国家自然科学基金(81072091H1619)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 2-DG对雄激素非依赖型前列腺癌细胞多西紫杉醇化疗敏感性的作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）对多西紫杉醇（Doc）诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3和DU145细胞凋亡的增敏作用及其可能的机制。方法采用MTr法检测Doe与2-DG单用或合用对细胞增殖的抑制作用，计算q值反映联合用药效果；流式细胞技术（FCM）检测细胞凋亡率；ATP检测试剂盒检测细胞内ATP含量的变化；免疫印迹Western印迹技术检测泛素蛋白酶体系统（UPS）功能的内源性蛋白ubiquitinatedprotein（Ub）、hspT0的表达。结果2-DG能抑制PC3及DU145细胞的增殖，呈剂量、时间依赖性，但诱导凋亡作用不明显；Doc0．1、0．5、2．5nmolfL对PC3细胞及DU145细胞作用48h的增殖抑制率分别为10．71％、25．32％、56．46％及12．28％、23．94％、63．43％。联用2-DG1．0g／L后增殖抑制率为：27．15％、58．74％、87．95％及29．53％、59．41％、90．48％，Doc与2-DG联用后可明显增加其抑制率，两药有协同作用（q值均〉1．15）；Doc0．5nmol／L与2-DG1．0g／L联合作用PC3细胞及DUl45细胞48h的凋亡率为：46．49％及53．64％，明显高于Doc0．5nmol／L单独作用的凋亡率：21．30％及18．92％（均P〈0．05）；2-DG1．0g／L分别作用PC3和DU145细胞0、12、24、48、72h后，ATP检测试剂盒测ATP相对浓度为13．75、11．23、10．19、9．81、9．02和15．00、12．59、11．38、10．54、10．37；同时Western印迹检测发现ub及HspTO蛋白出现聚集。结论2-DG可增强雄激素非依赖型前列腺癌细胞对Doc化疗的敏感性；其机制可能与下调细胞内ATP浓度导致蛋白酶体功能抑制有关。
- 周萍林煜荣黄马平谢克基汤平
- 关键词：多西紫杉醇蛋白酶体
- 左旋紫草素诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡被引量：1
- 2013年
- 目的探讨左旋紫草素诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。方法实验分为对照组（只加DMSO）、不同浓度的左旋紫草素组（2、4、8、16、32μmol／L），作用PC3细胞24h后收集细胞，应用MTT法检测各组细胞生长抑制率并计算左旋紫草素半数有效抑制浓度ICsoμmol／L左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72h后收集细胞，用MTF法计算各时间点细胞生长抑制率。PC3细胞加入8Ixmol／L的左旋紫草素，分别培养0、12、24、48h后收集细胞，流式细胞仪检测各时间点细胞凋亡率。8μmol／L浓度的左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72h后收集细胞，荧光分光光度计检测caspases3的活性。将PC3细胞分为对照组（DMSO）、z．DEVD．fmk（caspase3抑制剂，20Iμmol／L）、z—IETD—fmk（caspase9抑制剂，20μmol／L）和z．LEHD—fmk（caspase8抑制剂，20μmol／L）组，各组加入抑制剂1h后加入左旋紫草素，24h后收集细胞，MTT法计算各组细胞生长抑制率。结果左旋紫草素能抑制PC3细胞的增殖，作用24h后随浓度的升高，细胞生长抑制率逐渐增加，ICso为（7．91±0．73）μmol／L。8μmol／L左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72h后，随着时间的延长，细胞生长抑制率逐渐升高。左旋紫草素8μmol／L作用12、24、48h后，PC3细胞的凋亡率分别为（5．73±0．82）％、（19．15±1．14）％、（32．68±1．03）％，与0h时（0．98±0．34）％比明显升高（均P〈0．05）。左旋紫草素8p,mol／L作用PC3细胞后，caspase3活性6h时开始升高，在24h达高峰，其后开始下降。caspase3、caspase9、caspase8抑制剂均可明显逆转左旋紫草素对PC3细胞增殖的抑制作用，与DMSO对照组比较，细胞生长抑制率由（50．63±O．99）％分别降至（25．30±0．58）％、（30．81±0．35）％、（39．64±1．19）％（均P〈O．05）。结论左旋紫草�
- 周萍林煜荣黄马平谢克基汤平
