱羧酶在Ishikawa细胞中的表达与检测: 2014年; 以半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)在Ishikawa细胞中的表达与检测为例,进行了生物技术大实验教学模式的改革。实验首先体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞,然后分别采用免疫细胞化学、RT-PCR、Western Blot检测了CSD基因在该细胞中的表达。结果表明,在Ishikawa细胞中有CSD mRNA和蛋白的表达。通过完成上述大实验,学生所学的理论知识得到综合应用,培养了创新精神与科学思维。; 范晶晶郑秋闿

小鼠子宫平滑肌细胞的分离培养及鉴定被引量：1: 2012年; 为寻找研究子宫平滑肌细胞生理和病理的实验研究模型,试建立一种新的简易机械分离培养小鼠子宫平滑肌细胞的方法。先采用机械分离方法分离子宫平滑肌,再用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶混合消化法消化,可获得90%以上具有正常代谢活性的小鼠子宫平滑肌细胞,存活的细胞经倒置显微镜观察和免疫荧光染色进行鉴定。原代培养3d后细胞贴壁生长,约2周后细胞汇合成片,所培养的细胞在倒置显微镜下呈梭形和典型"峰-谷"样生长,平滑肌细胞肌动蛋白(α-Actin)免疫荧光染色强阳性。采用本法体外培养的小鼠子宫平滑肌细胞生长良好,纯度高,可用于小鼠子宫平滑肌细胞生理和病理等方面的研究。; 范晶晶; 关键词：小鼠子宫平滑肌

OPA柱前衍生法测定小鼠股四头肌中牛磺酸的含量被引量：1: 2015年; 建立了高效液相色谱（HPLC）邻二甲醛（OPA）柱前衍生法检测小鼠股四头肌中牛磺酸（Tau）含量的检测方法。肌肉组织经前处理,过强酸阳离子交换树脂柱,与OPA衍生反应3 min,采用甲醇/磷酸盐（体积分数1∶1,p H4.9）为流动相,L-谷氨酰胺（Glu）为内标,反向C18色谱柱（Waters,4.6 mm×150 mm,5μm）,紫外检测波长340 nm,柱温25℃,流速0.6 m L/min,进样量20μL分析检测牛磺酸含量。结果表明,牛磺酸在6.25-187.7 ng/m L有良好的线性关系,相关系数R2=0.999 4,回收率范围91.8%-101.8%,RSD=3.2%,其相对标准偏差均小于5%,牛磺酸的保留时间7.32 min,其含量3.18 mg/g。该方法能很好地将组织中的蛋白质和其他氨基酸等干扰物去除,减少色谱过程中杂峰的干扰,分离度好、精确度高、操作简便,可用于快速检测哺乳动物组织中牛磺酸的含量。; 范晶晶郑秋闿; 关键词：柱前衍生高效液相色谱牛磺酸股四头肌

半胱亚磺酸脱羧酶在成年小鼠副性腺器官中的表达: 2012年; 采用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学方法检测了CSD在小鼠副性腺器官中mRNA和蛋白水平的表达。结果显示,CSD在小鼠副性腺器官中都有mRNA和蛋白水平的表达。CSD主要定位于精囊腺的高柱状上皮细胞、前列腺的腺上皮细胞和尿道球腺的腺上皮细胞中。结果表明雄性副性腺器官可以通过CSD合成通路参与牛磺酸的合成。; 范晶晶庞立义; 关键词：小鼠

牛磺酸对昆明小鼠早期胚胎体外发育和着床的影响被引量：4: 2016年; 本研究主要探讨了牛磺酸对昆明(KM)小鼠体外胚胎发育及对胚胎着床的作用。在mKSOM(modified potassium simplex optimized medium)胚胎体外培养液中分别添加不同浓度牛磺酸,培养24、72h后分别统计4-细胞率、囊胚率、囊胚总细胞数;采用子宫角注射的方法,研究牛磺酸转运抑制剂β-丙氨酸对孕D9胚胎着床数的影响。结果表明,添加10mmol/L牛磺酸培养液组的胚胎4-细胞率高于对照组(P<0.05),囊胚率与囊胚总细胞数明显高于对照组(P<0.01)。子宫角注射β-丙氨酸(20μg/mL)显著降低D9着床的胚胎数。本研究初步明确了牛磺酸对小鼠体外胚胎发育及对胚胎着床的影响,为进一步研究胚胎发育和着床提供参考。; 范晶晶郑秋闿; 关键词：牛磺酸胚胎发育着床

SOE-PCR二步法构建shRNA干扰质粒: 2013年; 通过拼接重叠延伸PCR(SOE-PCR)二步法成功地建立了一种方便的shRNA干扰质粒的构建方法。将目的基因———半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)特异性的shRNA序列用SOE-PCR二步法插入到pEGFP-H1-shRNA质粒中,经菌液PCR、酶切、测序鉴定,证明pEGFP-H1-CSD shRNA干扰质粒与预期结果一致,可以用于细胞转染和RNA干扰实验。采用本方法能快速、高效构建RNA干扰质粒,为研究基因功能提供帮助。; 范晶晶郑秋闿; 关键词：SOE-PCR SHRNA RNA干扰

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博士科研启动基金(2010BS04)