- 关键词：左旋紫草素PC3细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 桑根酮C抗炎作用实验研究被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨桑根酮C对小鼠急性炎症反应的作用及其机制。方法:昆明小鼠随机分成6组,每组10只,分别腹腔注射桑根酮C 5、15、50、100 mg/kg、地塞米松5 mk/kg(阳性对照组)、相同体积的二甲基亚砜(DMSO,溶剂组),给药30 min后,各鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 m L/只,30 min后处死小鼠,剖腹收集腹腔洗液,应用紫外分光光度计测上清液吸光度A值分析桑根酮C对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响。6组给药30 min后观察桑根酮C对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响,在各鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜胶30μL致炎,5 h后处死小鼠,对称剪下鼠足计算肿胀度。然后去皮剪碎后离心取上清液,用考马斯亮蓝法测蛋白的含量、ELISA法测定足跖组织中各种炎症反应因子髓过氧化物酶(MPO)、NO、前列腺素2(PGE2)、白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子(TNFα)的水平。结果:桑根酮C可抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加和抑制角叉菜胶引起的小鼠足肿胀,溶剂组A值和肿胀度均高于阳性对照组[0.693±0.101比0.491±0.051,(78.37±6.55)mg比(39.52±5.11)mg,均P<0.05],桑根酮C各剂量组A值和小鼠足肿胀度均低于溶剂组(均P<0.05),且随剂量的增加A值和足肿胀度降低明显,相关分析显示桑根酮C对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加和角叉菜胶所致小鼠足肿胀的抑制作用呈剂量效应关系(r=0.761,P=0.013;r=0.794,P=0.008)。桑根酮C各剂量组和阳性对照组能明显降低炎症反应渗出液中蛋白及MPO、NO、PGE2、TNFα及IL-1β的含量,各组各指标含量均低于溶剂组(均P<0.05),且随桑根酮C抑制各炎症反应因子的释放呈剂量效应关系。结论:桑根酮C通过减少中性粒细胞浸润及抑制各种炎症反应介质的生成和释放来发挥抗炎作用。
- 周萍董晓先汤平
- 关键词：角叉菜胶急性炎症
- 桑根酮C通过激活caspase 3及caspase 9诱导前列腺癌PC3细胞凋亡被引量：15
- 2017年
- 目的探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 MTT法检测桑根酮C对PC3细胞増殖的抑制作用:实验分6组,分别加入不同浓度的桑根酮C(0、1、5、20、50、100μmol/L),作用24 h检测细胞生长抑制率;20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、6、12、24、48 h收集细胞,MTT法检测生长抑制率。流式细胞技术检测细胞凋亡率:20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、12、24、48 h收集细胞检测凋亡率。荧光分光光度计检测caspase 3的活性:20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在0、6、12、18、24、48 h收集细胞,检测caspases 3的活性。MTT法检测caspase 3、caspase 8及caspase 9抑制剂对桑根酮C抑制PC3细胞增殖的影响:实验分4组,分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-LEHD-fmk及z-IETD-fmk,1 h加入桑根酮C,24 h收集细胞,MTT法计算细胞生长抑制率。结果桑根酮C能抑制PC3细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,桑根酮C 1、5、20、50、100μmol/L作用PC3细胞24 h的增值抑制率分别为:4.86%、12.92%、52.34%、82.05%、87.45%,1μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),其他组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。半数有效抑制浓度IC50为18.76μmol/L。20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在6、12、24、48、72 h检测增值抑制率为:10.57%、27.09%、51.88%、80.73%、87.99%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。20μmol/L桑根酮C可诱导PC3细胞的凋亡,在12、24、48 h的凋亡率分别为:7.43%、20.91%、37.56%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。检测caspases 3的活性18 h比对照组增加了7.6倍,应用caspase抑制剂后发现caspase 3及caspase 9的抑制剂可显著逆转桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用,抑制率从52.48%降到24.29%及28.81%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。而caspase8抑制剂作用不明显,与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05)。结论桑根酮C可通过�
- 周萍董晓先汤平
- 关键词：前列腺癌PC3细胞CASPASE凋亡
